白芍乙醇提取物对四氯化碳诱导的急性肝损伤的保护作用

金香男

白芍乙醇提取物对四氯化碳诱导的急性肝损伤的保护作用

金香男

目的观察白芍乙醇提取物对四氯化碳诱导大鼠急性肝坏死的影响。方法将SD大鼠分为4组。分别用生理盐水、EERP灌胃7 d，最后1 d腹腔注射CCl4，检测血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基酸转移酶、碱性磷酸酶;黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别检测肝匀浆中超氧化物岐化酶、过氧化氢酶和丙二醛。结果与对照组比较，CCl4组血清中ALT、AST、ALP的含量显著增加(P＜0.05)。与CCl4组比较，EERP+CCl4组血清中ALT、AST、ALP的含量显著下降(P＜0.05);胞浆中SOD和CAT活性提高、MDA水平降低(P＜0.05)。结论白芍乙醇提取物能显著减轻CCl4所致的大鼠鼠急性肝损伤具有一定的保护作用。

白芍;大鼠;四氯化碳;肝损伤

白芍为补血敛阴平肝柔肝止痛之品［1］。文献报道其具有抗氧化、抗炎、抗过敏、等多种药理学作用［2］。故本实验通过观察白芍乙醇提取物作用于CCl4肝损伤的急性动物模型，探讨白芍乙醇提取物对CCl4急性肝损伤的影响及其机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SD大鼠。

1.2 试剂 CAT、SOD、MDA测定试剂盒、乙醚、四氯化碳，多聚甲醛等。

2 结果

2.1 白芍乙醇提取物对血清中ALT、AST、ALP含量的影响结果见表1。与对照组比较，CCl4组血清中ALT、AST、ALP的含量显著增加，P＜0.05。与CCl4组比较，EERP+CCl4组ALT、AST、ALP下降，P＜0.05。

2.2 白芍乙醇提取物对肝匀浆SOD、CAT与MDA的影响结果见表2。与对照组比较，CCl4组胞浆和线粒体中的SOD、CAT活性降低(P＜0.05)，MDA的含量升高(分别P＜0.05)。与CCl4组比较，白芍乙醇提取物 +CCl4组胞浆中SOD、CAT的活性显着增加(P＜0.05)，MDA的含量显着降低(P＜0.05)，线粒体中的CCl4活性增加，MDA含量降低无显着差异;白芍乙醇提取物 +CCl4组胞浆和线粒体中SOD、CAT活性均显着增加(P＜0.05)，降低MDA含量无显着差异。

表2 白芍乙醇提取物对CCl4诱导大鼠肝组织中SOD、CAT及MDA含量的影响(±s，n=10)

表2 白芍乙醇提取物对CCl4诱导大鼠肝组织中SOD、CAT及MDA含量的影响(±s，n=10)

注:与模型组比较*P＜0.05

组别 SOD(U/ml) CAT(U/ml) MDA(nmol/ml) 81.3±9.3 102.3±17.3 4.5±0.1模型组 53.8±5.7 67.5±10.3 12.7±0.6 EERP 150 mg/kg 60.4±6.8 75.5±11.6 8.3±0.2 EERP 300 mg/kg 72.8±7.4* 92.8±15.3* 6.3±0.4正常组*

3 讨论

四氯化碳小鼠急性肝损伤模型是目前肝病研究的重要模型之一。四氯化碳注射后可以使部分肝被膜的破坏，并可导致血纤维蛋白析出、以中性粒细胞和嗜酸性白细胞为主的炎症细胞大面积浸润，并导致小叶间结合组织周围的肝细胞发生空泡变性和大量坏死。本研究HE染色病理切片证实了白芍乙醇提取物较四氯化碳组显着改善肝细胞变性、坏死的范围，表明白芍乙醇提取物对四氯化碳诱导的急性肝损伤有保护作用。本研究发现白芍乙醇提取物明显增加SOD、CAT等的活性，而较显著的抑制MDA等氧自由基的产生。因此，我们认为白芍乙醇提取物的干保护作用可能与增加了肝脏抗氧化的储备有关。

［1］王飞，伍文彬，徐世军，等.赤、白芍对血瘀证动物模型内皮功能及血液流变学的影响.中药药理与临床，2009，25(4):40-41.

［2］朱家恩，白延斌，蔺美玲，等.白芍对去卵巢大鼠体重、血脂及抗氧化能力的影响.中国老年学杂志，2009，25(2):135-137.

133400龙井中医医院内科病房

1.3 microfuge22R台式冷冻离心机，酶联免疫检测仪，真彩色病理显微图像分析系统令自动生化分析仪。

1.4 白芍乙醇提取物的制备 取干燥的白芍500 g加3000 ml 70%乙醇，上清液在45℃减压浓缩，经冷冻干燥得粉末，临用前以蒸馏水或整理盐水配置。

1.5 动物分组及给药 动物分组及给药:SD大鼠40只，随机分成4组，每组10只。对照组、CCl4组、150 mg/kg白芍乙醇提取物+CCl4组、300 mg/kg白芍乙醇提取物+CCl4组，灌胃7 d，1次/d，0.5 ml/次，最后1 d，对照组腹腔注射生理盐水，与各组腹腔注射CCl41 ml/kg。16 h后乙醚麻醉打开胸腔取血，取肝脏。

1.6 血清ALT、AST、ALP测定 大鼠打开胸腔后，从左心室直接抽血5 ml，37℃ 温浴10 min，3000 r/min离心，10 min，取上血清1000 μl，参照试剂盒的说明书测定ALT、AST、ALP。

1.7 肝匀浆SOD、CAT与MDA检测 4℃生理盐水冲洗肝表面，称取0.5 g肝组织，加入9 ml生理盐水，剪碎，研磨，制备5%的肝匀浆，2000 r/min离心10 min，取上清1 ml，4℃10000 r/min离心15 min，上清为胞浆待测。沉淀加入1 ml生理盐水，利用细胞超声破碎仪，制备成10%的线粒体匀浆待测。

表1 白芍对CCl4所致肝损伤小鼠血清中ALT、AST及ALP活性的影响(±s，n=10)

注:与模型组比较*P＜0.05

组别 ALT(U/L) AST(U/L) ALP(U/L) 45.7±3.8 51.5±5.3 102.5±6.3模型组 163.1±12.3 206.4±14.7 208.4±16.3 EERP 150 mg/kg 140.3±6.3 162.4±11.6 178.2±14.5 EERP 300 mg/kg 81.3±6.9*109.38±7.4*139.7±10.3正常组*