CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺导管腺癌中的表达及其与预后的关系

张志华 裘正军 朱光辉 刘俊 赵宁 黄陈 冯正中 吕秀红

·论著·

CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺导管腺癌中的表达及其与预后的关系

张志华 裘正军 朱光辉 刘俊 赵宁 黄陈 冯正中 吕秀红

目的探讨CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白在胰腺导管腺癌中的表达及其与预后的关系。方法用免疫组化法检测71例胰腺导管腺癌及10例正常胰腺组织中CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白的表达，分析它们与临床病理特征及患者预后的关系。结果CD151、c-Met和整合素α3、α6在71例胰腺导管腺癌组织中的表达阳性率分别为81.69%(58/71)、69.01%(49/71)、69.01%(49/71)和84.51%(60/71)，而正常胰腺组织均未表达。CD151和c-Met的表达与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移显著相关(P值均<0.05)。CD151的表达与c-Met及整合素α3、α6的表达呈正相关(r=0.583，P=0.000；r=0.457;P=0.000；r=0.671;P=0.000)。单因素分析显示，CD151、c-Met、整合素α3和α6的表达与预后有关(P值均<0.05)。多因素分析表明，CD151、c-Met是患者术后生存时间的独立预后因子。结论CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺癌的发展、转移及预后发挥重要作用，CD151、c-Met可考虑作为临床评价胰腺癌生物学行为及评估预后的指标。

胰腺肿瘤； CD151； c-Met； 整合素α3； 整合素α6

CD151是Tetraspanin超家族中的一员，参与肿瘤的浸润和转移[1]。原癌基因c-Met编码受体酪氨酸激酶家族的一个成员，被肝细胞生长因子(HGF)激活，导致肿瘤细胞增殖能力增强、运动能力提高、侵袭能力增加[2]。最近研究证明[3]，CD151、c-Met和整合素α3、α6形成一结构和功能性复合物，在人唾液腺癌和乳腺癌细胞的HGF/c-Met信号调节中起重要作用。本研究检测胰腺癌组织CD151、c-Met和整合素α3、α6的表达，分析它们间的相关关系及其与临床病理特征和预后的关系。

材料和方法

一、临床材料

收集1993年8月至2009年1月上海交通大学附属第一人民医院普外科手术切除的71例胰腺癌石蜡标本，男50例，女21例；年龄40～80岁，平均64岁；术前均未行放、化疗。10例正常胰腺组织标本来自供肝附带的正常胰腺，常规固定、石蜡包埋。随访持续至患者病死，截止日为2010年3月15日。总生存期指手术日至病死日，死于癌症复发以外的原因被认为是删失事件。

二、CD151、c-Met和整合素α3、α6蛋白表达检测

采用免疫组化SP法检测，试剂盒购自福州迈新公司，依据说明书操作。鼠抗人CD151及整合素α3单抗、兔抗人整合素α6多抗(均为美国Santa公司)、兔抗人c-Met单抗(英国Abcam公司)工作浓度均为1∶100。以PBS代替一抗作为阴性对照。由两位病理科医师双盲阅片。每张切片选10个高视野，每个视野计100个细胞。阳性染色细胞百分比及染色强度评分：阳性细胞≤10%为1分,11%～50%为2分,51%～70%为3分,>70%为4分；无阳性染色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。两者相加，≤3分为低表达，≥4分为高表达。

三、统计学处理

SPSS13.0统计软件包处理数据。采用χ2检验或Fisher确切概率法。双变量非正态分布资料用Spearman等级相关系数检验。单因素生存分析用Kaplan-Meier法和log-rank检验，多因素生存分析用Cox比例风险模型。P<0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、CD151、c-Met和整合素α3、α6的表达

CD151、c-Met、整合素α3和α6蛋白定位于癌细胞的胞膜和胞质(图1)，正常胰腺组织均未见表达。71例胰腺癌的CD151、c-Met、整合素α3和α6蛋白表达阳性率分别为81.69%(58/71)、69.01%(49/71)、69.01%(49/71)和84.51%(60/71)。CD151低表达36例、高表达35例；c-Met分别为28例和43例；整合素α3分别为32例和39例；整合素α6分别为25例和46例。

图1胰腺癌组织CD151(a)、c-Met(b)、整合素α3(c)和α6(d)的表达 (免疫组化 ×400)

CD151的表达与c-Met、整合素α3、整合素α6表达呈正相关(r=0.583、0.457、0.671；P值均=0.000)。

二、CD151、c-Met和整合素α3、α6表达与胰腺癌临床病理特征的关系

CD151、c-Met的表达与TNM分期、淋巴结转移显著相关，而与其他临床特征无关；整合素α3、α6的表达与临床病理特征均无关(表1)。

三、CD151、c-Met和整合素α3、α6表达与患者预后的关系

71例患者中随访65例，失访6例，中位随访时间14.0个月。47例病死于胰腺癌， 3例存活，删失事件15例。1、2年生存率分别为55.4%和29.2%。

单因素分析表明，CD151、c-Met、整合素α3和α6的表达与患者预后显著相关(P值均<0.05，图2)。

多因素分析示CD151和c-Met表达是影响患者术后生存时间的独立预后因子，CD151的OR值为2.605，95%CI1.308～5.187，P=0.006；c-Met的OR值为2.427，95%CI1.239～4.754，P=0.010。

