52例2型糖尿病患者氧化应激状况分析*

王锦支,程姗姗,冯琳琳,蒋红梅△

(1.贵阳医学院附属医院生化科,贵阳 550004;2.贵阳医学院临床微免教研室,贵阳 550004)

52例2型糖尿病患者氧化应激状况分析*

王锦支1,程姗姗2,冯琳琳2,蒋红梅2△

(1.贵阳医学院附属医院生化科,贵阳 550004;2.贵阳医学院临床微免教研室,贵阳 550004)

目的探讨氧化应激在2型糖尿病(T2DM)发生､发展中的作用｡方法 选择2010年6月至2011年2月贵阳医学院附属医院住院的T2DM患者52例为治疗组,取同期健康志愿者35例为对照组｡采用比色法测定两组总抗氧化能力(TAOC)､谷胱甘肽(GSH)､超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)指标,对两组检测指标进行比较｡结果与对照组相比,治疗组患者血清SOD､GSH及MDA水平明显增高(P0.05)｡与对照组相比,伴各种并发症的T2DM患者血清GSH和MDA水平均明显增高(P0.01);存在任何一种并发症的T2DM患者､并发周围神经病变的T2DM患者､并发视网膜病变的T2DM患者及并发肾病的T2DM患者血清中SOD水平均高于无并发症的T2DM患者(P0.05);并发肾病的T2DM患者较未并发肾病的T2DM患者血清MDA水平明显增高(P0.05)｡T2DM患者空腹血糖值与血清T-AOC､SOD､GSH､MDA水平均无明显相关性(P0.05)｡结论T2DM发生､发展过程中存在氧化应激紊乱,提示高氧化水平可能在糖尿病肾病的发生､发展中起着重要的作用｡

糖尿病,2型;氧化性应激;糖尿病并发症

近年来的研究提示,糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者体内可能存在不同程度的氧化应激紊乱[1-2],但目前详细机制尚不明确｡氧化应激是体内活性氧化物产生多于清除的氧化还原反应失衡的病理状态,主要通过损伤的DNA碱基､蛋白质氧化产物及脂质过氧化产物等参与许多慢性进行性疾病的发生和发展[3]｡糖尿病高血糖状态下,一方面机体活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生增多,形成过多氧自由基引起脂质过氧化,使细胞膜结构和功能发生改变,对核酸碱基及蛋白质氨基酸进行氧化修饰,使DNA和(或)蛋白质损伤[4]｡同时,ROS还可以诱导产生内皮素-1(endothelin,ET-1)､血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)､白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)等炎性细胞因子及免疫标志物,加重炎性细胞反应,进而这些炎症细胞因子反过来可以提高β细胞对自由基的敏感性,刺激炎症细胞及β细胞产生更多的自由基,从而造成恶性循环[5]｡现将本研究中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者的检测指标,如总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)､谷 胱 甘 肽 (glutathione,GSH)､超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的氧化应激在糖尿病发生､发展中的作用报道如下｡

1 资料与方法

1.2.1 一般资料 选择2010年6月至2011年2月贵阳医学院附属医院住院的T2DM患者52例为治疗组,其中男32例,女20例;年龄46～80岁,平均63.10岁;葡萄糖氧化酶法测得血糖值为(10.36±4.27)mmol/L｡所有患者均符合1999年WHO提出的糖尿病诊断和分类标准[6]｡根据眼底､尿微量清蛋白检查,以及是否有糖尿病微血管并发症对所有患者进行分类｡其中无糖尿病并发症6例;糖尿病并发酮症酸中毒13例,并发周围神经病变29例,并发肾病30例,并发视网膜病变28例,部分患者同时存在两种或两种以上并发症｡所有患者均予以药物和(或)胰岛素治疗,不伴有肿瘤及其他自身免疫性疾病｡取同期健康志愿者35例为对照组,其中男6例,女29例;年龄22～80岁,平均38.8岁;经检查血糖及其他生化指标正常｡

