硫化氢在急性腹膜炎患者血浆中的表达及意义

斯伟宏

（义乌市中心医院 普外一科， 浙江 金华 322000）

硫化氢（H2S）是继NO和CO之后的第三气体信号分子，由关键酶CSE和CBS催化L-半胱氨酸代谢产生[1-2]，在心血管疾病[1]、肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障、肝脏功能障碍中起保护作用[3-4]，具有抑制[1-5]、促进[6-7]炎症反应效应。H2S在急性腹膜炎患者血浆中的表达水平及其意义，国内外文献鲜见报道。故我们加以探讨，现阐述如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选择本院2010年1月到2010年12间急性腹膜炎患者50例（设为A组），其中男30例，女20例，年龄37～60岁，平均（45.5±8.8）岁；体质量45～67 kg，平均（57.12±9.46）kg；病程9～23 h，平均（15.48±6.23）h。急性胃溃疡穿孔11例，急性十二指肠溃疡穿孔7例，外伤性结肠破裂25例，绞窄性肠梗阻、肠坏死7例。均无高血压、慢性阻塞性肺疾病、冠心病、糖尿病等基础疾病。选择同期健康体检者50例为正常对照（设为B组），其中男28例，女22例，年龄34～58岁，平均（43.3±10.2）岁；体质量48～72 kg，平均（60.34±10.27）kg。两组对象的性别、年龄、体质量比较差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂和仪器：敏感硫电极和PXS-270离子计购于上海雷磁仪器厂，TNF-α、IL-6、NO、CRP、内毒素试剂盒购自南京建成生物工程研究所，ELx800酶标仪为美国Bio-TEK公司产品；5417R低温高速离心机为德国Eppendorf公司产品。

1.2.2 标本采集：B组禁食12 h、A组入院时抽肘静脉血6 mL，室温静止30 min后以3000 r/min离心15 min，分离血浆，取3 mL置于-80 ℃冰箱冷冻待测，所有血浆统一编号保存，各项指标均统一标准，一批完成检测。

1.2.3 检测指标及方法：酶联免疫吸附（ELISA）法测定血浆中TNF-α、IL-6、CRP表达，敏感硫电极法[8]测定血浆H2S浓度；用动态浊度法检测血浆中内毒素的含量，化学法测定血浆NO含量。

1.3 统计学处理方法 用SPSS 13.0统计软件包进行统计处理。计量资料以±s表示，内毒素检测结果呈偏态分布，取对数处理后呈正态分布，采用两独立样本均数t检验，相关性采用直线相关分析。

2 结果

2.1 两组对象血浆TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、内毒素及H2S的检测结果 A组TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、内毒素及H2S均显著高于B组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。具体见表1。

2.2 各检测指标间的相关性 H2S与TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、内毒素呈正相关（r=0.735、0.683、0.837、0.748、0.842、0.872、0.764，P＜ 0.01）；NO与 TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、内毒素呈正相关（r=0.893、0.712、0.698、0.647、0.709、0.723，P＜0.01）。

表1 两组血浆TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、内毒素及H2S的水平变化比较（n=50±s）

表1 两组血浆TNF-α、IL-6、CRP、WBC、N、NO、内毒素及H2S的水平变化比较（n=50±s）

与B组比：aP＜0.01

组别 TNF-α IL-6 CRP 内毒素 WBC N NO H2S（ng/L） （ng/L） （mg/L） （EU/L） （×109/L） （×109/L） （μmol/L） （μmol/L）A 49.02±2.62a 437.08±18.43a 66.99±4.86a 1.71±1.02a 16.88±0.94a 10.50±1.17a 119.19±9.93a 42.57±7.18a B 4.08±0.94 227.97±12.92 12.48±1.74 0.06±0.04 6.18±0.86 3.65±0.75 48.43±7.63 24.38±2.69

3 讨论

H2S气体信号分子在人体内存在形式：1/3为气体H2S，2/3为NaHS，主要通过形成硫酸盐或硫代硫酸盐而最终排出体外[1-4]。Zhang等[6]研究结果表明内源性的H2S激活白细胞，介导炎症因子的释放，在盲肠穿孔脓毒血症中起促进炎症反应作用。本研究发现，A组患者血浆中内毒素、CRP、WBC、N均显著高于B组（P＜0.01），提示机体存在着脓毒血症；A组H2S显著高于B组（P＜0.01），与Zhang等[6]研究结果一致，提示内源性H2S在急性腹膜炎所致的脓毒血症中起重要作用。

TNF-α、IL-6、NO是炎症因子[6-7]。内源性NO可通过抑制血小板和白细胞聚集，清除氧自由基、抑制脂质过氧化和改善微循环等多个环节发挥对肠黏膜屏障的保护作用[3]。过度表达的NO与O2-结合生成过

氧亚硝酸基，诱导细胞凋亡[9]。TNF家族成员及TNF死亡受体-核转录因子-кB信号通路在脓毒血症中起重要作用[10]。本研究结果显示A组患者血浆中TNF-α、IL-6、NO水平均显著高于B组（P＜0.01），与Zhang等[6]研究结果一致；H2S与TNF-α、IL-6、NO、CRP、WBC、N、内毒素呈正相关，提示内源性的H2S可能也是一种炎症因子，在急性腹膜炎所致的脓毒血症中起重要作用。有研究表明H2S在心血管疾病[1]、肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障、肝脏功能障碍中起保护作用[3-4]，具有抑制[1-5]、促进[6-7]炎症反应效应。提示H2S气体信号分子的生物活性效应及其机制可能具有细胞和疾病特异性。但内源性H2S在急性腹膜炎所致的脓毒血症中是否起促进炎症反应作用，尚待进一步研究明确。

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