氧化应激指标与血管性痴呆的关系研究

徐新蕾，蔡德亮

氧化应激指标与血管性痴呆的关系研究

徐新蕾，蔡德亮

目的探讨氧化应激相关指标丙二醛(MDA)、同型半胱氨酸(Hcy)、Ca2+及对氧磷酶－1(PON－1)活性与血管性痴呆(VD)的关系。方法选取2010—2011年在我院神经内科确诊为VD的住院患者41例(VD组)及我院体检中心体检健康的老年志愿者30例(对照组)。对两组进行简易精神状态检查评分(MMSE)和血清MDA、Hcy、Ca2+浓度及PON－1活性检测，并对检测结果进行比较分析。结果VD组血清MDA和Hcy浓度及PON－1活性与对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05)。VD组血清PON－1活性与MMSE呈正相关(r=0.25，P=0.03)，血清Hcy浓度与MMSE呈负相关(r=－0.57，P=0.000)，PON－1活性与Hcy浓度亦呈负相关(r=－0.32，P=0.02)，MDA浓度与MMSE无相关性(r=0.68，P=0.48)。结论血清MDA、Hcy浓度及PON－1活性的变化可协助诊断VD，且Hcy及PON－1尚可提示病情的进展程度。

痴呆，血管性;氧化应激;丙二醛;同型半胱氨酸;对氧磷酶－1

血管性痴呆(vascular dementia，VD)是迄今为止惟一可防治的痴呆类型，如果早期发现并治疗可避免发展到不可逆的VD晚期阶段［1］。近年来氧化应激在VD中的病理损伤作用越来越受到重视，氧自由基通过过氧化损伤神经元细胞膜中的不饱和脂肪酸，改变细胞膜表面Na+－K+－ATP泵活性，以及修饰N－甲基－D－门冬氨酸(NMDA)受体表达，从而损伤神经元［2］。本研究通过研究VD患者血清丙二醛(malondialdehyde，MDA)、同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、Ca2+浓度及对氧磷酶－1(paraoxonase－1，PON－1)活性的变化情况，旨在探讨氧化应激指标与VD的关系，为VD的早期诊断及抗氧化治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2010—2011年在我院神经内科确诊为VD的住院患者41例(VD组)及我院体检中心体检健康的老年志愿者30例(对照组)。VD组中男27例，女14例;年龄61～80岁，平均(72.1±7.8)岁;简易精神状态检查评分(MMSE)为17～27分，平均(19.1±2.9)分。对照组中男19例，女11例;年龄60～82岁，平均(69.3±7.6)岁;MMSE为27～30分，平均(29.2±1.6)分。所有受检者既往无降脂药及维生素类药物服用史。两组的性别程度、年龄、体质指数、文化程度比较，差异均无统计学意义(P＞0.05，见表1)，具有可比性。

1.2 诊断标准VD诊断依据美国国家神经系统疾病与卒中研究所－瑞士神经科学研究国际协会(NINDS－AIREN)标准［3］，VD组均经颅脑CT或MRI影像学证实，并排除其他原发性神经或精神疾病病史、糖尿病病史、乙醇病史、酒精及药物依赖史、甲状腺功能减低史、维生素B12及叶酸缺乏相关性疾病史等。对照组无神经和精神疾病史，无卒中史及痴呆家族史。

1.3 检测方法所有受检者禁食12 h，于清晨采集肘静脉血液，离心分离血浆并保存在－80℃冰箱备生化检查。硫代巴比妥酸法检测MDA，结果以μmol/g表示。化学发光免疫法检测血清Hcy浓度。离子选择电极间接法检测Ca2+浓度。乙酸苯酯法测定PON－1活性，PON－1活性单位用U/ml表示，1 U为对氧磷酶每分钟水解1 μmol的乙酸苯酯。反应缓冲液为含2 mmol/L CaCl2的50 mmol/L Tris－醋酸，pH值为8.0。将乙酸苯酯用无水乙醇以1∶10稀释后，取该稀释液6 μl与1 ml反应缓冲液混匀组成底物液。取血清标本1.5 μl与150 μl底物液反应，其后使用酶标仪于270 nm比色，测定5 min内吸收值的变化为OD270。用OD270乘以克分子消光系数即求出酶的活性。

