产程发动前后环氧化酶-2(COX-2）核因子KappaB P65(NF-KBP65）在平滑绒毛膜上的表达

张丹妮,曲冬颖,李海梅

(1.解放军第二O八医院,吉林长春 130062;2.解放军第二○二医院）

众所周知,分娩发动的必备条件是胎儿的成熟和母体的准备。母体准备包括,子宫由分娩前期(0期）稳态,进入敏感期即分娩准备期(1期）,此期子宫生物学上的主要变化为缩宫素受体大量增加、子宫下段及宫颈成熟、蜕膜与胎膜自分泌旁分泌效应的启动。有关分娩动因已有许多学说,但仍不清楚触发分娩启动的始动因素,无论神经内分泌因素抑或胎盘及胎儿神经内分泌因素均缺乏母胎之间启动信号的确认。

1 资料与方法

1.1 研究对象选择2009年06月至11月在我院因骨盆狭窄,瘢痕子宫,臀位,高龄初产,社会因素,产程进展延迟或停滞等指征行剖宫产分娩的产妇80例,均为足月孕妇(孕周为37-41周）。其中产程未发动组40例,产程发动组40例(选取宫口扩大至4 cm-9 cm产妇）均无内科合并症及产科并发症,无感染征象。两组平均年龄、孕周比较差异无统计学意义,且均为初产妇。

1.2 方法两组均于剖宫产后在远离胎盘部位剥取平滑绒毛膜。福尔马林固定后制作厚度4 μ m石蜡切片;按照SABC试剂盒的操作步骤进行免疫组织化学染色。试剂购自武汉博士德公司。

1.3 结果判断每组均用PBS代替一抗作阴性对照,阳性对照为已知的阳性片。以细胞胞质或胞核中出现棕黄色颗粒为阳性判断标准。每例标本选取一张切片,每张切片高倍镜下(×400）选取5个视野。按无阳性细胞或阳性细胞数＜5%为阴性(-）;阳性细胞数5%-25%为弱阳性(+）;阳性细胞数25%-50%为阳性(++）;阳性细胞数＞50%为强阳性(+++）四级。免疫组化结果观察由两名病理科医生分别计数采用盲法。

1.4 统计学分析用SPSS13.0软件行进行卡方检验,P＜0.05为差异有显著性。

2 结果

COX-2在产程发动前后胞浆中比较差异有显著性(P＜0.05）,COX-2在产程发动前后胞核中比较差异有显著性(P＜0.05）,NF-KBP65在产程发动前后胞浆中比较差异有显著性(P＜0.05）,NF-KBP65在产程发动前后胞核中比较差异有显著性(P＜0.05）。

表1 平滑绒毛膜组织中胞浆、胞核COX-2表达比较

表2 平滑绒毛膜组织中胞浆、胞核NF-KB P65表达比较

3 讨论

在本试验中选取无临床可见感染征象的产妇,标本取材来自剖宫产术中,尽可能排除潜在感染因素的影响。虽然在产程未发动组与产程发动组我们均观察到平滑绒毛膜组织中有COX-2及NF-KBP65蛋白表达,但在产程发动组明显呈增强表达趋势。

NF-KB家族包括5个成员:Rel-A(p65）、RelB、CRel、pl05/p50和 p100/p52,是具有转录激活功能的一种蛋白质。NF-KB它们通常以各种纯合二聚体和杂合二聚体形式存在,最常见的诱生型NF-KB主要是P50/P65异二聚体,从而调节不同靶基因的转录[1]。于多种类型的细胞中都可以检测到它们的表达,但在炎症部位表达明显增强,提示在免疫应答反应和炎症反应中NF-KB可能发挥关键作用。

前列腺素合成过程中的一个重要限速酶是环氧化酶(COX）,包括COX-1和COX-2两种亚型,COX-1在细胞中广泛表达,主要参与维持细胞正常的生理功能;而COX-2在正常细胞中表达很少,参与炎症过程及肿瘤的发生、发展等多种病理生理过程,仅在细胞受到刺激时迅速从头合成[2]。COX-2基因启动子中包含2个NF-KB位点,两个NF-KB位点中的一个或两个突变都会显着地降低COX-2的基因转录[3]。Callejas等通过对鼠胎盘滋养细胞一氧化氮合成酶2(NOS2）和环氧合酶2(COX2）分泌的研究,结果显示NF-KB的激活使NOS-2和COX2在滋养细胞中的持续表达,蛋白酶抑制剂和抗氧化剂阻断NF-KB激活而使NOS和COX不能表达[4]。在分娩过程中,前列腺素(PGs）主要在胎膜、蜕膜内合成,以旁分泌形式发挥作用,前列腺素制剂已广泛应用于临床。不但可以促进子宫平滑肌收缩,而且可以促进宫颈成熟[5]。NF-KB通过与COX-2基因启动子相应位点结合后使COX-2的转录表达增加,进而增加前列腺素合成。作为一种重要的核转录因子NFKB调控炎症细胞因子、COX-2及缩宫素受体等表达,反过来炎症细胞因子可以激活NF-KB,使其作用级联放大。因此我们推论NF-KB、COX-2可能参与了分娩的始动环节。

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