日粮中不同铜源及添加水平对产蛋鸡生产性能及蛋品质的影响

武书庚 齐广海 中国农业科学院饲料研究所，北京100081

高铜（硫酸铜）能降低肉鸡血浆和肌肉中胆固醇含量(Bakalli等，1995)。其它动物上的研究也表明，缺铜引起的高胆固醇血症是一个与动物种类无关的普遍现象，缺铜时胆固醇合成以及组织沉积均增加。根据前期试验结果，铜对降低鸡蛋中胆固醇含量作用显著，CuCit比同水平CuSO4作用效果明显。铜作为生物抗氧化剂直接或间接参与活性氧的清除，铜的抗氧化作用主要通过对机体抗氧化酶的影响、颉抗其它微量元素和有害物质的毒性以及与其它抗氧化物质的协同来实现，铜对蛋鸡机体抗氧化性能的影响，需要进一步研究。前期研究表明（齐广海等，2000），产蛋鸡日粮中铜的适宜添加量为6～30mg/kg，此铜的适宜添加量范围比较宽，试验动物周龄较大（78周龄产蛋鸡）。不同铜源及添加量在机体内的生化作用是否与产蛋鸡周龄有关，需要进一步探讨。

1 材料与方法

1.1 铜源

硫酸铜（纯度98%，含铜25%）。柠檬酸铜（分子量360.21，纯度98%，含柠檬酸63.5%，含铜34.5%，中国农业科学院饲料研究所添加剂室提供）。硫酸铜和柠檬酸铜的理化指标见表1。

1.2 基础日粮

本试验采用玉米－豆粕-棉粕-菜粕型蛋鸡日粮（粉料），基础日粮组成及营养价值见表2。

1.3 试验动物及试验设计

试验选用体重和产蛋率相近 （产蛋率大于90%）的海兰褐23周龄产蛋鸡，采用随机单位组设计，试验共设11个处理（表3），每个处理采食一种试验日粮。每个处理4个重复，每个重复9只鸡，共用鸡396只，预试期1周，试验期8周。

表1 硫酸铜和柠檬酸铜的理化特性＊Table 1 The characteristic of cupric sulphate and cupric citrate

表2 基础日粮组成及营养素含量Table 2 The composition and nutrient content of the basal diet

1.每 kg 日粮中提供（mg）：Zn，20；Fe，40；Mn，30；I，0.175；Se，0.075。

2.每 kg日粮中提供：维生素 A 10800IU；维生素D32160 IU；维生素K31.0mg；维生素E 4.6mg；维生素 B10.4mg；维生素 B25mg；维生素B126mg；泛酸钙 5mg；烟酸 7mg；叶酸 0.1mg。

3.实测值。

表3 试验处理的设置Table 3 Aarrangement of experimental treatments

1.4 饲养管理

采用密闭式鸡舍，二层立体笼养，同一排相连的9个鸡笼（30×25cm）作为一个重复单位，每笼1只鸡。同一处理各重复均匀分布于鸡舍，以消除位置效应。试验期间鸡舍温度变化范围为15℃～30℃，相对湿度变化范围为50%～80%。每天恒定光照为16小时，采用自动照明控制系统，在白天自然光照不足的情况下补充相应光照，光照强度为14LX。饲喂干粉料，自由采食、自由饮水。按常规防疫程序进行防疫和鸡舍消毒。

1.5 样品的采集与制备

试验开始时，每个重复随机取两只鸡进行称重；每日以重复为单位，记录产蛋数、产蛋量、软破蛋数、死亡淘汰数，每周以重复为单位，统计一次耗料量、产蛋率，计算平均日采食量，以制定下一周的喂料量。分别在试验第4周和第8周统计耗料、产蛋率、产蛋量、料蛋比，同时，以重复为单位取鸡蛋3枚，用于测定鸡蛋品质有关指标，采用自制蛋黄分离器，取3个鸡蛋的鲜蛋黄，混匀，-16℃冷藏备用。试验结束时每个重复随机取2只鸡，称重后心脏采血，离心制备血浆（肝素钠抗凝），冷藏备用。

1.6 测定指标与方法

1.6.1 生产性能指标：根据饲养试验纪录整理蛋料比、产蛋率、耗料量等。

1.6.2 鸡蛋品质指标：采用日本富士坪公司生产的系列鸡蛋品质测定仪，测定鸡蛋品质（哈夫单位、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋壳重、蛋形指数）。

