泰安宁颗粒中芍药苷含量测定

2011-08-07陈新江浙江省临安市中医院临安311300陈丹菲浙江省中医药研究所

浙江中西医结合杂志 2011年11期

陈新江浙江省临安市中医院临安 311300陈丹菲浙江省中医药研究所

泰安宁颗粒系由地黄、合欢皮、赤芍等中药经提取加工制成的颗粒剂，具有滋肾养阴、平肝宁心的功效，用于女性围绝经期综合征。本文建立了高效液相色谱法测定颗粒中芍药苷含量的方法，方法简便快速，重现性及稳定性均较好，为泰安宁颗粒制剂的质量控制提供试验数据。

1 仪器与试剂

Agilentl100高效液相色谱仪；色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5μm，北京迪马公司）；KQ—100DB型数控超声波清洗器（昆山市超声有限公司）；0.45μm微孔滤膜（上海医药工业研究院）；乙腈（色谱纯），甲醇（分析纯）、磷酸（分析纯）；芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号0736-200116）；泰安宁颗粒（批号：100301、100505、100508、100511）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm，5m）；流动相：乙腈—0.01%磷酸溶液（15∶85）；检测波长：230nm；流速：1mL/min；柱温：40℃；保留时间：约12min；理论塔板数：不低于3 000。在此条件下，芍药苷与其他组分达到基线分离，阴性无干扰。

2.2 对照品溶液制备精密称取真空干燥至恒重的芍药苷对照品适量，加甲醇溶解，制成每1mL含50μg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备取本品装量差异项下的内容物，混匀，精密称取0.5g，置50mL量瓶中，加甲醇约45mL，超声提取20min，取出，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，静置，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

2.4 空白试验取缺赤芍阴性样品0.5g，照样品含量测定项下提取，按上述色谱条件分析。与对照品相应的位置上，无明显其它峰出现。结果证明阴性样品对该试验无干扰。

2.5 线性范围考察精密称取芍药苷对照品7.7mg，加甲醇适量溶解并定容至25mL，精密吸取上述溶液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL，用甲醇稀释至10mL，摇匀，每一浓度标样进样20μL，以峰面积积分值为纵坐标，芍药苷对照品为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=939747x+43424，r=0.99998。结果表明芍药苷在0.308～3.696μg之间呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验取同一对照品溶液重复进样测定5次，芍药苷平均峰面积为1201989，RSD=0.74%（n=5），结果表明精密度良好。

2.7 重现性试验按2.3项下的方法对同一批样品（100301）进行6次平行测定，结果芍药苷平均含量为 3.614mg/g，RSD=1.26%（n=6）。

2.8 稳定性试验取样品（100301）适量，按2.3项下的方法制成供试品溶液，放置 0、2、4、8、12、24h，分别进行测定，结果芍药苷平均含量为3.626mg/g，RSD=0.97%（n=6），表明样品溶液放置24h内稳定。

2.9 加样回收率试验精密称取已知含量的样品（100301）6份，分别添加芍药苷对照品（浓度为0.81mg/mL）1.0mL，按样品测定方法制成供试品溶液，依法进行测定，计算回收率，结果见表1。