E838对小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用

王月英，吴红英，叶 翔，李德冠，王小春，张 恒，路 璐，孟爱民

(1.中国医学科学院 北京协和医学院放射医学研究所 天津市分子核医学重点实验室，天津 300192;2.天津迈达医学科技有限公司，天津 300384)

E838是我所合成的一种新型辐射防护剂，白色粉末，无味，不溶于水。我们以往的药效学实验证明，E838具有放射防护效价高、毒副作用小的特点，能显著提高受照射小鼠30 d存活率和保护指数［1］。本实验对辐照前给予E838对小鼠骨髓细胞染色体损伤的防护作用进行探讨，为进一步评价E838抗辐射效价提供实验依据。

1 材料

E838，本所提供;炔雌三醇(EE3)，军事医学科学院放射医学研究所提供;茶油，天津氨基酸公司提供。

615小鼠，雄性，体重24～26 g，中国医学科学院实验动物研究所提供，合格证号:SCXK(京)2005-0013。

辐射源，加拿大原子能有限公司。

2 方法

分别将E838和EE3加入茶油配制成浓度为250 μg/mL 的溶液，备用。

将小鼠随机分为对照组、辐射对照组、E838组和EE3组，每组5只。E838组和EE3组分别腹腔注射E838或EE3茶油溶液0.1 mL，1次/d，连续3 d。对照组和辐射对照组给予等体积的茶油。第3次给药24 h后进行剂量为1.5 Gy的137Csγ射线全身照射，剂量率为1.18 Gy/min。

照射后3 h小鼠腹腔注入秋水仙碱(4 mg/kg)，4 h后脱颈椎处死。取两侧股骨骨髓制成染色体涂片，Giemsa染色，常规制备染色体片［2］。双盲法显微镜下计数染色体畸变类型和数量［3］。

3 结果

E838对受照射小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响结果见表1。从表1可见，E838和EE3组，总畸变细胞数均明显低于辐射对照组(P＜0.01)，E838组总畸变细胞数低于EE3组(P＜0.05)，三组中畸变类型主要以单体型为主。结果显示，E838对辐射诱发的骨髓细胞染色体畸变具有明显的防护作用。

表1 E838对受照射小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响Tab.1 The effects of the E838 against chromosomal radiation injury

4 讨论

已知电离辐射可直接损伤DNA，也可通过间接作用即自由基等产物引起DNA损伤［4］。

目前已发现了众多有抗辐射损伤作用的药物，但是效果不太理想。雌激素的研究已进行了数十年，几经筛选，认为E838和EE3等药物不但抗辐射效价高，而且对遗传物质的损害也较低。前期研究已证明，E838能提高机体的防御能力，使小鼠骨髓造血干细胞G2/M期细胞比例下降，G0～G1期细胞比例相对增高，从而减低干细胞的放射敏感性。从本实验结果可见，E838和EE3组，其畸变细胞数和总畸变数均明显低于辐射对照组(P＜0.01)，E838预防组畸变细胞数明显低于EE3组(P＜0.05)。三组中畸变类型主要以单体型为主，说明E838、EE3均有降低辐射诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变效应，且E838比EE3降低的更明显。

E838降低辐射诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的机制可能与E838使染色体辐射所致原始损伤减少，对造血组织有明显的放射防护作用，导致染色体畸变率降低，或与E838能增强DNA的修复能力等有关。前期的实验表明，E838具有保护和减轻辐射对淋巴细胞的损伤，对小鼠全身1.0 Gy辐照后的DNA损伤有良好的修复作用［5］。

骨髓细胞染色体畸变类型有染色单体型畸变(包括单体断裂和单体互换)和染色体型畸变(包括断片、双着丝粒体、易位、微小体、着丝粒环、无着丝粒环和缺失)。精原细胞中期分裂相的染色体形态与骨髓细胞一样，其畸变类型也一样。我们观察到骨髓细胞染色体各类型畸变中以单体型畸变为主(其中主要是单体断裂)，这可能与照射后取材时间有关。前期的研究表明E838对小鼠移植性肿瘤肺腺癌、肝癌及淋巴瘤［6］等的生长有一定程度的抑制作用。证明E838具有辐射防护和增敏双重效应。

［1］ 王月英，王汝勤，赵忠萍.E838对小鼠辐射防护作用的研究［J］.中华放射医学与防护杂志，2005，25(1):39-40.

［2］ 龚守良.实用基础医学实验技术［M］.长春:吉林科学技术出版社，1991，120-121.

［3］ 陈 强，李 玲，姜 虹，等.黄蘑多糖对小鼠骨髓细胞染色体的辐射防护作用［J］.中华放射医学与防护杂志，2005，25(2):141-142.

［4］ 刘丽波，孙晓玲，张海英，等.人参三醇组甙对小鼠骨髓细胞染色体辐射的防护作用［J］.吉林大学学报:医学版，2002，28(2):138-140.

［5］ 王月英，刘 强，吴红英，等.E838对辐射所致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂防护作用的实验研究［J］.肿瘤防治研究，2010，37(7):15-18.

［6］ 王月英，李德冠，吴红英，等.E838及其联合放化疗对IRM-2小鼠自发淋巴瘤的抑制作用［J］.中国生化药物杂志，2010，31(3):154-157.