司帕沙星眼用凝胶质量控制方法研究

温 坚 ，李 芳 ，汪德凤 ，黄 娜 ，洪宝贤 ，林三清 ，夏敬民

(1.广东省湛江市中心人民医院，广东 湛江 524037;2.湛江师范学院校医院，广东 湛江 524048;3.湛江师范学院制药工程系，广东 湛江 524048)

司帕沙星(sparfloxacin)是第4代氟喹诺酮类抗菌药物。体外抗菌试验表明，司帕沙星对革兰阳性菌、革兰阴性菌以及厌氧菌均有广谱强效的抗菌作用，特别是对第2代喹诺酮类药物作用弱的肺炎球菌、支原体、衣原体、军团菌、结核杆菌以及非典型抗酸菌等也显示出很强的抗菌活性。本品为强效杀菌剂，在最低抑菌浓度(MIC)以上时即可迅速杀菌，并对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌等能达到与敏感菌相同的杀菌效果。体内抗菌试验证明，司帕沙星对革兰阳性菌如金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌感染小鼠的半数致死量分别为0.828，3.36，6.31 mg/kg，有效性为环丙沙星的5～10倍、氧氟沙星的3～7倍。该药具有高效、组织分布广、渗透性强、消除半衰期长、疗效确切、不良反应少、生物利用度高等特点[1-3]，可有效治疗呼吸系统、泌尿生殖系统等感染性疾病，临床应用前景广阔。目前开发的剂型有分散片等[4-6]，尚未见司帕沙星眼用凝胶剂的报道。根据临床治疗眼部感染性疾病的需要，笔者研制了司帕沙星眼用凝胶，凝胶由司帕沙星、卡波姆-940、甘油、丙二醇、羟苯乙酯等制成，现将其质量控制方法报道如下。

1 仪器与试药

Gold S53型紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公司);AY-120型分析天平(日本Shimadzu公司);pHS-25C型数字酸度计(上海鹏顺科学仪器有限公司)。司帕沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号为130461-200501，含量为99.8%);司帕沙星原料药(湖北健源化工有限公司，批号为090804，含量为99.82%);卡波姆-940(武汉合中化工生物有限公司，批号为20090902，规格为1 kg);甘油(湖南尔康制药有限公司，批号为20090223);丙二醇、氢氧化钠、冰醋酸和醋酸钠(广州化学试剂厂，批号分别为20090302-1，20090204-2，20080612-1，20080715-1);试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 性状

本品为淡黄色胶体。

2.2 鉴别

取供试品溶液进行紫外扫描，结果在297 nm波长处有最大吸收。本品显有机氟化物的鉴别反应[6]。

2.3 检查

本品pH应为7.5～8.0。其他检查应符合2010年版《中国药典(二部)》中眼用凝胶的相关规定[6]。

2.4 含量测定

2.4.1 溶液制备

取醋酸钠18 g，加冰醋液9.8 mL，再加纯化水稀释至1 000 mL，搅匀，即得pH为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液(溶剂A)。精密称取司帕沙星对照品50 mg，置250 mL量瓶中，用溶剂A溶解并稀释至刻度，搅匀，得对照品贮备液。精密称取司帕沙星眼用凝胶3.0 g(约相当于司帕沙星6 mg)，置100 mL烧杯中，加入0.1 mol/L氢氧化钠液10 mL，搅拌使凝胶完全溶解，定量转移至25 mL量瓶中，加入0.1 mol/L氢氧化钠液溶解至刻度，摇匀，精密吸取5 mL，置50 mL量瓶中，用溶剂A溶解至刻度，摇匀，精密吸取稀释液20 mL至100 mL量瓶中，用溶剂A溶解至刻度，摇匀，制成1 mL含司帕沙星约5 μg的供试品溶液。除司帕沙星外，按处方比例取卡波姆-940、甘油、丙二醇、羟苯乙酯等辅料，根据眼用凝胶的制备方法制备空白凝胶，精密称取空白凝胶3.0 g，按样品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。

