赣州地区303例慢性肝病患者HBV基因型别检测及意义

胡 蓉，刘文群 ，陈晓红，许庆林，何显龙，徐惠荣

(1南昌大学生命科学学院，南昌 330000;2赣南医学院第一附属医院;3赣州市第二人民医院)

据报道，HBV不同基因型的结构差异可影响慢性肝病患者的病情发展、转归、HBV标志物表达及抗病毒治疗效果［1，2］，而 HBV 基因型又具有一定的地域分布特征［3］。2006年10月～2009年3月，我们对赣州地区303例慢性肝病患者进行了HBV基因型别检测，并同时检测其乙肝血清标志物、肝功能等指标，旨在了解本地区慢性肝病患者HBV主要基因型及临床特点，为慢性肝病的防治提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 303例慢性肝病患者，男205例，女98例;年龄 11～74(38.2±11.6)岁。均符合2000年《病毒性肝炎防治方案》［4］中诊断标准，其中乙肝携带者59例，慢性乙肝157例，肝硬化62例，肝癌(病理证实)25例。所有病例HBV-DNA均为阳性，排除其他肝炎病毒感染、药物性肝损害、酒精性肝病、自身免疫性肝病等肝脏疾病。

1.2 HBV基因分型检测 留取晨空腹静脉血 5 ml，3 000 r/min 离心 10 min，吸取 1 ～2 ml血清于－70℃冰箱保存。采用PCR-反向点杂交法检测HBV基因分型，仪器为ABI 9700，试剂盒由中山达安生物技术有限公司提供，严格按标准操作规程及试剂说明书操作。

1.3 HBeAg、HBV-DNA及肝功指标检测 采集外周血3 ml，3 000 r/min离心10 min分离血清。检测以下指标:①HBeAg。采用 ELISA法，仪器为安图2010酶标仪，夏门新创公司试剂。②HBV-DNA。采用PCR-荧光探针法，仪器为ABI 9700，达安基因试剂。以HBV-DNA载量≥Ig5为高载量，＜Ig5为低载量。③肝功指标。采用HITACHI 7600型全自动生化分析仪检测ALT、AST、总胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)水平，严格按说明书操作。

1.4 统计学方法 采用SPSS14.0统计软件，两样本均数间比较行单因素方差分析，率的比较采用χ2检验，两独立样本比较采用t检验。检验水准α=0.05。

2 结果

303例慢性肝病患者HBV基因分型为B型249例(82.2%)，C 型39 例(12.9%)，B/C 混合型 10 例(3.3%)，D 型 3 例(1.0%)，未分型 2 例(0.6%)，B基因型所占的比例显著高于C基因型(P＜0.000 1)。HBeAg阳性141例，其中B基因型114例，C基因型21例。B、C基因型 HBeAg阳性率分别为45.8%(114/249)、53.8%(21/39)，P ＞0.05。B、C 基因型HBV-DNA高载量率分别为 41.4%(103/249)、87.2%(34/39)，P ＜0.01。B 型、C 型肝功指标水平比较见表1。

表1 B型、C型肝功指标水平比较(±s)

表1 B型、C型肝功指标水平比较(±s)

注:与 B 型比较，*P ＜0.05

型别 n ALT(U/L) AST(U/L) TBA(μmol/L) TBIL(μmol/L) ALB(g/L)B 型 249 248.66 ±125.33 227.52 ±118.18 108.34 ± 66.21 46.12 ±26.35 36.26 ±9.14 C 型 39 380.84 ±148.60* 436.28 ±154.34* 212.23 ±112.76* 90.23 ±54.69*30.24 ±8.46

3 讨论

据报道，我国乙型肝炎患病率呈逐年上升趋势，且目前尚无有效治疗手段。关于HBV基因型临床差异研究的报道不一。较早的研究认为HBV基因型可能与HBeAg血清转换、肝脏病变程度及抗病毒治疗应答有关。目前，HBV已分为A～H 8个基因型，且HBV基因型呈地域性分布。我国发现有B、C、D基因型，偶有 A型［5］。其中以 B型和 C型为主，北方主要是 C型;南方多为B型，C型次之［6］。本组资料显示，303例慢性肝病患者中HBV的B、C、D及B/C混合基因型均存在，且以B型和C型为主，符合赣州地区处于南方的地理特点。但B与C基因型的分布频率与徐龙等［7］研究江西地区B基因型(73.1%)及 C基因型(10.4%)的分布频率有较大差异，可能原因为徐龙等学者研究的病例主要来自南昌地区，且南昌地区流动人口较赣州地区大，而赣南处于闽、粤、赣交界处，为客家人群聚居地，主要人群为明中叶后至清前期由闽粤赣三省交界地迁出的移民，两地人群类别存在差异。

研究发现，B基因型易在疾病早期出现前C区/C启动子变异，常出现 HBeAg血清转换，表现为HBeAg阴性［8］，C基因型则因病毒复制活跃易形成持续的病毒血症，不易发生抗原e系统的血清转换。本研究发现，B、C基因型HBeAg阳性率无明显差异，且C基因型HBV-DNA高载量率明显高于B型，提示C基因型HBV复制更为活跃，有更强的致病力。可能原因为C基因型病毒治疗过程中易产生变异株，变异后的病毒可逃避免疫压力，但不影响病毒在宿主体内复制效率，因此形成顽固性HBV感染及更严重的肝脏炎症和纤维化［9］，抗病毒治疗效果差［10］。另外我们发现，除ALB外，C基因型余四种肝功指标均明显高于B基因型。表明C基因型HBV感染病例肝功能损害更严重。

综上所述，赣州地区HBV感染以B、C基因型为主，尤以B基因型居高;C基因型更易发展为严重肝病，抗病毒治疗效果差。此为慢性肝病的防治提供了理论依据。

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