从蟑螂体内检出O1群霍乱弧菌＊

王路梅，杨晋川，郭 惠，张 雷，景怀琦

从蟑螂体内检出O1群霍乱弧菌＊

王路梅，杨晋川1，郭 惠1，张 雷1，景怀琦2

霍乱弧菌可引起霍乱的发生，是国家法定的甲类传染病，多检出于水体，海产品和水产品中；而从蟑螂体内检出霍乱弧菌尚未有报道。笔者于2010年12月份从蟑螂体内检出一株O1群霍乱弧菌，稻叶血清型。现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源 分别在徐州市区的超市、医院、居民区、宾馆、餐饮店，采集蟑螂共计30份。

1.1.2 试剂、血清及设备 霍乱弧菌荧光定量PCR检测试剂盒为深圳易瑞生物制品有限公司生产；霍乱弧菌O1/O139免疫磁珠为天津生物芯片技术有限责任公司产品；碱性蛋白胨水、TCBS为杭州天和微生物试剂有限公司生产，弧菌显色培养基为法国Chromagar产品，弧菌生化鉴定管购自广东环凯微生物科技有限公司；霍乱弧菌多价、小川、稻叶型血清由中国药品生物制品鉴定所提供。Invitrogen Bead RetrieverTM全自动微生物磁珠分选仪、ABI 7500荧光定量PCR仪、智能恒温恒湿培养箱单位自备。

1.2 方法

1.2.1 分离方法 将采集到的单只蟑螂用无菌的方法剖开蟑螂，取其肠内容物，剪碎放入2mL碱性蛋白胨水中，36℃增菌8h，取8h增菌液1mL进行霍乱弧菌荧光PCR检测，荧光PCR检测阳性者进行2次增菌，36℃培养18h；分别取PCR阳性的8h增菌液和二次增菌液各500μL进行免疫磁珠富集，将免疫磁珠富集后的混悬液分别划线于TCBS平板和弧菌显色平板，36℃培养18h。

1.2.2 血清凝集 挑取TCBS和弧菌显色平板上的可疑菌落转种于营养平板分纯，取纯菌落分别与O1群霍乱弧菌多价和O139群霍乱血清凝集，如O1群多价血清凝集阳性再分别与稻叶型和小川型血清凝集，生理盐水阴性。

1.2.3 生化确认 取纯菌落进行革兰氏染色镜检，氧化酶试验，以及其它生化确认试验。

2 结 果

2.1 霍乱弧菌检出情况 经荧光PCR方法、免疫磁珠富集、TCBS和弧菌显色培养基分离证实，从30份蟑螂体内检出一株O1群霍乱弧菌，检出率为3.33%。

2.2 菌株生物特性 革兰氏染色阴性，菌体短小，呈弧状；氧化酶＋；血清分型为O1群稻叶型霍乱弧菌，生化特征详见表1。

表1 蟑螂体内检出霍乱弧菌生化谱

2.3 霍乱弧菌的带毒情况 此株霍乱弧菌经中国CDC传染病所国家细菌分子生物学重点实验室检测证实，不携带ctxAB毒素基因。

3 讨 论

蟑螂或称蜚蠊，俗称偷油婆、茶婆子、灶蚂子、货郎等。在昆虫中，蟑螂是最古老的种类之一。由于它们适应性强，早已从发源地非洲通过海运商船被带到南美、东欧和南亚的港口城市，以后逐渐扩散到温带，甚至到北方寒冷地区，现已成为当今重要的卫生害虫。蟑螂可携带多种细菌，病毒，真菌，寄生虫卵。若使用被蟑螂污染过的食物极易引起肠道传染病和肠道寄生虫病的发生。据翟明芳［1］等人的报道，蟑螂在不同生境下体表带菌率为93.65%，而在医院，农贸市场，宾馆及居民区蟑螂的体表带菌率为100%；而林英姿［2］等人对170只蟑螂体表带菌的调查结果为：82.4%的蟑螂都不同程度的带有大肠杆菌，铜绿假单胞菌，沙门氏菌，金黄色葡萄球菌，变形杆菌和霉菌等。

在我国蟑螂以前主要分布于南方地区，那里的气候常年温暖湿润，适宜蟑螂的生存。随着交通、物流的日益发达，蟑螂逐渐被带到了北方。徐州地区是从1995年以后才逐渐有蟑螂孽生的。蟑螂适宜生存温度为20～30℃，低于0℃就会被冻死。徐州地区冬季较寒冷，但是随着人民生活水平的提高，取暖设备的普遍使用，以致蟑螂可以终年活动和繁殖。此次检出的1株O1群的霍乱弧菌来源于本市某一大型超市加工区内采集的蟑螂体内。由于超市都具有取暖设施并且有充足的食物和水源，非常适宜蟑螂的孽生和繁殖。笔者分析此只蟑螂有可能污染过海水产品，并携带了海水产品中常见的霍乱弧菌。

霍乱弧菌可引起烈性肠道传染病，起病急，传播快，自1817年首次爆发以来已经引起了7次世界范围内的霍乱大流行［3］。此株O1群霍乱弧菌虽然不携带ctxAB毒素基因，但是在特定的条件下，即使非产毒株的霍乱弧菌如污染水或食品，也可引起水源性或食源性病例甚至爆发流行［4］。超市内的蟑螂如不被及时消灭，蟑螂随处爬行，释放排泄物，就极易造成超市内霍乱弧菌的大面积污染。而霍乱的主要传播途径就是经食物和水，所以要切实加强超市的卫生管理，彻底灭除蟑螂。

［1］翟明芳，马桢红，张梦寒，等.苏州市蟑螂带菌情况调查研究［J］.医学动物防制，2008，24（2）：133－134.

［2］林英姿，崔玉宝，杨文，等.海南5城市蟑螂种类组成及其体表带菌情况调查［J］.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2008，26（1）：77－78.

［3］高守一.霍乱防治手册［M］.5版.北京：中华人民共和国卫生部，1999：1－3.

［4］严寒秋，李伟，吴疆，等.一起有非产毒霍乱弧菌引发腹泻暴发的调查［J］.中华流行病学杂志，2006，27（10）：918－919.

R378.3

A

1002－2694（2011）10－0948－02

＊江苏省卫生厅预防医学科研项目（Y200722）。

景怀琦，Emai：jinghuaiqi＠icdc.cn

1.徐州市疾病预防控制中心，徐州 221006；2.中国CDC传染病所，北京 102206

2011－05－03；

2011－08－07