HPLC法测定宣清止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量

王 戈，赵培敬

(南阳市食品药品检验所，河南南阳473061)

宣清止咳糖浆具有宣肺清热、化痰止咳的功效，可用于治疗风热客肺所致的气管炎、支气管炎、肺炎、肺脓肿、支气管扩张、支气管哮喘等病症。由麻黄、苦杏仁、甘草、黄芩、桔梗等提取制成。制剂标准为豫药制字Z04130046。麻黄为方中主药，盐酸麻黄碱为其主要活性成分，原标准中仅有麻黄的薄层色谱法鉴别，而没有盐酸麻黄碱的含量测定。不利于制剂质量的控制。本文采用高效液相色谱法测定宣清止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量，方法简便、快速、重现性好，现报道如下。

1 仪器与试剂

LC－2010C高效液相色谱仪(日本岛津公司);盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号:171241－201007);宣清止咳糖浆(新野县中医院)。试剂中甲醇为色谱纯，水为纯化水，氢氧化钠、乙醚、盐酸、磷酸二氢钾等均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱:Hypersil C18(4.6 mm×250 mm，5 μm);流动相:0.01 mol·L－1磷酸二氢钾(用磷酸调节pH至2.5)－甲醇(90∶10);流速:1.0 mL·min－1;检测波长:210 nm;柱温:25℃;进样量:10 μL。在上述条件下盐酸麻黄碱与相邻成分实现基线分离。

2.2 对照品溶液的制备 取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加0.1%盐酸甲醇溶液制成每1 mL含40 μg的溶液，作为对照品溶液［1］。

2.3 供试品溶液的制备 精密吸取宣清止咳糖浆10 mL，加水20 mL，加5mol·L－1氢氧化钠溶液5 mL，轻轻摇匀，用乙醚振摇提取4次，每次40 mL，合并乙醚液，加0.1%盐酸甲醇溶液2 mL，摇匀，挥干，残渣加0.1%盐酸甲醇溶液使溶解于50 mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液［2］。

2.4 阴性对照溶液的制备 取处方中除去麻黄外的其他药材，照制法制取缺麻黄阴性样品。按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液，测定。

2.5 线性关系考察 精密称取盐酸麻黄碱对照品适量，加0.1%盐酸甲醇溶液制成每1 mL含98.2 μg的溶液。精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL分别置10 mL量瓶中，加0.1%盐酸甲醇溶液并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液各10 μL，注入液相色谱仪测定，记录色谱图，将所测得的盐酸麻黄碱峰面积Y和进样量X进行回归，得方程:Y=402 892 X+2 309，r=0.999 7(n=6)。结果表明盐酸麻黄碱进样量在9.82～98.2 μg·mL－1范围内呈现良好的线性关系。

图1 盐酸麻黄碱对照品HPLC图

图2 宣清止咳糖浆HPLC图

图3 阴性对照溶液HPLC图

2.6 精密度试验 精密吸取同一份盐酸麻黄碱对照品溶液10 μL，重复进样5次，按上述色谱条件测定，盐酸麻黄碱面积RSD为0.62%。

2.7 重现性试验 取同一批号的宣清止咳糖浆，按2.3方法分别制备5份供试品溶液，按上述色谱条件测定，盐酸麻黄碱的含量平均为0.349 8 mg·mL－1，RSD为0.74%(n= 5)。表明该方法重现性良好。

2.8 稳定性试验 按2.3方法制备样品溶液，在室温下放置0、2、4、6、8、10 h，按上述色谱条件测定，盐酸麻黄碱峰面积RSD为0.56%，表明供试品溶液在10 h内保持稳定。

2.9 回收率试验 采用加样回收，精密量取6份已知含量的样品(含量为0.342 1 mg·mL－1)各5 mL，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品溶液(1.692 5 mg· mL－1)各1 mL，按供试品制备方法制备，进样测定，计算回收率，结果见表1。

表1 回收率试验结果(n=6)

2.10 样品测定 取宣清止咳糖浆5批，按上述方法制备供试品溶液和对照品溶液，精密量取各溶液10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，5批样品含量分别为0.332 6、0.356 1、0.355 0、0.348 3、0.351 1 mg·mL－1。

3 讨论

曾有文献报道［2，3］HPLC法测定中药中麻黄碱的含量，以甲醇－水、乙腈－水为流动相进行分离，但分离度不好，基线没有得到很好的改善。本文选用C18色谱柱，以0.01 mol ·L－1磷酸二氢钾(用磷酸调节pH至2.5)－甲醇为流动相，比例90∶10，使得盐酸麻黄碱和相邻峰得到较好的分离，提高了分离度，色谱峰形对称，基线平直，系统稳定。可作为该制剂的质量控制方法。

［1］ 国家药品监督管理局.国家中成药标准汇编内科肺系分册［S］.北京:人民卫生出版社.2002:263－264.

［2］ 景金柱，余卫兵，毕雪艳，等.HPLC测定麻杏止咳糖浆中盐酸麻黄碱的含量［J］.河北医药，2006，28(3):225－226.

［3］ 李红霞，丁明玉，吕琨，等.高效液相色谱法则测定麻黄及其制剂中的麻黄类生物碱和川芎嗪［J］.色谱，2001，19(2):161－163.