几种药物制备糖尿病小鼠模型效果的比较

张雅琴 吴萍萍 向敏 肖洋

中国中医科学院糖尿病研究总院调查资料显示，我国的糖尿病患者人数已达8000万左右，占世界糖尿患者群总数的五分之一，患病率居世界第二位［1］。胰岛素抵抗和胰岛功能受损是糖尿病发病机制中两个重要环节［2］，为了深入对疾病的探讨，我们必须依赖于实验动物及模型，这需要我们继续对该方面进行进一步的研究。本实验选用地塞米松、氢化可的松、四氧嘧啶和链脲佐菌素药物配合高糖高脂饮食制备小鼠糖尿病模型，通过检测血糖及胰岛素水平变化，计算胰岛素抵抗指数评价这几种药物制备糖尿病模型的效果。目前糖尿病模型的制备研究较多，局限于综述类，研究制备方法的多样性和机制阐述，缺乏实际的实验依据，该实验研究的意义在于为使用化学药物诱导糖尿病动物模型时选用何种药物达到预期的理想造模效果提供精准的实验数据依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 昆明种小白鼠30只(6～8周龄)，体质量18～22 g雄性，购自苏州大学医学院实验动物中心。

1.2 实验动物的分组及模型制备 实验动物随机分为五组，分别为空白对照组、地塞米松组、氢化可的松组、四氧嘧啶组和链脲佐菌素组，每组10只小鼠。空白对照组、四氧嘧啶组和链脲佐菌素组小鼠按36 mg/(kg·d)腹腔注射，地塞米松组和氢化可的松组小鼠按36 mg/(kg·d)肌内注射，连续给药30 d，分别于第10，20天和30天禁食8 h测定空腹血糖值，最后一次给药前禁食，给药后8 h内眼眶采血收集血液标本。

1.3 实验动物血糖、胰岛素水平的检测和胰岛素抵抗指数的计算 实验小鼠分别于给药的第10，20天和30天禁食8 h采取尾动脉微量血，使用强生稳豪倍易型血糖仪及血糖试纸测定空腹血糖值(FPG)。最后一次给药模型制备结束后8 h内眼眶采血收集血液标本，4℃静置半小时，吸取上层血清，使用小鼠胰岛素水平检测试剂盒ELISA测定空腹血清胰岛素水平(FIN)，使用公式计算胰岛素抵抗指数HOMA-IR=［FPG(mmol/L)FIN(mIU/L)］/22.5。

1.4 统计学方法 所有实验结果采用SPSS 10.0软件进行统计分析，结果以均数±标准差(±s)的形式表示。组间差异采用t检验。

2 结果

2.1 小鼠第10，20天和30天空腹血糖值(FPG)，见表1。

2.2 小鼠空腹胰岛素水平(FIN)及胰岛素抵抗指数(HOMAIR)计算，见表2。

表1 五组小鼠第10、20、30天空腹血糖值(FPG)的比较

表2 五组小鼠空腹胰岛素水平(FIN)及胰岛素抵抗指数、胰岛素敏感指数的比较

3 讨论

糖尿病动物模型的制备方法多种多样，需根据研究目的和实验条件，合理地制备实验动物模型［3］。目前常用的是药物诱导的方法建立糖尿病动物模型［4］。糖尿病成模效果的评价方法是造模研究的重要内容，正常血糖-高胰岛素钳夹技术是目前评价体内IR的金标准，然而该试验费时费力，胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)法评价胰岛素抵抗与金标准明显相关性，该法评价胰岛素抵抗更优于其他简单的测试方法，尤其适合于动物模型评价基础研究［5］。本实验中各种方法制备的小鼠均出现出现了明显的多饮、多食、多尿和体重减轻(即“三多一少”)症状，与空白对照组相比，地塞米松组、氢化可的松组、四氧嘧啶组和链脲佐菌素组血糖水平有显著升高，胰岛素分泌、胰岛素抵抗指数显著升高，胰岛素敏感指标显著降低，说明各组均存在胰岛素的大量分泌和对胰岛素的敏感性下降。胰岛素敏感指标数据显示，各组制备糖尿病模型的有效效果依次分别为链脲佐菌素、地塞米松、四氧嘧啶和氢化可的松。

［1］秦玉祥．丹参滴丸联合肠溶阿司匹林治疗160例糖尿病血脂紊乱患者的临床观察.中国医药指南，2010，8(3)：89-90．

［2］Whitcroft S，Herriot A.Insulin resistance and management of the menopause：a clinical hypothesis in practice.Menopause Int，2011，17(1)：24-28．

［3］刘微，李冀，盛波．胰岛素抵抗动物模型的研究进展.中医药信息，2008，25(6)：9-11．

［4］覃雯，唐爱华．糖尿病实验性动物模型研究概况．时珍国医国药，2007，18(6)：1511-1512．

［5］王玉中，张志国，孙朝辉．2型糖尿病大鼠模型的建立与评价.毒理学杂志，2009，23(6)：476-478．