四川省跁子病病区饮水和红苕中DON含量的检测报告

侯海峰 李群伟 邓佳云 李富忠

(1.泰山医学院流行病学研究所，山东 泰安 271016； 2.四川省疾病预防控制中心，四川 成都 610031)

跁子病是发生于我国四川省部分地区的一种原因不明的骨骼疾病，该疾病主要侵犯大关节，造成患者关节畸形、增粗、疼痛，在生长发育期发病者还可导致矮小畸形，严重危害当地居民身体健康[1]。

自从本病被报告以来，流行病学家对跁子病进行了多次的流行病学调查，提出了多种病因假设，但都没能取得一致的共识[2]。哈尔滨医科大学杨建伯教授在详细的流行病学调查基础上，提出是食用红苕所致的中毒的病因学说[3]。作者的课题组的工作也证明了粮食中的一种真菌毒素——脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)可导致动物和人类骨关节炎[4-5]。为探讨DON与跁子病的发病关系，我们采集了病区水样和粮样进行了检测分析，现报告如下。

1 材料和方法

1.1主要试剂与仪器 DON毒素(纯毒素)为FLUKA公司产品，其他试剂均使用市售分析纯，ELISA试剂盒为江苏省苏微微生物公司产品，550型酶标仪为美国Bio-Rad公司产品。

1.2样品的采集 2009年4月采集仁寿县和内江市跁子病病区原饮水井水样10份，疾病流行时主食红苕10份，以泰安市泰山区和济南市长清区万德镇采集的水样和面粉各20份作为对照。

1.3DON检测方法 水样采用减压蒸馏方法浓缩20倍，无菌过滤，采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测粮食中DON含量。面粉及红苕则烘干后粉碎，用甲醇和水(体积比9︰1)提取DON，采用ELISA检测。

1.4统计分析 采用SPSS13.0统计软件进行数据的统计分析，由于数据不服从正态分布，组间比较采用秩和检验。

2 结 果

水样及红苕中DON含量检出情况见表1。跁子病病区红苕DON检出率为70%，可检出DON含量为22.9～170.4 μg/kg，对照面粉DON检出率为150%，可检出DON含量为10.2～27.3 μg/kg，两组粮样比较差异有统计学意义(P<0.05)。跁子病病区和对照水样检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。

表1 跁子病病区水样及红苕中DON含量检出情况

注：#两组比较Z=3.389，P=0.001；*P>0.05。

3 讨 论

3.1关于水样的检测结果 历来关于饮水中真菌毒素污染情况的报告不多，原因有多方面，但毒素提取困难、很多毒素不溶于水，检测意义不大是两个主要原因。DON毒素溶于水，或为真菌直接在水中产生，或为雨水冲刷溶解于水中，因此有检测的必要。但本次检测结果可能与实际不符，其原因是在减压蒸馏过程中，DON毒素可能随同蒸汽一起流失了，这样导致其检测结果比实际值要偏低一些，但尽管如此，与对照区的检测结果相比没有差异，其含量水平也达不到使人中毒的程度，所以成为病因的可能性不大。

3.2关于红苕的检测结果 过去红苕是跁子病流行时的主食，而且当地群众反映在地窖中贮藏越冬时经常有发霉的现象，然而现在当地居民早已不食用了，而且红苕的贮藏条件也大有改观，基本上是作为饲料或调味品偶尔吃一点。所以本次检测的结果无疑是一个脱离原始现场的回顾性解释，所以本次检测结果很可能是低于跁子病流行时的DON污染水平，即便如此，其污染率和含量之高也是令人吃惊的，可以想见在几十年前跁子病流行时情况可能比现在要严重得多。

3.3关于T-2毒素与跁子病的关系 有学者提出粮食中的T-2毒素可能是跁子病的病因，但笔者却不以为然，为说明这个问题，有必要简单介绍以下食物中毒性白细胞缺乏症(ATA)。关于此病最早的报告是在十九世纪初，主要流行地区是前苏联，最早的报告认为是食物中毒，其后发现与通常的食物中毒有明显区别，遂认为是一独立疾病。ATA曾发生过几次严重流行，累计死亡人数超过百万人(甚至有人说超过千万人)，引起当地居民的恐慌。ATA的症状主要为白细胞进行性减少，化脓性咽峡炎，皮肤出现出血点或斑，粘膜坏死、水肿，免疫力严重低下。本病在每年的春季高发，除吃母乳的婴幼儿外，各年龄段均可发病[6]。

