奶牛隐性乳房炎的检测及其治疗方法

余彦国,张 瑾

(甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃 武威 733006)

奶牛隐性乳房炎的检测及其治疗方法

余彦国,张 瑾＊

(甘肃畜牧工程职业技术学院,甘肃 武威 733006)

奶牛乳房炎是困扰奶牛养殖业发展最严重的疾病之一,特别是隐性乳房炎,临床症状不明显,不仅导致奶牛产乳量和乳质量的降低,还可能传染给其他奶牛,导致疾病的扩散。因此,只有对乳汁进行检测,通过其生理、生化等指标变化来判断乳房炎的发生情况。为减少该病的发生、提高乳质量,本文总结了奶牛隐性乳房炎的微生物学检验、细胞学检查、酶学指标等检测方法以及用乳肿消膏、盐酸左旋咪唑、消炎增乳散、生物制剂、生殖股神经封闭等治疗措施。

奶牛;隐性乳房炎;检测;治疗

前言

乳房炎是奶牛常见的顽固性疾病,全世界每年因其造成的经济损失达20亿美元,平均每头每年损失约200美元。我国每年因其造成的损失超过3亿元[1]。美国国家乳房炎委员会根据乳房和乳汁有无肉眼可见变化,将奶牛乳房炎分为临床型和隐性型两种[2]。据报道,临床型与隐性型发病之比为1∶15～1∶45[3]。隐性乳房炎是病原从乳头表面或乳头管经乳池、乳导管入侵乳腺泡引起的[4],其乳腺组织和乳汁无肉眼可见变化,而乳汁理化性质、成分、体细胞数及产乳量会改变。

1 检测方法

1.1 乳中病原微生物检验

奶牛隐性乳房炎由细菌、真菌、病毒、支原体等非特定病原引起,主要病原有链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌(占病原菌的90%)[5]等,有些病原菌虽存在于乳房内,但不一定致病,因此,病原菌诊断并不可靠,只能根据病原菌的种类、数量初步诊断,而且该法成本高,需要时间长。

1.2 乳酶检验

乳中含多种酶,而许多酶在隐性乳房炎的病理过程中有十分重要的意义,所以乳酶作为奶牛隐形乳房炎的诊断指标已成为国内外研究的热点。

用于奶牛隐性乳房炎检测的酶指标有:髓过氧化物酶(MPO)、N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)、乳过氧化物酶(LP)、过氧化氢酶(CAT)、脂酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)等[6]。如患隐性乳房炎的奶牛乳汁碱性磷酸酶(ALP)、脂酶等的活性高于健康牛乳[7]。国外已有商品化的MPO ELISA试剂盒,NAGase是乳腺上皮细胞破坏的标志。但酶活性受温度、时间、p H、介质中的离子浓度、底物等的影响,决定了酶活性不是很稳定的指标,所以酶活性要成为诊断指标还需进行大量的研究和探索工作。

1.3 乳汁细胞学检验法

体细胞数是奶牛乳房健康状况的一项重要指标,也是牛奶质量的一项重要指标,乳中体细胞由巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、酸性粒细胞和各种乳腺上皮细胞等组成,每毫升牛奶中含有这些细胞的数量即为体细胞数(somatic cellcounts,SCC),其数量受年龄、胎次、泌乳期、季节、个体特征等因素的影响。健康奶牛的体细胞数小于105个/m L,大部分是巨噬细胞和淋巴细胞,患乳房炎时,乳汁中的体细胞数目增加(尤其白细胞数显著增加),非正常升高的体细胞数表明乳腺的炎症及其严重程度[8]。若体细胞数25～30万个,表明乳腺受到感染;超过50万个,表明已发生隐性乳房炎;超过100万个,可能患有临床型乳房炎[9]。

1.4 乳中体细胞直接计数法

1.4.1 显微镜计数法 最早的乳中体细胞直接计数法,是鲜乳涂片后,通过显微镜计数直接计算牛奶中SCC,是体细胞检测中的标准方法,常用于校正其他方法的准确性,但速度较慢。

