人参果复方颗粒抗疲劳作用的研究
2012-04-13张凤清付彦臣刁冬梅
张凤清,付彦臣,刁冬梅
(1.长春工业大学 化学与生命科学学院,吉林 长春 130012;2.四平宏宝莱饮品股份有限公司,吉林 四平 136000)
现代医学认为疲劳是机体过用(超限)而引起的功能降低并出现不适的状态,主要表现为疲劳困倦,可出现头晕、健忘、睡眠质量下降等伴随症状[1]。疲劳的产生与能源物质消耗、代谢产物堆积、内环境稳定性失调、自由基影响等因素关系密切[2]。长期以来,寻找安全、有效、无毒副作用的有效药物来延缓疲劳的发生和加速疲劳的消除一直是药物研究的热点之一,以中草药为原料的保健食品在这一领域展示出广阔的前景。
人参果为五加科植物人参(Panax ginsengC.A.Mey.)的成熟果实,人参果中富含人参皂苷,此外还含有多糖、生物碱、挥发油、氨基酸、无机盐、胡萝卜苷、β-谷甾醇等多种化学成分[3-4]。国内外学者研究表明,人参果的药理作用在许多方面与人参相似,但是在许多功能方面,人参果又具有人参无法比拟的独特作用,其具有降低血糖、抗休克、保护心肌、保护肾功能、提高记忆力、增强免疫力、抗疲劳等多种保健作用[5-7]。此外,据文献报道,红景天[8-10]、灵芝[11-13]和枸杞子[14-16]中也含有丰富的活性成分,在缓解体力疲劳方面起着重要的作用。因此,本品利用人参果、红景天、灵芝、枸杞子为原料,辅以白砂糖,采用现代制备工艺研制成“人参果复方颗粒”,该产品符合国家食品药品监督管理局保健食品原料使用规定,本文旨在研究人参果复方颗粒的抗疲劳作用。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品
人参果复方颗粒(主要成分为人参果、红景天、灵芝、枸杞子等),固体颗粒剂,铝塑复合膜袋装,外包装为纸盒。由长春工业大学化学与生命科学学院研制,吉林紫鑫药业股份有限公司加工。
1.1.2 实验动物
选用吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供的ICR清洁级雄性小鼠,体重18g~22g,生产许可证号:SCXK-(吉)2007-0003。小鼠基础饲料由长春市亿斯实验动物技术有限责任公司提供,生产许可证号:SCXK-(吉)2010-0001。本清洁级动物室环境设施合格证号:吉动设字10-1005号,实验动物使用许可证号:SYXK(吉)2010-0011,清洁级。
1.1.3 剂量选择
厂家推荐成人(体重以60kg计),每天摄入2次,每次1袋,5g/袋,即166.7mg/kg BW d,以厂家日推荐成人摄入量的1、10、30倍设置灌胃剂量,即166.7mg/kg BW d、1666.7mg/kg BW d、5000mg/kg BW d,分别取1667mg、16667mg、50000mg定型产品加蒸馏水至200mL,蒸馏水作阴性对照组,该样品含糖量81.33%,因此以本试验相应的高剂量组含糖量20.33%设糖对照组。各组小鼠灌胃量均为0.2mL/10g BW d,连续灌胃30d。
1.1.4 仪器与试剂
日本东芝TBA-120FR型全自动生化分析仪,SBA-40C型生物传感分析仪,血乳酸测试酶膜,尿素测定试剂盒,肝糖原试剂盒,游泳箱(50cm×50cm×40cm),电子天平,722分光光度计,铅皮,秒表等。
1.2 方法
1.2.1 人参果复方颗粒的制备
人参果复方颗粒的生产工艺:
1.2.2 负重游泳试验
末次给予受试物30min后,置小鼠在游泳箱中游泳,水深约30cm,水温(25±1)℃,鼠尾根部负荷5%体重的铅皮。记录小鼠自游泳开始至死亡时间,作为小鼠游泳时间(min)。
1.2.3 血清尿素测定
末次给予受试物30min,在温度为(30±0.5)℃的水中游泳90min,休息60min摘眼球采血,取血清,进行尿素含量测定。
1.2.4 肝糖原测定
末次给予受试物30min处死小鼠取肝脏,经生理盐水漂洗后用滤纸吸干,精确称取肝脏75mg,每管加入225μL试剂盒提供的碱溶液,用簿膜封住管口,扎一透气孔,沸水浴20min,冷却后加入7.2mL蒸馏水,充分混匀,按试剂说明书操作加入显色剂,沸水浴5min,用722分光光度计在波长620nm处进行比色测定,按说明书提供的公式换算肝糖原。
1.2.5 血乳酸测定
