HPLC法测定阿胶养颜软胶囊中维生素E的含量

田守生，郭尚伟，段小波，李士栋，郝向慧，尤金花

(山东东阿阿胶股份有限公司，山东省胶类中药研究与开发重点实验室，山东 聊城 252201)

阿胶养颜软胶囊由阿胶、白芷、川芎、维生素E等原料制成，具有明显的养颜美容、祛除黄褐斑的保健功效;其中维生素E不但对延缓衰老有一定作用，而且可稳定药效组分、防止氧化。而维生素E含量的检测常采用国家标准食品中的方法，检测过程中样品的制备经皂化、提取、洗涤、浓缩等步骤，存有操作过程复杂、检测周期长、误差大等缺点，也不利于批量检测。据报道，对于植物油类的样品，可直接用流动相或己烷溶解分析［1］。鉴于此，我们尝试甲醇直接超声提取制备供试品，最终建立了阿胶养颜软胶囊中维生素E的含量测定方法。

1 仪器与试药

Waters 2695高效液相色谱仪，Agilent Zorbax－C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，Waters 2996 二极管阵列检测器，KQ－800KDE型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

维生素 E(中国药品生物制品检定所，批号:062－9405)，DL－α－生育酚(美国Supelco公司，批号:LB57065)，阿胶养颜软胶囊(山东东阿阿胶股份有限公司，批号0020310、0070810、0080910)，甲醇为色谱纯，水为注射用水，其他试剂为分析纯。

2 方法及结果

2.1 测定方法

2.1.1 色谱条件 流动相为甲醇;流速为1.0 mL·min－1;检测波长284.6 nm;柱温35℃;进样体积10 μL。

2.1.2 对照品溶液的制备 取维生素E对照品约26 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。

2.1.3 供试品溶液的制备 避光操作，取本品8粒，小心破囊，内容物于100 mL量瓶中，精密称定，加适量甲醇轻微震荡使其分散，用甲醇稀释至刻度，置于超声波中超声处理(120 W，40 kHz)15 min，取1 mL 滤过，备用。

2.2 线性关系考察 取维生素E对照品约26 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀;分别精密量取1、2、4、6、8 mL 置10 mL 容量瓶中，甲醇稀释至刻度，最终配制成浓度分别为 0.0530、0.1061、0.2122、0.3183、0.4244 mg·mL－1的溶液。在上述色谱条件下分别进行测定，记录色谱图，以维生素E浓度(C)为横坐标，色谱峰面积(A)为纵坐标，得回归方程:

A=2.2408 × 103C － 32.7616 r=0.9999

结果表明在0.0531 ～0.4244 mg·mL－1范围内线性良好。

2.3 重复性试验 取同一批阿胶养颜软胶囊样品(批号:0020310)6份，按制备方法分别制成供试品溶液，照测定方法测定，峰面积的RSD值为2.35%。

2.4 稳定性试验 取供试品在0～24 h内进样5次(0、2、4、6、24 h)，测得峰面积分别为:229.687、233.906、235.046、235.076、225.984，RSD 值为 1.72%。实验结果表明供试品溶液在24h内稳定。

2.5 回收率试验 称取已知含量的样品(批号:0020310)约2.0 g，置100 mL量瓶中，共取9份，分别精密加入浓度为1.0610 mg·mL－1的对照品溶液 1、2、3 mL，甲醇定容至刻度，制成高、中、低3种浓度各3份的供试品溶液，按测定方法进行测定，RSD值为2.06%，结果见表1。

表1 回收率测定结果

2.6 含量测定 分别按照上述方法、国标方法，对三批阿胶养颜软胶囊中维生素E含量进行检测。结果表明本文的方法比国标中的方法检测结果略高，详见表2。

表2 样品含量测定结果

图1 维生素E标准品HPLC色谱图

图2 阿胶养颜软胶囊HPLC色谱图

图3 阿胶养颜软胶囊3D液相色谱图

3 讨论

制备的维生素E对照品与供试品在210～400 nm波长下扫描其光谱图，结果在284.6 nm处有一最大吸收峰，故测定波长选择284.6 nm。

阿胶养颜软胶囊成分较复杂，但维生素E含量相对较少，故采用超声的方法进行提取［2］。超声时内容物均匀分散于甲醇中形成浊液，充分与甲醇接触，这可能是能用甲醇直接提取含油脂类样品中维生素E的原因。提取的样品经液相色谱分析无其他成分干扰，短时间内即可把所含的杂质成分从柱中洗出。分别设超声(120 W，40 kHz)时间为5 min、15 min、30 min，考察了超声时间对样品提取的影响;超声时间为5 min时检测含量偏低，而15 min和30 min含量基本一致，故超声处理(120 W，40 kHz)时间选择15 min。

总之，我们建立了阿胶养颜软胶囊中的维生素E含量测定方法:甲醇超声提取进行供试品的制备，样品处理简单、快捷，便于批量处理;采用HPLC法检测，甲醇为流动相，检测时间短，无其他成分干扰。本方法重现性好、回收率高，还可应用于维生素E软胶囊等其他产品中维生素E的含量测定。

［1］李东，顾鹏，蒋淑梅.高效液相色谱法测定食品中维生素 E 的研究进展［J］.食品科学，2000，21(6):57－59.

［2］Xu Z.Comparison of extraction methods for quantifying vitamin E from animal tissues［J］.Bioresour Technol，2008，99(18):8705－8709.