1.4.2 白细胞分类计数法 白细胞分类计数的刻度管检验法,是根据中性粒细胞占白细胞总数的多少来判定乳房炎的方法。中性粒细胞占白细胞总数的12%～20%定为可疑,20%以上则定为乳房炎[2]。

1.4.3 体细胞自动计数仪 用专门的体细胞自动计数仪来检测乳中的体细胞数。如牛博士系列体细胞检测法,取1滴生奶滴入试纸,再加3滴激活剂,插入检测仪就能读出体细胞准确数据[9]。丹麦福斯公司出品的Foss Matic 5000系列奶牛体细胞测定仪,全自动计算机操作,每小时可检测样品200～500个。Foss Matic 5000的工作原理是让被染色的体细胞通过一个流路系统,此流路非常狭窄,这样被染色的体细胞就会一个个的通过,体细胞的红色光放大就可被光电倍增器作为光脉冲计数出来。

1.4.4 乳中体细胞间接计数法 乳中体细胞间接计数法原理为:乳汁中的体细胞在表面活性剂和碱性物质的作用下,脂类物质乳化,细胞破裂释放出DNA,使乳汁产生沉淀或形成凝块,根据沉淀或形成凝块的强弱,间接判定乳汁体细胞含量。间接体细胞计数国外常用的为加州乳房炎检测法(california mastitis test,CMT),国内有杭州 HMT,兰州LM T,上海SMT,北京BMT、黑龙江 HM T等。北京农业大学以洗衣粉为主要成份配制乳房炎简易诊断液。东北农学院潘军等利用十二烷基磺酸钠加指示剂制成改进CMT试液。此类诊断液种类虽多,但其原理相同,主要成分为阴离子表面活性剂。

1.5 乳酸度检测法

正常鲜牛乳的pH6.2～6.6。乳房炎病牛乳汁的p H上升,呈碱性,碱性的高低反应炎症的程度。

1.5.1 麝香草酚兰检验法(BTB) BTB法有试管法和玻片法两种,操作简单,但检出率较低,因颜色判断易出现较大误差甚至错误[10],特别是泌乳末期奶牛乳汁易出现假阳性。

1.5.2 试纸法 按保存于4℃的乳样1滴直接滴于精密试纸上,按试纸颜色判定乳样酸度。现有奶牛乳房炎试纸和BPB滤纸片。

1.5.3 酸度计检验法 酸度计的基本原理:指示电极(玻璃电极)的电极电位随溶液中氢离子浓度变化而变化,而参比电极(甘汞电极)电极电位不变,所以将电极插入被测溶液后电池电动势即与溶液的p H有关,进而测定其p H。

1.6 乳汁电导率检查法

该法的技术依据是牛血浆与牛奶的渗透压相等,健康奶牛乳汁渗透压约75%由氯化钠和乳糖形成。当奶牛患乳房炎后,乳上皮组织细胞产生乳糖能力下降,乳汁渗透压降低,使血液成分渗进乳汁,特别使乳汁中氯化钠含量增加,使乳汁电导率升高。方海田等研究表明,牛乳电导率的变化与体细胞数呈正相关[11]。

1.7 乳成分检验

隐性乳房炎乳的成分发生变化:例如乳糖含量降低,但乳糖下降程度与炎症严重性不成正相关。乳蛋白量增加,其中血清淀粉样A蛋白(SAA)、结合珠蛋白(Hp)被认为是炎症反应最敏感的指标,陈国灿等通过对奶样中SAA和Hp的检测证明,健康奶牛乳中几乎不含或含量很少以至无法检测到,而在43%隐性乳房炎奶牛乳中均可检测到SAA和Hp[12]。乳房炎乳的乳脂率显著低于健康奶牛乳。

另外,还可用苛性钠凝乳试验、氯化物硝酸银试验等方法进行检验。

2 治疗药物及其使用方法

2.1 乳肿消膏

乳肿消膏是由黄柏、蒲公英、紫花地丁、三棱、莪术等10味中药材制成的复方膏药。方法:挤奶后,将乳房洗净擦干,将药膏加热溶化后均匀涂于患病乳区1～2 mm厚,每个乳区约20 g,每两天给药1次,治愈后为巩固疗效再给药1次。郭斌等临床试验发现该药对奶牛隐性乳房炎治愈率达86.54%。