ATA病最严重的流行发生在第二次世界大战期间的前苏联，由于战争使得粮食无人收割，堆积在田野，更多的干脆被大雪埋在下面越冬，居民饥不择食，食用后发生历史上最为严重的ATA流行，当时可以说是饿殍遍野。后来，Joffe从二战期间采集的谷物样品中分离得到了几种真菌毒素，包括T-2毒素、HT-2毒素、丁烯酸内酯和新茄镰刀菌素等，其中主要是T-2毒素，后来他用霉变的谷物和T-2毒素纯品分别复制出了ATA动物模型，据此，Joffe等人证明了人类ATA病的病因是由于霉变谷物中的T-2毒素所引起[7]。

但T-2毒素是跁子病的病因吗？笔者认为不是，原因有四：其一，ATA病流行于很多地区，而且可以发生于各个年龄段，流行时间也足够长，但ATA病患者的骨关节没有任何临床症状被描述，流行病学知识告诉我们这样的事实背后必有其原因；其二，反过来，跁子病患者没有ATA病患者的临床症状和体征；其三，有报告面粉中T-2毒素含量可超过1500 ng/g，我们且按1000 ng/g的中等剂量计算，一个生长发育期的儿童体重大约是30～40 kg，每天摄入0.5 kg的谷物，那么他每天摄入的T-2毒素的绝对量应为500 μg，甚至更高，那么，平均摄入量为12.5～16.67 μg/kg，而据封剑南[8]报道，平均摄入6.5 μg/kg的T-2毒素就可以引起恶心、呕吐等中毒症状。我们大胆估计跁子病流行时红苕受真菌污染比较严重，T-2毒素含量可能会很高，那么，此时我们完全应该观察的到患者的恶心和呕吐等T-2毒素中毒的症状，但遗憾的是，跁子病患者没有恶心和呕吐等中毒症状；其四，T-2毒素的长期摄入可以引起肿瘤高发，尤其是消化道的肿瘤高发，但我们看到，病区的肿瘤发生情况与非病区几乎没有差别，因此，也不支持T-2毒素是跁子病病因的观点。

根据红苕中DON毒素含量水平较高，以及饮水和红苕的DON毒素的污染率远高于非病区的检测结果，证明跁子病病区饮水和主食受到真菌侵染的情况比较严重，即使DON毒素不是跁子病的致病原因，但作为真菌毒素污染的标识物，已经充分说明了真菌毒素在跁子病发病过程中的致病作用，而且其致病作用主要是通过病区产的粮食来传播的。

[1] 汪浩，唐雪峰，李富忠.四川省跁子病流行现况调查及分析[J].现代预防医学，2009，36(13)：2420-2425.

[2] 邓佳云.四川跁子病调查报告[J].中国地方病学杂志，1988，5(4)：273-275.

[3] 杨建伯，邓佳云，李德云，等.金塘村调查报告——关于跁子病病因的思考[J]. 中国地方病学杂志，2000，19(1)：36-40.

[4] 李群伟，侯海峰，李晓梅，等.DON致新西兰兔骨关节损伤的实验观察[J].中国地方病学杂志，2009，28(1)：41-43.

[5] 李群伟，侯海峰，李晓梅，等.粮食DON含量与手骨关节炎严重程度关系的研究[J].中国地方病防治杂志，2005，20(6)：333-335.

[6] 莫东旭.T-2毒素—人类两种地方病的“病因”[J].中国地方病防治杂志，1995，10(5)：294-298.

[7] Abraham Z.Joffe.Effects of fusariotoxins in human in:fusarium species their biology and toxicology[M]. New York: Wiley -Interscience Publication,1986: 225.

[8] 封剑南.污染镰刀菌及T-2毒素的霉大米食物中毒[J].中华预防医学杂志，1992，26(5)：284-286.