节节草对四氧嘧啶模型小鼠降血糖作用研究﹡
2011-06-05潘得云杨和锦
梁 宁 潘得云 杨和锦
广西中医学院,广西南宁 530001
节节草别名笔筒草、通气草等,木贼科木贼属笔筒草的全草,性微寒,味甘苦,有祛风清热、除湿利尿等功效,可治疗目赤肿痛、翳膜遮睛、淋浊、便血、尿血等,近年药理研究发现该科植物具有抗心肌缺血,降血压、血脂、血糖,镇痛及抗肿瘤等作用[1]。但节节草降血糖作用的研究未见报道,为此笔者进行了研究。
1 材料与方法
1.1 动物和试剂、药品
清洁级昆明种小鼠。节节草采自广西南宁老虎岭并经鉴定;格列喹酮片(天津药物研究院,H10970124);二甲双胍片(北京京丰制药有限公司,H11021518);血糖检测试剂盒(四川省迈克科技有限责任公司)。
1.2 方法
将节节草粉碎,用10倍体积65%乙醇回流2 h,过滤,回收乙醇,浓缩至4 g/mL,4℃冷藏。
1.2.1 节节草醇提物急性毒性实验[2]取18~22 g昆明种小鼠20只随机分组,各10只(雌雄各半)。禁食供水12 h,灌胃给药,40 mL/kg,给药总量为240 g/kg。给药后观察14 d内小鼠的外观行为、进食排泄等情况。第14天称重,计算增重率并颈椎脱臼处死小鼠,观察各脏器的病变情况,并测量最大耐受量(MTD)。
1.2.2 节节草醇提物对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的影响 80只雄性小鼠禁食供水12 h后,尾静脉注射四氧嘧啶(60 mg/kg)。末次给药后72 h,眼球静脉丛取血,葡萄糖氧化酶法测FPG。FPG>11 mmol/L并多饮、多食、多尿则造模成功。取造模成功的小鼠60只,随机分为模型组、阳性对照组(二甲双胍0.6 g/kg)、节节草大、中、小剂量组,各10只。每天灌胃给药1次,连续3 周。模型组灌胃等容积蒸馏水。
1.2.3 节节草醇提物对正常小鼠血糖的影响 50只(20±2)g雄性小鼠按体重随机分为空白对照组,格列喹酮组(0.15 g/kg)和节节草大(40 g/kg)、中(20 g/kg)、小(10 g/kg)剂量组,各 10只。格列喹酮组和节节草各给药组每日灌胃1次,空白对照组给予等体积蒸馏水,给药容量为20 mL/kg体重,连续7 d。末次给药前小鼠禁食供水12 h,末次给药1 h后小鼠静脉丛取血,离心3 000 rpm×10 min,分离血清,测血糖。
1.3 统计学处理
用SPSS13.0统计软件进行x2检验和t检验。
2 结果
2.1 节节草醇提物MTD>5 g/kg对小鼠的影响
节节草醇提物MTD>5 g/kg(相当于生药材240 g/kg)。给药后14 d内小鼠外观、行为、进食排泄均未见异常,无死亡;给药后各小鼠体重增长正常,雌性小鼠增重(9.15±1.73)g,增重率为 46.5%;雄性小鼠增重(11.21±1.54)g,增重率为51.2%;14 d后处死小鼠,各脏器病变情况未见异常。
2.2 节节草各剂量组对糖尿病小鼠血糖的影响
节节草各剂量组均能降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖。与模型组比,大、中剂量组差异有高度统计学意义(P<0.01);小剂量组用药后1周差异有高度统计学意义(P<0.01),第2周差异有统计学意义(P<0.05),第3周则差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1 节节草对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影响(±s)
表1 节节草对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖影响(±s)
注:与正常组比较,▲P < 0.01;与模型组比较,△P < 0.05,﹟P < 0.01
血糖(nmol/L) 正常组 模型组 阳性组 大剂量组 中剂量组 小剂量组给药前 5.20±0.21 20.17±2.50▲ 19.80±1.91▲ 21.23±2.13▲ 20.08±2.26▲ 19.90±2.45▲给药后1周 5.18±0.34 21.33±2.41▲ 10.80±2.10﹟ 10.78±2.41﹟ 11.23±2.31﹟ 14.56±2.21﹟给药后2周 5.25±0.14 19.01±2.30▲ 11.47±1.68﹟ 9.56±1.02﹟ 12.23±1.30﹟ 16.87±0.87△给药后3周 5.10±0.21 18.12±2.01▲ 12.45±1.42﹟ 11.23±1.21﹟ 14.21±2.36﹟ 17.41±1.41
表2 节节草对正常小鼠血糖影响(±s)
表2 节节草对正常小鼠血糖影响(±s)
注:与正常组比较,▲P <0.01
血糖(mmol/L) 正常组 阳性组 大剂量组 中剂量组 小剂量组给药前 5.59±0.32 5.60±0.31 5.50±0.43 5.58±0.46 5.61±0.25给药后7 d 5.50±0.36 4.66±0.28▲ 5.56±0.58 5.42±0.35 5.65±0.27
2.3 节节草醇提物对正常小鼠血糖的影响
节节草醇提物对正常小鼠的血糖无影响,阳性药格列喹酮能降低正常小鼠血糖水平,阳性组与正常组比较差异有高度统计学意义(P<0.01)。见表2。
3 讨论
四氧嘧啶是一种特异性β细胞毒剂,可选择性破坏多种动物胰岛β细胞致实验性糖尿病,这与临床Ⅰ型糖尿病发病机制相近。四氧嘧啶糖尿病小鼠是研究糖尿病治疗药物疗效的常用动物模型。本实验组研究节节草醇提物对糖尿病小鼠的影响,结果表明节节草醇提物大、中剂量组降糖效果优于小剂量组,有一定量效关系,但对正常小鼠血糖无影响。节节草醇提物成分复杂,其降血糖有效部位是什么以及通过何种途径修复受损胰岛β细胞,今后实验中有待进一步阐明。
[1] 李淑惠,李德坤,李平亚,等.木贼科植物研究概况-化学成分研究[J].中草药,2000,31(7):12-14.
[2] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2001:273.