表1 胰腺癌组织CD151、c-Met、整合素α3和α6表达例数及与临床病理特征的关系

注：a：χ2检验；b：Fisher′s精确检验

图2CD151(a)、c-Met(b)及整合素α3(c)、α6(d)的表达与胰腺癌患者预后的关系

讨 论

CD151参与细胞一系列生物学过程，包括增殖、黏附、运动、血管生成、半桥粒形成和转移。Testa等[4]证实，CD151抗体能阻止肿瘤细胞从原发灶脱离；Kohno等[5]证实，CD151单抗抑制癌细胞体内转移，将CD151cDNA转染肿瘤细胞可增加细胞的迁移和侵袭能力。临床研究表明[6]，CD151的表达与淋巴结转移相关。本结果证实CD151在胰腺导管腺癌组织中高表达，与Gesierich等[7]的报道一致。既往研究显示，CD151的高表达可预测前列腺癌和肝细胞癌[6]的不良预后。本结果显示，CD151的高表达是判断胰腺癌预后的独立因子。

CD151需与各种跨膜蛋白相互作用形成复合物才能发挥生物学功能[8]。本实验证实，CD151表达增加与c-Met、整合素α3、α6表达显著相关，且c-Met的过表达与TNM分期和淋巴侵袭显著相关，c-Met同样是判断胰腺癌预后的独立因子。

[1] Zheng ZZ,Liu ZX.CD151 gene delivery increases eNOS activity and induces ECV304 migration,proliferation and tube formation.Acta Pharmacol Sin,2007,28:66-72.

[2] Birchmeier C,Birchmeier W,Gherardi E,et al.Met,metastasis,motility and more.Nat Rev Mol Cell Biol,2003,4:915-925.

[3] Klosek SK,Nakashiro K,Hara S,et al.CD151 regulates HGF-stimulated morphogenesis of human breast cancer cells.Biochem Biophys Res Commun,2009,379:1097-1100.

[4] Testa JE,Brooks PC,Lin JM,et al.Eukaryotic expression cloning with an antimetastatic monoclonal antibody identifies a tetraspanin (PETA-3/CD151) as an effector of human tumor cell migration and metastasis.Cancer Res,1999,59:3812-3820.

[5] Kohno M,Hasegawa H,Miyake M,et al.CD151 enhances cell motility and metastasis of cancer cells in the presence of focal adhesion kinase.Int J Cancer,2002,97:336-343.

[6] Ke AW,Shi GM,Zhou J,et al.Role of overexpression of CD151 and/or c-Met in predicting prognosis of hepatocellular carcinoma.Hepatology,2009,49:491-503.

[7] Gesierich S,Paret C,Hildebrand D,et al.Colocalization of the tetraspanins,CO-029 and CD151,with integrins in human pancreatic adenocarcinoma:impact on cell motility.Clin Cancer Res,2005,11:2840-2852.

[8] Hemler ME.Tetraspanin functions and associated microdomains.Nat Rev Mol Cell Biol,2005,6:801-811.

2010-08-19)

(本文编辑：屠振兴)

ExpressionofCD151,c-Met,integrinalpha3,alpha6andtheprognosticsignificanceinpancreaticductaladenocarcinoma

ZHANGZhi-hua,QIUZheng-jun,ZHUGuang-hui,LIUJun，ZHAONing,HUANGChen,FENGZheng-zhong，LÜXiu-hong.

DepartmentofGeneralSurgery,FirstPeople′sHospitalofShanghai,ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200080,China

Correspondenceauthor:QIUZheng-Jun,Email:qiuwryb@gmail.com

ObjectiveTo investigate the expression and prognostic significance of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 in pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC).MethodsThe expression of CD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 in 71 patients with PDAC and 10 samples of normal pancreas tissues were detected by immunohistochemistry, and the relationship between the expression of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 and the clinicopathological features, prognosis of these patients was analyzed.ResultsThe positive expression rates of CD151, c-Met and integrin alpha 3, alpha 6 in PDAC were 81.69% (58/71), 69.01%(49/71), 69.01%(49/71) and 84.51%(60/71), and there was no expression in normal pancreas tissues. The expressions of CD151, c-Met were significantly associated with TNM stage and lymph node metastasis (P<0.05). The expression of CD151was positively correlated with the expressions of c-Met and integrin alpha3, alpha6 (r=0.583,P=0.000,r=0.457;P=0.000,r=0.671;P=0.000). Univariate analysis suggested the expression of CD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 was associated with survival (P<0.05). Multivariate analysis suggested the expression of CD151, c-Met was the independent prognostic factor for post-operative survival.ConclusionsCD151, c-Met and integrin alpha3, alpha6 play a role in the development, metastasis and prognosis of PDAC, and they might be new markers to predict biological behavior and the prognosis of PDAC patients.

Pancreas neoplasm; CD151； c-Met； Integrin alpha3； Integrin alpha6

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2011.03.013

200080 上海，上海交通大学医学院附属第一人民医院普外科(张志华、裘正军、朱光辉、刘俊、赵宁、黄陈)，病理科(冯正中、吕秀红)

裘正军，Email: qiuwryb@gmail.com