小儿肾母细胞瘤组织中survivin蛋白、VEGF的表达变化及意义

宫相翠

(青岛市妇女儿童医疗保健中心，山东青岛266011)

肾母细胞瘤是婴幼儿时期最常见的恶性实体肿瘤之一，由肾源性上皮和间质组成。survivin蛋白是凋亡抑制蛋白因子家族的成员［1］。血管内皮生长因子(VEGF)是目前已知的促血管生成因子中作用最强，特异性最高的促有丝分裂原［2］。2008年1月～2010年12月，我们采用免疫组化法检测肾母细胞瘤组织中survivin蛋白、VEGF，探讨其与肾母细胞瘤临床病理指标的关系，为病情及预后评估提供依据。

1 资料与方法

1．1 临床资料 36例肾母细胞瘤组织均为在我院手术切除并经病理证实的病理存档标本。36例患儿中男17例，女19例;年龄5个月～8岁。根据美国肾母细胞瘤研究组标准［3］，预后良好组织型24例，预后不良组织型12例;按美国 Wilms'瘤研究组(NWTS)临床分期［4］，Ⅰ期8例、Ⅱ期12例、Ⅲ期11例、Ⅳ期5例;有淋巴结转移21例，无淋巴结转移15例。另取20例瘤旁正常肾组织标本作为对照。所有患儿术前均未行放化疗及免疫治疗。所有标本均采用10%甲醛液固定，石蜡包埋，4 μm连续切片。

1．2 survivin蛋白及VEGF检测方法 ①主要试剂:兔抗人survivin多克隆抗体、兔抗人VEGF免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。②染色方法:采用免疫组化SP法，按试剂盒说明书操作。③结果判定:根据文献［1，2］，均观察 5 ～10 个高倍视野(×200)，以细胞质或细胞膜呈棕黄或棕褐色者为survivin蛋白、VEGF阳性细胞，其中阳性细胞数＜10%为VEGF阴性表达，≥10%为VEGF阳性表达。survivin蛋白表达根据着色深浅及阳性细胞数判定:无阳性染色为(－)，细胞着色较浅、阳性细胞数＜25%为+，着色较深、阳性细胞数25% ～50%为++，着色深、阳性细胞数＞50%为+++;将－、+视为阴性表达，++、+++视为阳性表达。

1．3 统计学方法 采用SPSS12．0统计软件，数据比较用 χ2检验，α =0．05。

2 结果

肾母细胞瘤组织中survivin蛋白及VEGF阳性表达率分别是66．6%和80．5%，均明显高于瘤旁正常肾组织的0和5%(P均＜0．05)。survivin蛋白及VEGF表达与肾母细胞瘤临床分期、预后组织型、淋巴结转移有关(P均＜0．05)。详见表1。

表1 survivin蛋白、VEGF表达与肾母细胞瘤临床病理参数的关系

3 讨论

肾母细胞瘤是上皮细胞和间质组织组成的恶性混合瘤，它起源于未分化的后肾胚胎，是一种生长迅速的实体恶性肿瘤。研究发现［2，5］有很多因子均具有促进肿瘤新生的作用，其中VEGF是迄今为止发现的作用最强的促血管形成因子，且肿瘤细胞可通过自身分泌产生，直接作用于血管内皮细胞并刺激内皮细胞有丝分裂，促进新生血管的形成和生长;VEGF还能增强血管内皮细胞的通透性，导致纤维蛋白原的沉积和纤维凝胶的聚集，促进新生血管生长。survivin蛋白是目前发现的惟一具有抗凋亡及促血管生成作用的细胞因子，可对抗G2～M期细胞凋亡的诱导，抑制 Fas介导的细胞凋亡［6］。因此，survivin可能是新生血管形成过程中生长因子诱导的保护性基因，正常情况下维持血管内皮细胞的增殖，但在病理情况下如恶性肿瘤中survivin呈过表达，且与肿瘤侵袭性及预后有关［7］。

本研究结果显示，肾母细胞瘤组织中survivin蛋白、VEGF表达明显高于癌旁正常肾组织(P＜0．05)，且Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移的肾母细胞瘤患儿，其瘤组织中survivin蛋白、VEGF表达明显高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移者(P均 ＜0．05)。说明survivin蛋白、VEGF表达上调在肾母细胞瘤发生发展过程中起着非常重要的作用。预后不良型肾母细胞瘤分化差、生长快，具有转移早、易复发等特点。本研究发现，预后不良组织型的肾母细胞瘤组织中survivin蛋白、VEGF表达明显高于预后良好组织型者(P＜0．05)，说明survivin蛋白、VEGF表达上调可以作为肾母细胞瘤分化差的标志，可以评估病情并预测预后。

［1］姜忠，孙永峰，黄绪峰，等．survivin蛋白在肾母细胞瘤的表达及意义［J］．山东医药，2006，46(10):16-17．

［2］崔清波，杨旗，孟祥喜．儿童肾母细胞瘤中VEGF表达水平的研究［J］．实用肿瘤学杂志，2005，19(2):113-114．

［3］余亚雄．小儿外科学［M］．北京:人民卫生出版社，1997:41-44．

［4］高解春，王耀平．现代小儿肿瘤学［M］．上海:复旦大学出版社，2003:524-529．

［5］张谦，单岩，陈清江．血管内皮生长因子在预测肾母细胞瘤转移中的作用［J］．中华儿科杂志，2005，43(3):213-214．

［6］ Miller MA，Karacay B，Breslow NE，et al．Prognostic value of quantifying apoptosisfactor expression infavorable histology Wilmstumors［J］．J Pediatr Hematol Oncol，2005，27(1):11-14．

［7］姜忠，杨传民，江布先．凋亡相关蛋白survivin、Fas在肾母细胞瘤中的表达及其临床意义［J］．实用儿科临床杂志，2006，21(11):668-669．