白芍提取物中芍药苷反相高效液相色谱法测定的含量分析

刘志娟

（永兴县人民医院，湖南 郴州 423300）

白芍提取物中芍药苷反相高效液相色谱法测定的含量分析

刘志娟

（永兴县人民医院，湖南 郴州 423300）

目的 研究白芍提取物中芍药苷反相高效液相色谱法测定的含量分析。方法 在特定的条件下进行采用反相高效液相色谱法进行生白芍、酒白芍、炒白芍、醋白芍等白芍提取中芍药苷的含量分析。结果 反相高效液相色谱法测定的含量分析后含量最高的是生白芍，其次是酒白芍同芍药片的含量，最少的是醋白芍及炒白芍含量，其中RSD的变化大致相同。结论 采用反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量，具有准确、方便、简单、安全的优点，适宜使用及推广，更能有利的对白芍制药的方法进行测定。

白芍提取物；芍药苷；反相高效液相色谱法；含量分析

白芍是中药中一种具有很强的补血功效，还有敛阴养血、柔肝祛痛、平抑肝阳、提高免疫等作用，较常用于肝阳上亢、肝阴不足、脾虚肝郁，血气虚弱、或血热阴虚、盗汗、失血等症[2]。芍药苷为中药芍药主要发挥作用的成分。依据国内外研究报道，证明芍药提取物中，芍药苷的主要作用为增强自由基修复及抗损伤，抵抗神经毒性损害及调节细胞内钙离子含量等作用，在进行实验室检查时发现其具有预防血小板聚集、血液黏度下降、调节微血管循环、增加血管扩张及抗氧化能力、预防及治疗惊厥等功效。现经医学专家的深入研究证明，其具有良好的保护神经作用。

中医中药是我国发展的特色性的疾病治疗方法，在我国也得到了很深入的研究，中药天然物利用其特有的功能进行疾病的治疗和预防，其生长环境的差异及生长温度的不同，采摘及制作工序、制作方法的差异等各种原因影响，都会导致其疗效和作用产生显著的差异。进行不同产地及品种的药效控制相同是非常困难的。所以，进行中药提取物的含量深入的研究及探索为现代中医药学的主要发展方向之一，准确的控制中药提取物中的有效含量，也是中药现代化研究的重要方法。在近些年的《中国药典》中仅进行少量中药品种，提取物及其含量的研制方式、方法。其浸膏及流浸膏仅仅应用了渗漉的方式制备。但使用渗漉方法进行中药的制备操作复杂、消耗时间长，浪费较多的溶剂。为求更好的制备方法，本文选取对不同的白芍中药制剂，使用煎煮的方法，依据流浸膏的制备过程进行制备白芍的提取物。并根据相关的研究，制定高效液相色谱法检测白芍提取物中的主要有效成分芍药苷的含量控制定量方法，已达到白芍提取物的含量精准的控制。实验研究证明，此方法具有简单、迅速、精密度高，重复性好的优点，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 仪器及材料

选用岛津液LC2010高效相色谱仪，Agilent色谱工作站，频率25kHz的KQ2200DA型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司产品）[1]。

1.1.2 材料选用

芍药苷对照购自中国药品生物制品检定所，（批号为110736-20933）。色谱纯甲醇（美国Tedia试剂公司）；水为重蒸馏去离子水。生白芍选取（天津饮片厂生产），白芍的泡制品（按照天津市中药饮片泡制规范自制产品）[3]。

1.2 方法

1.2.1 白芍炮制方法

酒白芍：清水洗净后浸泡2d，按照1∶10的比例，用10kg黄酒，喷洒在100kg的白芍片上，搅拌均匀，浸润浸透，后晒干。将麸皮炒热同白芍片一起炒，直至稍有发黄，并有香味散发，使用筛子筛干净麸皮即可。醋白芍制作：依据2∶10的比例，使用米醋20kg，喷洒在100kg，的白芍片上，搅拌均匀，浸润浸透，后 采用文火进行炒干放凉即可。炒白芍：将麸皮先放入锅中炒热，后同白芍片一起炒，直至稍有发黄，并有焦斑时，使用筛子筛干净麸皮即可。

1.2.2 色谱的条件

色谱柱为：Aichrom Bond-AQ C18（150mm×4.6mm），流动相：乙醇0.1%，磷酸溶液（14∶86）。柱温30℃，进样量20μL，流速1.0mL/min。理论板数按照芍药峰约4000。

1.2.3 白芍提取物的制作方法

在制作完成的白芍饮片制品中，各取0.1g，放置在真空干燥箱内温度设置在80℃，之后放凉，取出放置在容量为50mL的烧杯内，注入乙醇溶液稀释到指定的浓度，摇匀静置后取上清液，使用微孔膜过滤，配制成1.0mg/mL的乙醇溶液，作为实验使用的溶液。主要成分为乙醇、芍药苷。