末次给予受试物30min后采血20μL,再在温度为(30±0.5)℃的水中不负重游泳10min,分别于游泳后立即(游泳后0min)和游泳后休息20min各采血20μL,采用山东省科学院生物研究所生产的生物传感分析仪测定以上3个时间点的血乳酸值。以3个时间点血乳酸曲线下面积(计算公式见后)判断结果。
1.2.6 统计分析
数据的统计处理采用SPSS11.5统计软件中单因素方差分析进行均值比较,方差齐时,各组间两两比较用LSD法;方差不齐时,各组间两两比较采用Tamhane法。
2 结果与分析
2.1 人参果复方颗粒对小鼠负重游泳时间及小鼠增重的影响
表1 人参果复方颗粒对小鼠负重游泳时间及小鼠增重的影响Table 1 Effect of complex ginseng fruit granule on swimming time and body weight of mice
由表1可见,经口给予小鼠不同剂量的人参果复方颗粒30d,各实验组小鼠增重与糖对照组比较无显著性差异(p>0.05),高剂量组游泳时间长于糖对照组,且差异有显著性(p<0.05),说明人参果复方颗粒能延长小鼠负重游泳时间而对小鼠增重无影响。
2.2 人参果复方颗粒对小鼠血清尿素及小鼠增重的影响
由表2可见,经口给予小鼠不同剂量的人参果复方颗粒30d,各实验组小鼠增重与糖对照组比较无显著性差异(p>0.05),高、中剂量组小鼠游泳后血清尿素低于糖对照组,且与糖对照组比较有显著性差异(p<0.01,p<0.05),说明人参果复方颗粒具有抑制小鼠游泳后血清尿素升高的作用而对小鼠增重无影响。
2.3 人参果复方颗粒对小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影响
表2 人参果复方颗粒对小鼠游泳后血清尿素及小鼠增重的影响Table 2 Effect of complex ginseng fruit granule on content of blood urea nitrogen and body weight of mice
表3 人参果复方颗粒对小鼠肝糖原含量及小鼠增重的影响Table 3 Effect of complex ginseng fruit granule on the content of liver glycogen and body weight of mice
由表3可见,经口给予小鼠不同剂量的人参果复方颗粒30d,各实验组小鼠增重与糖对照组比较无显著性差异(p>0.05),仅高剂量组肝糖原储备高于糖对照组且差异具有显著性(p<0.05),表明人参果复方颗粒能增加肝糖原储备但对小鼠增重未见影响。
2.4 人参果复方颗粒对小鼠血乳酸值及小鼠体重的影响
表4 给予人参果复方颗粒小鼠游泳前、后及休息20min 三个时间点血乳酸值Table 4 Change of the contents of blood lactic acid after overfeeding complex ginseng fruit granule
由表5可见,经口给予小鼠不同剂量的人参果复方颗粒30d,各实验组小鼠增重与糖对照组比较无显著性差异(p>0.05),各剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积虽有所降低,但与糖对照组比较无显著性差异(p>0.05),说明人参果复方颗粒对抑制游泳时血乳酸的产生及小鼠增重均无影响。
表5 人参果复方颗粒对小鼠三个时间点血乳酸曲线下面积及小鼠增重的影响Table 5 Effect of complex ginseng fruit granule on the area of blood lactic acid under the curve in three time points and body weight of mice
3 结论
经口给予小鼠人参果复方颗粒166.7、1666.7、5000mg/kg BW d,连续灌胃30d,与糖对照组比较5000mg/kg BW d剂量组能延长小鼠负重游泳时间,减少小鼠游泳时血清尿素的产生,增加肝糖原储备;1666.7mg/kg BW d剂量组能减少小鼠游泳时血清尿素的产生,与糖性对照组比较有显著性差异(p<0.05),各剂量组对小鼠体重及血乳酸的产生均未见影响。由此判定人参果复方颗粒具有缓解体力疲劳功能。
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