桂林西瓜霜的快速检验方法

广西桂林食品药品检验所（541002）蒋玲 谢黔锋 饶伟文

桂林西瓜霜由西瓜霜、青黛、大黄、黄连、黄柏、山豆根等14味药组成，具有清热解毒、消肿止痛的功效。临床上用于风热上攻，肺胃热盛所致的乳蛾、喉痹、口糜、急慢性咽喉炎，口腔溃疡等症[1]。收载于《中国药典》2005年版一部，其青黛、大黄、黄连、黄柏的TLC鉴别方法操作步骤较多，检验周期长。为了配合药品抽样车在药品抽样现场进行快速检验，提高抽样命中率，本研究对桂林西瓜霜的快速检验方法进行了研究，效果较满意。现报告如下：

1 仪器与试药

BUT2030-40-06超声波清洗器，必能信超声（上海）有限公司；ZF-I型三用紫外分析仪，上海顾村电光仪器厂。

桂林西瓜霜，桂林三金药业股份有限公司提供，批号分别为060236、060305、060307。缺青黛的阴性样品、缺大黄的阴性样品、缺黄连和黄柏的阴性样品，桂林三金药业有限公司提供。大黄对照药材，中国药品生物制品检定所，批号120984-200301；靛玉红对照品，中国药品生物制品检定所，批号0717-200303；盐酸小檗碱对照品，中国药品生物制品检定所，批号110713-200608；硅胶GF254薄层板，药品快检专用TLC板，天津思利达色谱技术开发公司；硅胶GF254：青岛海洋化工厂。所用试剂均为分析纯。

附图1 青黛和大黄的薄层色谱图

2 方法与结果

2.1 青黛、大黄的薄层色谱鉴别 取样品2.5 g，加盐酸4 m L 湿润，再加二氯甲烷10mL，振摇或超声提取2min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。取靛玉红对照品，加二氯甲烷制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述3种溶液各3μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（60～90℃）－环己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，分别置可见光及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与靛玉红对照品色谱相应的位置上，可见光下显相同的紫红色斑点；在与大黄对照药材色谱相应的位置上，紫外光灯（365nm）下显相同的橙黄色荧光斑点。而同法操作，阴性对照溶液均无对应的特征斑点。见附图1。

2.2 黄连、黄柏的薄层色谱鉴别 取2.1项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液，吸取上述2种溶液各2μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯－无水乙醇－甲酸（7:1:2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，并在其下方另显1～2个黄色荧光斑点，而同法操作，阴性对照溶液均无对应的特征斑点。结果见附图2。

附图2 黄连、黄柏的薄层色谱图

3 讨论

3.1 桂林西瓜霜为中药保护品种，阴性样品由桂林三金药业有限公司制备。为了尽量减少对照药材的使用，便于快检，故选择盐酸小檗碱对照品作对照，采取在其下方另显1～2个斑点作为结果判断依据。大黄中蒽醌类成分多以结合型蒽醌的形式存在，与糖通过苷键结合，遇酸可水解成游离型的蒽醌，后者可溶于亲脂性的有机溶剂。靛玉红在亲脂、亲水性的有机溶剂中都有较好的溶解性。小檗碱与盐酸成盐后易溶于沸水，在三氯甲烷和二氯甲烷中也能溶解。本文用盐酸酸化使结合型蒽醌水解，同时使小檗碱成盐，然后用二氯甲烷提取。提取溶剂比较了酸性乙醇、不同浓度盐酸加三氯甲烷或二氯甲烷等溶剂，发现盐酸加三氯甲烷或二氯甲烷的提取效果较好，故选择毒性相对较小的盐酸加二氯甲烷。由于盐酸用量少，免去了分液这一步骤，直接滤过，滤液作为青黛、大黄、黄连、黄柏的共用供试液。

3.2 青黛、大黄的鉴别，比较了①石油醚（60～90℃）－环己烷－乙酸乙酯－甲酸（1:1:1:0.1）、②石油醚（30～60℃）－甲酸乙酯－甲酸（15:5:1）的上层溶液、③三氯甲烷－乙酸乙酯－甲酸（18:1:0.5）、④环己烷－乙酸乙酯（2:1），结果①和②均能使待测组分有效分离，斑点清晰，故选择配制较简便的①作为展开剂。

3.3 黄连、黄柏的鉴别，展开剂比较了①乙酸乙酯－无水乙醇－甲酸（7:1:2）、②乙酸乙酯－丁酮－甲酸－水（5:3:1:1）、③乙酸乙酯－无水乙醇－浓氨溶液（6:3:1.5）、④乙酸乙酯－无水乙醇－浓氨溶液（35:5:1），结果以①为好。《中国药典》方法的展开剂中有苯，毒性大，不采用。

3.4 用本方法检验了同一生产企业的3批样品，结果均符合规定。同时取样按《中国药典》2005年版一部桂林西瓜霜项下的方法检验，结论与本方法相同。

3.5 本方法曾在不同温度、湿度下试验，重现性较好；用自制的硅胶GF254薄层板试验，斑点也能有效分离。经对比，按《中国药典》方法检验，耗时约5h，而本方法只需1h，且用乙酸乙酯等毒性小的溶剂替换了药典方法中苯、甲醇等毒性大的溶剂，达到了快检“简便、快捷、环保、统一”的要求，适用于药品抽样时的快速检验，在基层药品经营、使用单位亦适用。