科技进展

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加工条件影响猪用冷压油菜饼的营养消化能力

冷压油菜饼是生物柴油生产的副产品，与机械压榨和溶剂萃取相比，冷压制得的饼粕含油量较高。由于当地富产油菜，因此，油菜饼有望成为一种很好的猪饲料。但冷压油菜饼营养品质和抗营养因子的含量还不明确，并且因加工工艺的不同而变化。

本试验对在4种工艺条件下加工的冷压油菜饼进行了评价：在2×2因子设计中，以低速和快速螺旋压榨分别在加热和不加热的条件下生产油菜饼。7头安有回肠瘘管的去势公猪（体重26kg）每天饲喂两次，日粮为维持日粮的2.8倍，在7×7拉丁方设计中，日粮分别含有44%的冷压菜籽饼、机械压榨油菜饼、油菜籽和无氮日粮。试验的目的是测量能量和氨基酸消化率及计算氨基酸标准回肠消化率（standardized ileal digestible， SID）和净能（NE）。每9天的试验期包含5天日粮适应期，2天收粪期和2天回肠消化物收集期，每种日粮获得7个观测值。冷压菜籽饼含41%粗蛋白，16%乙醚提取物，5mmol总硫苷/g（干物质计——DM）。在不考虑交互效应的情况下，冷压菜籽饼表观肠道消化率（apparent ileal digestibility，AID）和总肠道消化率加热的油菜饼比不加热的高出36%（P＜0.05），快速螺旋压榨油菜饼的比低速螺旋压榨的高出8%（P＜0.05），说明加热能提高能量消化率。冷压菜籽饼的能量AID分别比机械压榨和油菜籽高出13%和118%。测试的氨基酸营养成分的SID与是否加热和螺旋压榨转速快慢存在交互效应，但此效应在氨基酸之间并不一致。冷压菜籽饼的消化能（DE）和计算NE分别比机械压榨菜籽饼高出0.73Mcal/kg和0.52Mcal/kg（P=0.001；DM计），但与油菜籽无明显差异。冷压菜籽饼的营养成分如下：DE 4.17Mcal/kg，NE 2.84Mcal/kg，SID Lys 0.87%，SID Met 0.46%，SID Thr 0.79%（均以DM计）。

总之，加工条件对冷压油菜饼的可消化营养成分影响很大。乙醚提取物的含量是冷压油菜饼能量值的最重要决定因素，但残留的硫苷似乎不会破坏营养成分的消化。

译自： Seneviratne RW，Beltranena E，Newkirk RW，et al.Processing conditions affect nutrient digestibility of cold-pressed canola cake for grower pigs.J Anim Sci，2011，89（8）:2452-2461.

山梨酸改善猪的生长性能并调控胰岛素样生长因子系统基因表达

山梨酸（SA）是一种具有共轭双键的多不饱和脂肪酸（PUFA）。共轭脂肪酸如共轭亚油酸（CLA），是一种多功能的具有生物活性的脂肪酸，其具有促进生长的作用。通过测定平均日增重 （ADG，Average daily gain）、 平均日采食量（ADFI，Average daily feed intake）， 血清 IGF-I（胰岛素样生长因子）浓度，肝脏IGF-I的分泌和IGF系统基因的表达考察山梨酸对猪生长性能的影响以明确其作用机理。240头21日龄杜洛克×长白×约克夏断奶仔猪（6.86±0.02kg）随机分为4组，每个组有3个圈，每个圈20头仔猪（10公、10母）。所有仔猪饲养在温控室内（26～28℃），自由饮水和采食。试验为期42天，四个处理组断奶仔猪日粮中添加山梨酸的量分别为0g/kg、0.5g/kg、2g/kg、4g/kg。3个山梨酸添加剂量均提高了仔猪21～42日龄的ADG和重料比（G:F）。日粮中添加4g/kg山梨酸处理组仔猪血浆中的甘油三酯浓度最高。山梨酸增加了血浆总蛋白和球蛋白浓度，并存在剂量效应（0.5g/kg，P ＞ 0.05;1g/kg，P ＜0.05;2g/kg，P ＜0.05）。 值得注意的是最小山梨酸添加剂量降低了血尿氮和糖皮质激素浓度 （P＜0.05）。在猪原代肝脏细胞中山梨酸增加了IGF-I、IGF-II、IGF-I受体 （IGF-IR）、PPARalpha基因mRNA的表达和IGFI的分泌（P＜0.05），但对IGFBP和PPARgamma mRNA的表达无影响。这些结果表明山梨酸通过调节IGF系统基因表达和激素分泌促进仔猪生长。