1.2 试剂与仪器 GSH､T-AOC､MDA､SOD检测试剂盒购于南京建成生物公司,使用721型分光光度计进行检查｡

1.3 指标检测 采集空腹静脉血3～5mL,分离血清进行测定｡T-AOC采用Fe3+/Fe2+还原法测定,SOD采用黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶法测定,GSH采用5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)法[5,5-dithiobis(2-nitrobenzoic acid),DTNB]测定,MDA采用硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)测定｡操作严格按照试剂盒说明书进行｡

1.4 统计学处理 应用SPSS13.0软件进行统计学处理,计量资料以±s表示,组间比较采用t检验,以P0.05为差异有统计学意义｡

2 结 果

2.1 T2DM患者血清氧化应激指标检测结果 与对照组相比,治疗组患者血清SOD､GSH及 MDA水平明显增高(P0.05);两组血清T-AOC水平比较差异无统计学意义(P0.05),见表1｡

表1 两组患者血清氧化应激指标比较(±s)

表1 两组患者血清氧化应激指标比较(±s)

*:P0.05,与对照组比较｡

组别 n T-AOC(U/mL)SOD(U/mL)GSH(g/L)MDA(nmol/mL)治疗组 52 26.35±17.29 97.23±21.02* 15.25±4.33* 4.49±2.93*对照组 35 22.50±7.13 88.67±7.41 8.43±3.75 2.00±0.41

2.2 伴各种并发症的T2DM患者血清各指标分析 与对照组相比,伴各种并发症的T2DM患者血清GSH和MDA水平均明显增高(P0.01);存在任何一种并发症的T2DM患者､并发周围神经病变的T2DM患者､并发视网膜病变的T2DM患者及并发肾病的T2DM患者血清中SOD水平均高于无并发症的T2DM患者组(P0.05);并发肾病的T2DM患者较未并发肾病的T2DM患者血清MDA水平明显增高(P0.05)｡

2.3 T2DM患者空腹血糖值与各种检测指标的相关性分析T2DM患者空腹血糖值与血清T-AOC､SOD､GSH､MDA水平均无明显相关性(P0.05),见表2｡

表2 T2DM患者空腹血糖值与各种检测指标相关分析

3 讨 论

葡萄糖在细胞线粒体中的代谢过程中可产生氧自由基[7],而糖尿病是一种葡萄糖代谢异常的疾病,可以导致组织细胞中氧自由基产生异常[8]｡有学者认为,经典的糖尿病并发症的多元醇途径､糖基化终末产物途径､蛋白激酶途径和氨基己糖途径均是高糖环境下线粒体呼吸链中氧自由基生成过多的结果,即高糖损伤的共同基础——氧化应激[9]｡

关于糖尿病氧化应激指标的检测结果文献报道差异较大,Abou-Seif等[10]研究认为,T2DM 患者SOD､过氧化氢酶活性降低,GSH含量减少｡又有文献报道,T2DM患者GSH含量明显增加,SOD､GSH 活性显著降低,T-AOC水平明显减少[11]｡本文对T2DM患者4项氧化应激指标进行检测,结果显示,T2DM患者反映机体内脂质过氧化程度的MDA水平较健康人显著增高(P0.05),尤其是并发肾病的T2DM患者该指标增高更为明显(P0.05),与文献[12]相符｡结果进一步证实,T2DM患者体内存在明显的氧化应激过程,可能在糖尿病肾病并发症的发生､发展中起着重要的作用;T2DM患者血清T-AOC水平与对照组比较差异无统计学意义(P0.05),GSH､SOD水平明显高于对照组(P0.05),存在任何一种并发症的T2DM患者､并发周围神经病变的T2DM患者､并发视网膜病变的T2DM患者及并发肾病的T2DM患者血清中SOD水平均高于无并发症的T2DM患者组(P0.05),与文献[13-14]不符｡可见对于T2DM氧化应激的研究文献报道存在很大差异,可能与患者所处病程不同,接受的治疗措施和药物不同有关｡有学者认为,糖尿病患者服用磺脲类降糖药(如瑞格列奈)或双胍类降糖药(如二甲双胍),可降低游离脂肪酸和氧化产物(MDA等)水平,同时使抗氧化指标SOD､GSH等水平增高[15]｡本研究中T2DM患者多数已经过一段时间的降糖或抗炎等治疗,且大部分T2DM患者病情稳定,使得体内氧化应激紊乱可能得到不同程度的改善,致使其抗氧化指标表现为正常或代偿性增高｡