1.6.3 蛋黄胆固醇：鸡蛋胆固醇用蛋黄胆固醇浓度（mg/g）和鸡蛋胆固醇含量（mg/枚）两个指标来表示。蛋黄胆固醇浓度即指每g蛋黄中胆固醇的含量，鸡蛋胆固醇含量是指每枚鸡蛋中胆固醇的含量。本试验采用目前国际上较为通用的气相色谱法，以5α-胆固醇（Sigma公司）为内标。样品预处理参照Jiang（1991），测定条件以中华人民共和国国家标准（GB 9695.24-90）胆固醇测定法为依据，在提取技术方面加以改进。

测定原理：组织中的脂类经皂化后，胆固醇作为不皂化物被提取出来，并与一定的内标物混合后一起注入气相色谱柱，求出胆固醇与内标物的峰面积比，根据工作曲线计算胆固醇的重量，以求得组织中胆固醇的含量。

不皂化物的提取：称取0.50～1.00g脂肪，置于10ml容量瓶中用氯仿定容并摇匀。准确量取该试液1～5ml置于 25ml具塞试管中，准确加入 0.5～1ml内标物溶液，然后将氯仿蒸干。加入1mol/l氢氧化钾溶液5ml，装上冷凝管，在85℃～95℃水浴上缓缓皂化1h，取下冷却至室温，全部移入50ml分液漏斗中，用水10ml洗具塞试管，洗液并入分液漏斗，加乙醚10ml轻轻振摇，静置分层后，将水相放入原试管中，加乙醚10ml振摇，待分层后，将乙醚移入分液漏斗内。再用10ml乙醚提取一次，此时分液漏斗中共有溶液30ml。用水2～3ml洗涤乙醚液，分层后，弃去水相，用无水硫酸钠10g干燥后，将乙醚移入另一具塞试管中，通入N2干后，加入乙醇1ml。

色谱分离条件选择：对胆固醇峰要求其理论塔板不少于1600。胆固醇与菜油醇二者峰分辨率不小于2.2，胆固醇的保留时间在8～12min之间；胆固醇峰强度为满量程的0.25～0.5。

色谱柱：HP-5毛细管柱，柱长30m，内径0.32mm。初始柱温250℃，保持8min，然后线性升温至260℃（1℃/min）。FID检测器，检测器温度300℃，衰减为5。载气为高纯N2，流速41.3ml/min，空气流速 397ml/min，分流比 74∶1。

1.7 数据处理与统计

数据用SAS 6.12程序包的GLM模型对各指标进行双因素方差分析，采用LSD（最小显著极差）法对进行多重比较。

2 结果与分析

2.1 CuSO4和CuCit对产蛋鸡生产性能的影响

产蛋率。试验鸡产蛋率在91%到96%之间变化（表4），所有铜添加组的产蛋率和料蛋比均高于对照组，差异显著 （p＜0.05）。6，15和 60mg/kg的CuSO4处理的产蛋率显著高于对照组（p＜0.05），其中，6mg/kg铜的产蛋率与对照组差异极显著 （p＜0.01）；各CuCit处理的产蛋率极显著高于对照组（P＜0.01），但 CuCit处理组之间差异不显著 （p＞0.05）。随铜添加量的增加，产蛋率有下降趋势，尤其是125mg/kg处理组，总体上比6mg/kg处理下降了1.7个百分点。所有CuCit处理的产蛋率均高于同水平CuSO4处理，但差异不显著。

料蛋比。所有铜添加组的料蛋比均极显著低于对照组（p=0.0001）；60mg/kg CuSO4处理组的料蛋比最低，水平间差异不显著 （p＞0.05）；6mg/kg CuCit处理组的料蛋比最低，水平之间差异不显著（p＞0.05）；总体上 CuCit与 CuSO4处理之间无显著差异（p=0.8131），但 CuCit处理组之间变异小，曲线平稳。

体增重。产蛋鸡体增重(g)随日粮铜添加量的增加而变化的曲线呈抛物线。两种铜源6mg/kg处理组低于15～30mg/kg处理组，但高于其他组；15～30mg/kg处理组达波峰，与其他处理组差异显著（p＜0.05）；两种铜源均在15mg/kg处理的体增重最大，与其他处理差异极显著（p＜0.01）；60mg/kg 高于对照和125mg/kg处理组，但显著低于6～30mg/kg处理组（p＜0.05）；125mg/kg处理组的体增重与对照组和60mg/kg处理组无差异，与6，15和30mg/kg处理差异极显著(p＜0.01)，说明125mg/kg处理组已影响到产蛋鸡生产性能。CuCit处理组的体增重曲线平滑，所有处理组均好于同水平CuSO4，但差异不显著（p=0.0870）。