甲硝唑氧氟沙星滴鼻液的制备与质量控制

2011-08-06王柏桉重庆市涪陵中心医院药剂科重庆市408000

中国药房 2011年37期

李容，王柏桉（重庆市涪陵中心医院药剂科，重庆市 408000）

甲硝唑系广谱抗厌氧菌药物，杀菌力强；氧氟沙星系广谱、高效、低毒的喹诺酮类抗菌药物，对多种革兰阳性和阴性致病菌具有较强的杀灭作用[1]。二者是2种不同类型抗菌药物，合用可扩大抗菌谱，提高疗效。笔者以甲硝唑和氧氟沙星为主药，研制了甲硝唑氧氟沙星滴鼻液（该制剂正处于研制中，目前尚未取得制剂许可证），用于治疗急慢性鼻炎、鼻窦炎、副鼻窦炎等疾病，并建立了以双波长分光光度法[2]测定甲硝唑和氧氟沙星含量的质量控制方法。现报道如下。

1 仪器与试药

UV-2401型紫外分光光度计（日本岛津公司）；TG328B型电光分析天平（上海天平仪器厂）。

甲硝唑（原料药及对照品，广西河池化工医药股份有限公司，批号：050604，纯度：99.76%）；氧氟沙星（原料药及对照品，成都药业股份有限公司，批号：060903，纯度：99.85%）；甲硝唑氧氟沙星滴鼻液（自制，批号分别为：100723、100916、101102，规格：每支10 mL，其中甲硝唑含量为：0.5%，氧氟沙星含量为：0.3%）。

2 方法与结果

2.1 处方与制备

处方：甲硝唑5.0 g，氧氟沙星3.0 g，氯化钠8.0 g，1 mol·L－1醋酸溶液3.5 mL，纯化水加至1 000 mL。

制备：称取处方量甲硝唑和氧氟沙星，置于烧杯中，加入1 mol·L－1醋酸溶液调成糊状，加入800 mL沸水搅拌溶解，趁热加入氯化钠搅拌溶解，放冷过滤，由滤器加纯化水至全量，于100℃、30 min流通蒸气灭菌，摇匀分装即得。

2.2 性状

本品为微黄色澄明溶液。

2.3 鉴别

甲硝唑：取本品适量（约相当于甲硝唑10 mg），加氢氧化钠试液2 mL，温热，即得紫红色溶液；滴加稀盐酸使成酸性后即变成黄色，再滴加过量氢氧化钠试液则变成橙红色。

氧氟沙星：取本品10 mL，置于水浴上蒸干，取残渣适量，加丙醇约30 mg与醋酐约10滴，在水浴上加热5～10 min，溶液即显红棕色。

2.4 检查

2.4.1 pH值。应为4.5～6.0，结果符合规定。

2.4.2 装量。按《中国药典》2010年版规定[3]，平均装量不少于10 mL，每只滴鼻液装量不少于9.3 mL，结果符合规定。

2.4.3 微生物限度。按《中国药典》2010年版规定[3]，取本品，依法检查，结果符合规定。

2.5 含量测定

2.5.1 测定波长的选择。取甲硝唑和氧氟沙星适量分别溶解于0.1 mol·L－1盐酸溶液中，以0.1 mol·L－1盐酸溶液为溶剂，在220～350 nm波长之间扫描。结果，甲硝唑在275.8 nm波长处有最大吸收，氧氟沙星的等吸收参比波长为301.7 nm；氧氟沙星在293.4 nm波长处有最大吸收，甲硝唑的等吸收参比波长为252.7 nm。另取处方中的辅料制备成溶液扫描，结果辅料不干扰主成分的测定。故选定甲硝唑测定波长为275.8 nm，参比波长为301.7 nm；氧氟沙星测定波长为293.4 nm，参比波长为252.7 nm。紫外吸收光谱见图1。

图1 紫外吸收光谱图Fig 1 UV absorption spectrum

2.5.2 标准曲线的制备。精密称取经105℃干燥至恒重的甲硝唑100 mg和氧氟沙星50 mg，分别置于100 mL容量瓶中，用0.1 mol·L－1盐酸溶液溶解并稀释至刻度。分别精密量取上述溶液0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mL，置于100 mL容量瓶中，加入0.1 mol·L－1盐酸溶液至刻度。分别在275.8、301.7、293.4、252.7 nm波长处测定吸光度。根据公式：甲硝唑ΔA1＝A275.8nm－A301.7nm，氧氟沙星ΔA2＝A293.4nm－A252.7nm，以浓度（c）为纵坐标，以ΔA为横坐标进行线性回归，得回归方程：甲硝唑c1＝109.78ΔA1－0.534 6（r＝0.999 9）；氧氟沙星c2＝328.64ΔA2－0.843 7（r＝0.999 9）。结果表明，甲硝唑、氧氟沙星检测浓度线性范围分别为4.008～20.040、2.028～10.140 μg·mL－1。

2.5.3 加样回收率试验。分别精密称取经105℃干燥至恒重的甲硝唑和氧氟沙星适量，置于500 mL容量瓶中，用0.1 mol·L－1盐酸溶液溶解并稀释至刻度，分别量取1、2、3 mL置于100 mL容量瓶中，再分别加入已知含量的甲硝唑氧氟沙星滴鼻液适量，按“2.5.2”项下方法操作，使其含甲硝唑浓度约为10.0、13.0、16.0 μg·mL－1，氧氟沙星浓度约为5.8、7.4、9.0 μg·mL－1，每份平行操作2次，以0.1 mol·L－1盐酸溶液为空白，在275.8、301.7、293.4、252.7 nm波长处测定吸光度，代入回归方程，计算回收率，结果见表1。

2.5.4 稳定性试验。取甲硝唑浓度为8.016 μg·mL－1、氧氟沙星浓度为4.056 μg·mL－1的溶液，于0、2、4、6 h时测定吸光度，计算甲硝唑和氧氟沙星的ΔA平均值分别为0.077 7、0.014 9，RSD为0.26%和0.35%（n＝4），表明溶液至少可稳定6 h。

2.5.5 精密度试验[4]。按处方称取各辅料及不同量的甲硝唑和氧氟沙星，分别制成低、中、高3种浓度的甲硝唑氧氟沙星滴鼻液，其中甲硝唑浓度为8.166、10.082、12.006 μg·mL－1，氧氟沙星的浓度为4.958、5.926、7.468 μg·mL－1。于同日内测定5次，计算日内RSD，结果甲硝唑RSD分别为0.29%、0.37%、0.46%（n＝5），氧氟沙星RSD分别为0.37%、0.45%、0.43%（n＝5）。每日测定1次，连续测定5 d，计算日间RSD，结果甲硝唑RSD分别为0.39%、0.49%、0.62%（n＝5），氧氟沙星RSD分别为0.87%、0.73%、0.65%（n＝5）。

2.5.6 样品含量测定。精密量取甲硝唑氧氟沙星滴鼻液2 mL，置于100 mL容量瓶中，以0.1 mol·L－1盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取10 mL置于100 mL容量瓶中，以0.1 mol·L－1盐酸溶液稀释至刻度。以0.1 mol·L－1盐酸溶液为空白，在275.8、301.7、293.4、252.7 nm 波长处测定吸光度，计算ΔA1、ΔA2，并代入各自的回归方程求出含量。结果批号为100723、100916、101102的样品中甲硝唑含量分别为标示量的98.58%、102.62%、100.75%（n＝3），氧氟沙星含量分别为标示量的99.65%、100.59%、99.16%（n＝3）。