译自： Luo ZF，Fang XL，Shu G，et al.Sorbic acid improves growth performance and regulates insulin-like growth factor system gene expression in swine.J Anim Sci，2011，89（8）:2356-2364.

ELISA方法用于检测猪饲料中氟苯尼考和甲砜霉素

抗氟苯尼考和甲砜霉素的一个多克隆抗体用来生产竞争ELISA，用于检测猪饲料中的氟苯尼考和甲砜霉素。ELISA对氟苯尼考50%抑制浓度（IC50）为1.02ng/mL。猪饲料药物添加浓度0.05～3.0mg/kg，氟苯尼考和甲砜霉素日间回收率为86.4～118.6%，而两种药物的日内回收率为90.1～126.5%，变异系数（CV）低于15%。从高效液相色谱-串联质谱法获得的结果显示，这个ELISA方法可以作为在猪饲料中检测氟苯尼考和甲砜霉素的便捷方法。

译自：Luo PJ，Jiang WX，Chen X，et al.TECHNICAL NOTE:Development of an ELISA for the determination of florfenicol and thiamphenicol in swine feed.J Anim Sci，2011Jul 1.[Epub ahead of print]

发明一个TaqMan实时PCR检测猪博卡类病毒

目前发现的猪博卡类病毒是细小病毒家族成员，为博卡病毒属，与猪病有密切的关系。几个研究证明猪断奶后多系统衰竭综合征与博卡类病毒感染有关。但是博卡类病毒的感染流行和感染后的疾病仍不清楚。快速、可靠的分子诊断技术的应用，将有助于未来研究这种新病毒。因此，我们开发了一个敏感和特异的TaqMan实时PCR检测博卡类病毒（Pbo-likeV）的NP1基因。可重复检测20拷贝含有NP1基因的重组DNA质粒，检测范围包括六个数量级（102～107拷贝）的动态范围。这个检测与其他动物病毒没有交叉反应。临床发现博卡类病毒在中国猪群中感染率达到44.2% （114/258）。它在病猪中感染率极高（56.1%，101/180），健康猪的感染率相对较低 （16.7%，13/78），P＜0.05。这个检测方法对于诊断和量化猪博卡类病毒是非常灵敏和特异的，为博卡类病毒感染的流行病学和致病研究提供了一个可靠工具。

译自： Li B，Xiao S，Ma J，Liu Y，et al.Development of a novel TaqMan-based real-time PCR assay for the detection of porcine boca-like virus （Pbo-likeV）.Virol J， 2011， 8（1）:357.