1.4 统计学方法所有数据采用SPSS 13.0处理。计量资料以(±s)表示，组间比较采用students't检验，相关性检验采用Pearson检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组氧化应激指标比较VD组血清MDA、Hcy浓度及PON－1活性与对照组比较，差异均有统计学意义(P＜0.05);而两组血清Ca2+浓度比较，差异无统计学意义(P＞0.05，见表2)。

2.2 氧化应激指标相关性分析经Pearson检验，VD组血清PON－1活性与MMSE呈正相关(r=0.25，P=0.03)，血清Hcy浓度与MMSE呈负相关(r=－0.57，P=0.000)，PON－1活性与Hcy浓度呈负相关(r=－0.32，P=0.02)，MDA浓度与MMSE无相关性(r=0.68，P=0.48)。

3 讨论

VD是指由各类脑血管疾病引起的痴呆，即一种获得性高级认知功能障碍综合征。VD实际上是由于一系列血管因素导致脑动脉硬化，脑组织灌流量降低，进而导致脑组织结构受损，而氧化应激尤其是脂质过氧化在这一过程中发挥着重要作用［4－6］。

MDA是脂质代谢产物，可反映机体脂质过氧化的速率及强度，并间接反映组织受自由基损伤的程度。国内外多项研究表明，MDA浓度在VD患者中明显升高［7－8］。Gustaw－Rothenberg等［8］研究发现，MDA浓度在阿尔茨海默病(AD)及VD患者中均升高，但在VD患者中升高更明显，并认为AD患者中MDA浓度升高实际上反映了AD发病的血管因素。本研究结果显示，VD患者血清MDA浓度较对照组明显升高，与文献报道一致，VD患者血清MDA浓度与MMSE无明显相关性。

表1 两组一般资料比较Table 1 Comparison of general information between two groups

表2 VD组与对照组血清MDA、Hcy、Ca2+浓度及PON－1活性比较(±s)Table 2 Comparison of serum concentration of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity between two groups

表2 VD组与对照组血清MDA、Hcy、Ca2+浓度及PON－1活性比较(±s)Table 2 Comparison of serum concentration of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity between two groups

注:MDA=丙二醛，Hcy=同型半胱氨酸，PON－1=对氧磷酶－1

对照组300.10±0.0210.4±2.99.34±1.25165.2±38.2 VD组410.78±0.2513.6±3.910.78±1.48143.4±32.4 t 值0.0000.0060.0620.017 3.922.871.892.43 P值

PON－1是一种由肝脏合成的钙离子依赖性芳香酯酶，能通过多种途径降低体内的氧化应激状态和脂质过氧化损伤并具有抗动脉粥样硬化作用［9］。Ng等［10］研究发现，PON－1基因敲除小鼠血管抗黏附能力下降、血管内皮氧化应激损害加重及血栓形成增加。黄建敏等［11］研究发现，合并动脉粥样硬化的脑梗死患者血清对PON活性降低及氧化应激增强。本研究结果显示，VD患者血清PON－1活性较对照组明显降低，且与MMSE呈正相关，说明PON－1活性减弱可能参与VD的发病过程，推测自由基所致的损伤和机体抗氧化系统保护功能的减弱可能在VD病理过程中起重要作用。

高同型半胱氨酸血症是认知障碍的独立危险因素［12］。Sachdev等［13］研究表明，高同型半胱氨酸血症可通过导致动脉粥样硬化及其造成的脑缺血坏死、脑白质疏松症、脑萎缩等导致VD。Hcy引起的动脉硬化及血管内皮损伤的机制与Hcy在体内生成同型半胱氨酸硫内酯(homocysteine thiolactone，HTL)，增强氧化应激［14－15］和抑制PON－1活性有关［16］。本研究结果显示，VD患者血清Hcy浓度升高，与PON－1活性呈负相关，与MMSE亦呈负相关，进一步说明高Hcy可能参与VD的发病，而抗氧化酶PON－1是VD的保护因素。但高Hcy影响PON－1活性的原因及其参与血管病变的确切机制还有待进一步研究。

宋博毅等［17］研究观察了AD患者血清Ca2+浓度与氧化应激的相关性，发现老年AD组血清Ca2+浓度及超氧化物歧化酶浓度明显降低，MDA水平明显升高。本研究中亦将血清Ca2+浓度作为反映氧化应激的参数进行比较，结果提示VD组患者血清Ca2+浓度与对照组相比无差异。