取对照品的芍药苷适量，精准称量，使用甲醇定容到5mL烧杯内，搅拌均匀，制成1.0mg/mL的溶液，即为对照品甲醇溶液。主要成分：甲醇、芍药苷。

1.2.4 芍药苷检测方法

采用对照品溶液5μL，供试品溶液10μL，输入液相色谱仪内，依据色谱的条件测定，样品的含量依据干燥品的计算方法计算，采用外标法进行芍药苷的含量计算。另外本品还采用超声的方法进行了检测。

2 结 果

反相高效液相色谱法测定的含量分析后含量最高的是生白芍，其次是酒白芍同芍药片的含量，最少的是醋白芍及炒白芍含量，其中RSD的变化大致相同，详见表1。超声的检测方法检测的芍药苷的含量测定同反相高效液相色谱法测定的含量无明显差别。

表1 不同种类的白芍药材中芍药苷的含量测定

3 讨 论

中药含量的精准控制一直以来成为困扰中药学研究的重大难题，是严重影响中医药学的现代化进步发展严重的障碍。中药学专家教授研究，采用多种方法尽量进行控制中药中有效成分的含量，最主要性的操作及控制技术，难关还没有得到解决，没有显著的进展和提高。近些年来，进行中药提取物的研究，中间产性物已经成为中医药学的热点研究，但还未取得解决问题的方法，例如单味药的含量控制方法，进行中药方剂配伍中的成分相互的药理功效及其机制、及怎样从技术理论上，明确进行表达等基本问题的处置。虽然也会有部分的研究报道，采用各种办法进行蒲公英、金银花等中药提取物中有效成分的含量控制研究，因为采用的中药部位不同、产地及生长环境的差异等不同方面的问题，采用渗漉的制备方法不确定能进行中药中有效成分的完全性提取；改用有机性溶剂，也仅能提取一部分的单一有效成分。本文的研究方法用水为试验溶剂，使用传统的煎煮的方法，参照浸膏及流浸膏的过程进行制备其提取物，供试验，不仅能提取现有明确的有效成分含量，还可以保持传统中医药学理论中所提出的起综合性作用的成分不会被丢失；不仅能延伸传统的中医药学整体思维及预防完全性按化学成分对中药进行研究的弊端，还可以按中医药学理论最大限度的保证原始药材的药理功效性质，尤其是用来控制单味的中药含量的标准。

白芍为毛茛科植物芍药Paeonialactiflora Pall.的干燥根主要采挖的季节是春季和秋季，采挖后祛除头尾和细根，放置于滚开的沸水中祛除外皮，或是去除外皮后进行再煮后晒干。古代医学者觉得生白芍的制备是原药进行去除后切片，可以生入药，其主要功效有柔肝养血、滋阴平肝的疗效。在西医药学研究认为其主要功效是，镇静、安神、抗菌、退热、止痛、抗惊厥、提高机体免疫力等。还具有减少胃酸的分泌、降低血小板聚集、预防血栓形成、保护肝脏的疗效[4-5]。进行加工炮制后的酒白芍是采用黄酒及白芍炮制而成，具有综合寒性行散补中的疗效；炒白芍以白芍及麸皮混合炒制而成具有和络养血及止痛健脾的疗效。中药白芍药中的主要有效成分为芍药苷，其含有五没食子酰葡萄糖、芍药苷内酯、没子酸甲酯等，其具有良好的抗痉挛作用。其主要用途是行经腹痛、月经不调、崩漏、盗汗、自汗，其肝气不和导致的腹痛、胁痛及手足抽搐疼痛，肝阳亢盛导致的眩晕、头痛等症[6]。本研究中反相高效液相色谱法测定的含量分析后含量最高的是生白芍，其次是酒白芍同芍药片的含量，最少的是醋白芍及炒白芍含量，结果证明炮制的方法会对白芍提取物中的芍药苷的有效成分含量存在一定的影响。

综上所述，采用反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量，具有准确、方便、简单、安全的优点，适宜使用及推广，更能有利的对白芍制药的方法进行测定。更能推动中医中药的发展及进步。

[1] 周德,王芳,文永兰.白芍药材中芍药苷含量比[J].医学信息,2011,24(5):2995.

[2] 莫可丰.白芍芍药苷含量测定方法的研究[J].广西中医药,2003,26(2):6-7.

[3] 刘浩.反相高效液相色谱法测定白芍提取物中芍药苷的含量[J].时珍国医国药,2010,21(9):2392-2393.

[4] 李越峰,杨武亮,沈菲,等.高效液相色谱测定白芍中芍药苷的含量[J].时珍国医国药,2008,19(2):438-439.

[5] 林康,刘放.芍药及芍药苷含量的研究[J].浙江中西医结合杂志,2003,13(5):321-322.

[6] 刘磊,何再安.高效液相色谱法测定金银花提取物中绿原酸的含量[J].时珍国医国药,2008,19(6):1426.

R282.7

B

1671-8194（2012）16-0084-02

10.15912/j.cnki.gocm.2012.16.031