典型猪瘟病毒通过调节单核细胞衍生的树突状细胞抑制细胞的成熟未激活NF-κB

典型猪瘟病毒（CSFV）损害宿主的免疫系统，导致猪只发病。树突状细胞（DCs）是最强的免疫反应的发起者。此试验研究了典型猪瘟病毒对猪单核细胞衍生的树突状细胞（Mo-DCs）的影响。结果显示DCs表面标志的表达没有被削弱，例如MHC-II、CD80、CD83和 CD86，但是在感染典型猪瘟病毒后的48小时DCs表达CD172a明显增加。培养的Mo-DCs在不同处理后48小时，通过Q-RT-PCR检测细胞因子表达，细胞因子表达的剖面图被描绘出来。结果暗示CSFV感染明显增加IL-10、TNF-α的mRNA表达，抑制IL-12mRNA表达，而对IFN-α和IFN-γ的表达影响很小。试验证明了CSFV不能激活感染的DCs中的NF-κB，以稳定的DNA连接NF-κB，p65/RelA不能从细胞浆迁移到细胞核，稳定的p65/RelA表达为特征。此外，Western blot分析显示不活动的NF-κB导致了IκBα不能降解。数据表明 CSFV可以在DCs中复制，并且CSFV感染能调节共刺激因子和细胞因子的分泌，下调DCs成熟度，且没有激活NF-κB。试验结果暗示了CSFV逃避宿主先天免疫的机制，提供了一个研究CSFV发病机理的基础。

译自： Chen LJ，Dong XY，Shen HY，et al.Classical swine fever virus suppresses maturation and modulates functions of monocyte-derived dendritic cells without activating nuclear factor kappa B.Res Vet Sci，2011Jul 15.[Epub ahead of print]

日粮中加入海藻提取物和甘草精对猪免疫的影响

在猪业生产中，日粮中加入抗生素作为刺激生长抵御疾病的手段是常用的方法。由于公众担心食品安全和药物残留问题，可以用天然的植物提取物如海藻提取物和甘草精代替抗生素。

在这个研究中，我们评估了猪日粮中添加海藻提取物和甘草精对于提高猪的免疫力的作用。每组动物（一组8只）在42天和49天时被致敏，免疫球蛋白和细胞因子的表达通过ELISA和RT-PCR检测。结果唾液中的IgA与对照组相比增加了5倍（56天）。海藻提取物处理组延迟过敏反应，使IgG的量增加1.8～2.0倍。另外，在甘草精处理组50天检测到唾液中IgA含量提高两倍，在51天检测到唾液中IgA含量提高五倍，并且在甘草精处理组51天观察到肿瘤坏死因子α信使mRNA低水平表达（约1/25）。

结论是用天然植物提取物代替抗生素添加到饲料中可提高猪只免疫力。

译自： Katayama M，Fukuda T，Okamura T，et al.Effect of dietary addition of seaweed and licorice on the immune performance of pigs.Anim Sci J， 2011， 82（2）:274-281.

基因芯片和细胞因子分析猪腹泻病病例

本研究比较了19个患腹泻病的猪（这些猪有长期感染胞内劳森菌的历史）和9个健康猪的肠道组织中、血清中细胞因子表达变化。增生性肠病（PE）以腹泻、生长发育不良、血痢和突然死亡为特征，但是该病的免疫病理学还不清楚。通过组织病理学、PCR和血清抗体检测证实胞内劳森菌和猪圆环病毒2型（PCV2）同时存在于肠道组织。血清中IL-1β、IL-6、 IL-10、 IFN-α、 IFN-γ、 TNF-α 和 TGF-β 通过免疫方法测定，肠道细胞因子和IL-12p40mRNA表达用qPCR检测。取猪的肠腺瘤样本（n=2）、增生性出血性肠病或猪痢疾样本（n=2）、对照样本 （n=2）进行全基因组基因芯片分析。PE临床症状并不是总支持随后的分析，肠道组织中存在PCV2可能对于增加肠道样本中的IFN-γ的mRNA表达有一定的作用。芯片分析中限性基因表达以及在血清和肠中细胞因子受限表达，揭示了在最初感染胞内劳森菌的猪体内免疫反应激活不良。在两头猪肠道的突起黏膜增生中检测到编码胰岛素样生长因子结合蛋白3（IGFBP-3）的基因表达被上调。

译自： Jacobson M，Andersson M，Lindberg R，et al.Microarray and cytokine analyses of field cases of pigs with diarrhoea.Vet Microbiol，2011Jun 15.[Epub ahead of print]