综上所述，VD患者血清MDA及Hcy浓度均升高，PON－1活性下降，且血清Hcy浓度与PON－1活性均与患者MMSE存在相关性。故笔者认为可将MDA、Hcy及PON－1作为协助诊断VD的指标，且Hcy及PON－1尚可提示病情进展程度，有助于VD的早期发现与诊断。但此结论仍需进一步大样本量的研究统计加以证实。本研究结果也为探讨VD的发病机制提供了一定参考。

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8 Gustaw－RothenbergK，KowalczukK，Stryjecka－Zimmer M．Lipids'peroxidation markers in Alzheimer's disease and vascular dementia［J］．Geriatr Gerontol Int，2010，10(2):161－166．

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10 Ng DS，Chu T，Esposito B，et al．Paraoxonase－1 deficiency in mice predisposes to vascularinammation，oxidativestress，and thrombogenicity in the absence of hyperlip idemia［J］．Cardiovasc Pathol，2008，17(4):226－232．

11 黄建敏，黄瑞雅，简崇东，等.老年脑梗死患者血清对氧磷酶1活性与氧化应激的关系及其在动脉粥样硬化中的作用［J］.中国动脉硬化杂志，2010，18(11):882－884．

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Research on the Relationship between Oxidative Stress Marks and Vascular Dementia

XU Xin－lei，CAI De－liang．Department of Neurology，Wuxi Tongren International Rehabilitation Hospital，Wuxi 214151，China

ObjectiveTo explore the relationship between oxidative stress marks of malondialdehyde(MDA)，paraoxonase－1(PON－1)，homocysteine(Hcy)，Ca2+and vascular dementia(VD)．Methods41 VD patients(VD group)admitted to the neurology department in our hospital from 2010 to 2011 and 30 healthy volunteers(control group)underwent physical examinations were involved into the study．Mini－Mental State Examination(MMSE)scores were graded and the levels of MDA，Hcy，Ca2+and PON－1 activity were detected and compared between the two groups.ResultsThe levels of MDA，Hcy and PON－1 activity between VD group and control group showed statistically significant differences(P＜0.05)．In the VD group，PON－1 was positively correlated with MMSE(r=0.25，P=0.03)，Hcy was negatively correlated with MMSE(r=－0.57，P=0.000)，PON－1 activity was negatively correlated with Hcy(r=－0.32，P=0.02)，and MDA showed no correlation with MMSE(r=0.68，P=0.48)．ConclusionThe determination of MDA，Hcy and PON－1 activity can help diagnose VD，Hcy and PON－1 can serve as indicators of disease progress．

Dementia，vascular;Oxidative stress;Malondialdehyde;Homocysteine;Paraoxonase－1

R 749.1

B

1007－9572(2012)11－3887－03

10.3969/j.issn.1007－9572.2012.11.105

214151江苏省无锡市同仁国际康复医院神经内科

徐新蕾，214151江苏省无锡市同仁国际康复医院神经内科;

E－mail:xinlei－1984@163.com

13 Sachdev P．Homocysteine，cerebrovascular disease and brain atrophy［J］．J Neurol Sci，2004，226(1/2):25－29．

14 Kerkeni M，Tnani M，Chuniaud L，et al．Comparative study on in vitro effects of homocysteine thiolactone and homocysteine on HUVEC cells:evidence for a stronger proapoptotic and proinflammative homocysteine thiolactone［J］．Mol Cell Biochem，2006，291(1/2):119－126．

15 杨旭红，戴雯，刘立英，等.同型半胱氨酸硫内酯致血管内皮功能损伤机制与过氧化体增殖物激活型受体γ的相关性［J］.中国动脉硬化杂志，2009，17(12):975－979．

16 Ferretti G，Bacchetti T，Marotti E，et al．Effect of homocysteinylation on human highdensity lipoproteins:a correlation with paraoxonase activity［J］．Metabolism，2003，53(2):146－151．

17 宋博毅，张艳梅.老年性痴呆与钙代谢障碍相关性的可能机制［J］.实用老年医学，2011，25(4):304－305．

2012－03－23;

2012－10－09)

(本文编辑:张小龙)