本研究结果还显示,T2DM患者空腹血糖与各氧化指标之间均无明显相关关系,提示患者体内氧化和抗氧化紊乱可能不是由于短期血糖波动的结果,而是一个长期慢性的过程｡

[1] Kowluru RA,Abbas SN,Odenbach S.Reversal of hyper-glycemia and diabetic nephropathy:effect of reinstitution of good metabolic control on oxidative stress in the kidney of diabetic rats[J].J Diabetes Complications,2004,18(5):282-288.

[2] Stentz FB,Umpierrez GE,Cuervo R,et al.Proinflammatory cytokines,markers of cardiovascular risks,oxidative stress,and lipid peroxidation in patients with hyperglycemic crises[J].Diabetes,2004,53(8):2079-2086.

[3] Lappas M,Mitton A,Mittion A,et al.In response to oxidative stress,the expression of inflammatory cytokines and antioxidant enzymes are impaired in placenta,but not adipose tissue,of women with gestational diabetes[J].Endocrinology,2010,204(1):75-84.

[4] 牟忠卿,陈丽.糖尿病中氧化应激的研究进展[J].国外医学:内科学分册,2005,32(12):510-512,524.

[5] 王柏荣,黄国良.氧化应激与胰岛β细胞的关系[J].医学综述,2007,13(12):913-915.

[6] 陆再英,钟南山,谢毅,等.内科学[M].北京:人民卫生出版社,2008.

[7] Cadenas E,Kelvin JD.Mitochondrial free radical Generation,oxidative stress,and aging[J].Free Radic Biol Med,2000,29(3a):222-230.

[8] Nishikawa T,Edelstein D,Du XL,et al.Normalizingmit ochondrial super oxide production blocks three different pathways of hyperglycemia damage[J].Nature,2000,404(6779):787-790.

[9] Brownlee M.The pathobiology of diabetic complications:a unifying mechanism[J].Diabetes,2005,54(6):1615-1625.

[10]Abou-Seif MA,Abd-Allah Y.Evaluation of some biochemical changes in diabetic patients[J].Clin Chimica Acta,2004,346(2):161-170.

[11]胡亚飞,苏文进,贾文波,等.糖尿病前期和2型糖尿病患者体内氧化抗氧化状态研究[J].营养学报,2007,29(3):232-234,238.

[12]杨丽娟,游育红.细胞受到氧化应激后损伤的检测方法[J].医学综述,2010,16(6):924-927.

[13]王艳桥,徐向进,陈频.氧化应激研究进展及其在糖尿病肾病发病中的作用[J].医学综述,2010,16(11):1681-1684.

[14]邱旭东,熊文激,高明.联合检测SOD､NO和NAG对2型糖尿病早期肾损伤的诊断价值[J].中国实验诊断学,2009,13(12):1755-1756.

[15]董小英,张如意.二甲双胍对糖尿病大鼠心肌病变的抗氧化保护作用[J].宁夏医学院学报,2008,30(2):167-170,273.

10.3969/j.issn.1671-8348.2012.18.024

B

1671-8348(2012)18-1850-02

* 基金项目:国家级教学团队资金资助项目[教高函(2009)18号];2008年度贵州省卫生厅科学技术基金资助项目(gzwkj2008-1-004)｡△

,Tel:13608582902;E-mail:wjzdyx2009@126.com｡

2011-06-15

2011-12-27)

•经验交流•