2.2 乳康宁及盐酸左旋咪唑

李峰等用乳康宁和盐酸左旋咪唑分别治疗隐形乳房炎感染奶牛,方法为:试验1组奶牛拌料饲喂乳康宁,剂量150 g/(d·头),试验2组拌料饲喂盐酸左旋咪唑,剂量2.5g/(d·头),均连喂5 d,结果:乳康宁对隐形乳房炎有效率为92.11%,治愈率为52.63%;盐酸左旋咪唑有效率为58.97%,治愈率为10.25%。

2.3 生殖股神经封闭

奶牛站立保定,在患隐性乳房炎乳房一侧3～4腰椎横突间,距背中线6 cm～7 cm的背最长肌外缘斜进针,注入2%盐酸普鲁卡因溶液20mL。

2.4 消炎增乳散

消炎增乳散主要由蒲公英、金银花、当归、黄芪、蛇床子、木芙蓉花等十几味中草药粉碎而成。王飞等将消炎增乳散拌料喂服,每头200 g/d,连用3 d,结果显示,该药对奶牛隐性乳房炎的治愈率为72.2%。

2.5 炎康注射液

炎康注射液主要成分为蟾酥与甘草。用炎康注射液5 m L加生理盐水20mL稀释,挤奶后注入阳性乳区,2次/d,试验发现对奶牛隐性乳房炎疗效较好。

2.6 生物制剂

生物制剂具有高效、无毒、无残留等优点,是治疗奶牛乳房炎的理想药物。如酶制剂,试验发现其有效率达 72.6%,溶菌酶有效率为85.60%～95.83%,还有细菌素、微生态制剂、乳铁蛋白和乳铁素、细胞因子、疫苗等都有很好的临床作用,在奶牛乳房炎的防治中具有广阔的应用前景。

2.7 其他药物

还可用金银花、知母、连翘、蒲公英、穿心莲、黄芪等中草药防治。或每吨料添加奶牛专用赐力健10～50kg,配合乳房内灌注抗生素。或用小苏打粉50 g,每天 2次内服,连用6 d;补充维生素E和硒[9]。抗生素治疗,周庆新等药敏试验证明奶牛乳房炎病原菌对头孢噻吩钠、诺氟沙星、氨苄西林、羧苄青霉素较敏感。

3 结束语

奶牛隐性乳房炎发病率为38%～62%,患病牛产乳量和乳品质下降,每头牛产奶量平均减少约15%,因此,要加强奶牛隐性乳房炎的防治工作,坚持预防为主,防治结合的方针。其发病主要因饲养管理不当,环境因素不良造成的,还与胎次、泌乳时间、季节等有关,所以要注重加强奶牛饲养管理、重视环境和牛体卫生。

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Detection and Treatment of Bovine Subclinical Mastitis

YU Yan-guo,ZHANG Jin＊

(Gansu Polytechnic Co llege of Animal Husbandry&Eng ineering,Wu wei Gansu 733006,China)

Mastitis is one of the mostharmfuldiseases in dairy production,particularly subclinicalmastitis.Its symptom was not obvious and led to a decline in milk production of dairy cow s and low quality of milk.It also may spread to other cow s,leading to the spread of the disease.So through the changes of physiologicaland biochemicalindicators could test the situation of subclinical mastitis by milk testing.In order to reduce the incidence ofsubclinicalmastitis in dairy cow s and to increase their milk production,this paper summarized the detection methods such as microbiological testing,cytology,enzymology and using Ruzhongxiao plaster,Levamisole hydrochloride,Xiao Yan Zeng Ru pow der,biologicalagents,genitofemoralnerve seal treatment measures for bovine subclinical mastitis.

Dairy Cattle;Subclinical Mastitis;Detection;Treatment

S858.237.2+6

A

1001-9111(2011)04-0044-03

2011-03-28

2011-05-02

余彦国(1980-),男,甘肃天水市人,讲师,主要从事畜牧兽医教学研究。

＊通讯作者:张 瑾(1980-),女,甘肃白银市人,讲师,主要从事兽医药理学教学研究。