2.4.2 测定波长选择

取对照品贮备液，用溶剂A稀释，制成每1 mL约含司帕沙星4 μg的溶液，照紫外分光光度法，以溶剂A为空白，在250～400 nm波长范围内扫描。另外，分别取供试品溶液和阴性对照品溶液，按上述方法进行扫描，记录3种溶液的紫外吸收光谱。结果见图1。可见，辅料在255 nm左右波长处有少量吸收，在297 nm波长处无吸收，而司帕沙星在297 nm波长处有最大吸收，故选定297 nm为司帕沙星的含量测定波长。辅料对司帕沙星的含量测定无干扰。

图1 司帕沙星紫外分光光谱图

2.4.3 方法学考察

线性关系考察:精密吸取司帕沙星对照品贮备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 mL，分别置 100 mL 量瓶中，用溶剂 A 溶解至刻度，摇匀，配制成含司帕沙星 2.0，4.0，6.0，8.0，10.0，12.0，14.0 μg/mL的系列溶液，以溶剂A为空白，在297 nm波长处分别测定吸光度，以吸光度(A)对质量浓度(C)进行线性回归，得回归方程 A=0.075 07 C+0.002 2，r=0.999 95(n=7)。结果表明，司帕沙星质量浓度在2.04～14.28 μg/mL范围内与吸光度线性关系良好。

稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于 0，1，2，4，6，8 h 时在297 nm波长处测定吸光度，计算含量。结果的 RSD为0.43%(n=6)，表明供试品溶液在8 h内稳定。

精密度试验:精密吸取司帕沙星对照品贮备液适量，用溶剂A稀释，制成低、中、高3种质量浓度的溶液，分别在日内和日间进行测定，每个质量浓度测定5次。结果日内的 RSD为0.78%(n=5)，日间的 RSD为0.97%(n=5)。

加样回收试验:取已知含量的样品(批号为100930)6份，每份2 g，精密称定，每2份为一平行样;另按低、中、高量级取司帕沙星对照品共6份(2，4，6 mg各2份)，精密称定，加入上述平行样中，按供试品溶液制备方法操作，制成待测溶液，依法测定吸光度，将吸光度代入回归方程计算司帕沙星的含量，计算回收率。结果见表1。

表1 司帕沙星加样回收试验结果(n=6)

2.4.4 样品含量测定

取3批样品，依法制备供试品溶液并测定吸光度，由回归方程计算含量。结果批号为100927，100928，100929的3批样品中，司帕沙星含量分别为标示量的99.64%，101.18%，100.42%。本品含司帕沙星(C19H22F2N4O3)应为标示量的90.0% ～110.0%。

3 讨论

司帕沙星在0.1 mol/L氢氧化钠溶液中可溶解，经试验，以0.1 mol/L氢氧化钠溶液为溶剂时，制剂辅料对本法测定有干扰，而以pH为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液为溶剂，制剂辅料对本法测定无干扰。在测定过程中，先用少量0.1 mol/L氢氧化钠溶液溶解样品，后用pH为4.5的醋酸-醋酸钠缓冲液稀释，可使主药溶解完全，又使辅料不影响测定。采用紫外分光光度法测定主药含量，操作简便快速，结果准确可靠，适用于司帕沙星眼用凝胶的质量控制。

[1]林 波，杨朋彬，刘爱平.司帕沙星的临床应用[J].中国现代实用医学杂志，2004，3(18):38-39.

[2]郑雪清.广谱强效抗菌药司帕沙星[J].中国药业，2000，9(9):64-66.

[3]Ramirez J，Unowsky J，Talbot GH，et al.Sparfloxacin versus clarithromycin in the treatment of community-acquired pneumonia[J].Clin Ther，1999，21(1):103-117.

[4]石庆平，丁 峰，许善初，等.司帕沙星分散片的研制及其质量控制[J].江苏医药，2010，36(7):825-827.

[5]李春雷，李 鹏，朱雪松，等.复方司帕沙星滴眼液的制备[J].医药导报，2009，28(12):1 610-1 611.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:220-222，附录9-10，附录19-20.