河南省宫颈病变人乳头瘤病毒感染分布及基因分型

夏庆欣 魏 冰 卢红梅 冯 稳 (郑州大学附属肿瘤医院 河南省肿瘤医院病理科，河南 郑州 45004)

人乳头瘤病毒(human pap illomavirus，HPV)是定向感染人体皮肤及黏膜复层鳞状上皮细胞的一类乳头瘤病毒。根据HPV基因序列不同，目前已分离出120多种亚型，约40种涉及生殖道感染，20种与肿瘤有关。HPV根据生物学特征、致癌潜能可分为高危型和低危型。HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68 属于高危型，高危型与子宫颈癌上皮内高度病变及恶性变的发生相关〔1〕;HPV6、11、42、43、44 属于低危型，低危型不整合于细胞基因组中，主要引起疣的发生。HPV的感染具有很强的地域性，世界范围内不同国家或地区HPV的感染率及基因分型分布均存在差异。因此明确HPV在特定地区及不同病变宫颈组织的感染率及基因分型分布差异，及早发现高危型HPV感染和及早治疗宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者以阻断宫颈癌的发生，对HPV所致疾病的预防和HPV疫苗开发应用有着重要的指导意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象 2009年3月至2010年10月河南省肿瘤医院妇科门诊、体检中心及妇科病房接受妇科检查及治疗的女性2 273人，年龄18～82岁，所有患者均经宫颈活检行病理组织学检查证实。

1.2 标本采集 采用统一标准收集宫颈细胞，放入加有CytoRich转移液的小瓶内，以待检测HPV DNA和HPV分型。

1.3 方法 DNA提取、PCR扩增、HPV分型检测采用核酸分子导流杂交系统(凯普生物科技有限公司，广州)对21种常见的HPV基因型进行分型检测，操作过程严格按说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS15.0软件统计进行χ2检验。

2 结果

2 273例研究样本中，951例(41.84%)感染不同型别的HPV，其中CIN病变201例(21.14%，201/951)、宫颈鳞癌512例(53.84%，512/951)、非肿瘤性病变238例(25.03%，238/951)。1 322例(58.16%)未感染 HPV，其中 CIN病变94例(7.11%，94/1 322)、宫颈鳞癌354 例(26.78%，354/1 322)、其他非肿瘤性病变874例(66.12%，874/1 322)。本组HPV感染模式为清晰地单峰分布。总感染高峰从25岁开始，逐渐上升，持续到45岁开始下降，高危型及低危型感染率与年龄峰值接近。见图1。年龄组间的差异无统计学意义(P=0.318)。

图1 HPV感染亚型在各年龄组间分布

本组951例感染中，双重感染77%;有189例呈多重HPV亚型感染，占总感染率的17.87%，其中三重感染，四重感染2%，五重感染2%。

本组HPV 16的感染率29.17%，位于第1位;其后依次是HPV 18(4.58%)、HPV 58(3.17%)、HPV 52(2.64%)、HPV 31(1.72%)等。1 112例呈炎性反应改变的妇女中，238例(21.22%)检测到HPV感染，其中87例感染高/可能高风险的HPV病毒类型，151例感染低/未知风险的病毒类型。

3 讨论

HPV 亚型的检测，在临床处理中具有重要的分流管理作用。当高危型HPV阳性时，须进一步行阴道镜检查，再根据阴道镜结果做相应处理;若高危型HPV阴性，可重复行细胞学检查，根据细胞学结果给予相应处理，避免延误诊治。因此，HPV亚型检测使目前的宫颈防癌筛查具备了更严谨的科学性及准确性。HPV感染是宫颈癌发生的主要因素，故采用HPV疫苗是防治宫颈癌的最根本方法。2006年6月，美国食品与药品管理局(FDA)正式批准Gardasil宫颈癌预防性疫苗上市，标志着宫颈癌防治已进入了一级预防，国外宫颈癌以HPV16和18型感染为主〔3〕，因此世界上第一个二价肿瘤疫苗，也主要针对HPV16、18型。然而HPV感染亚型分布在全球存在明显的地区差异，在我国尚缺乏系统的、全面的、科学的HPV型别地区分布情况数据，能否直接使用成品二价疫苗及预防感染的有效性需要进一步评估。

张东红〔4〕的研究表明，HPV的型别分布在我国存在一定地区性，总体上以高危型 HPV16、HPV58、HPV18、HPV52 和HPV33为主。高危型HPV16是我国最为常见的感染型别，在所有HPV感染型别中占33.54%，且在南、北方地区均位居所有型别的第 1 位〔5～8〕;其他常见型别依次是 HPV58、HPV18、HPV52和HPV33等。在长江以北，HPV58、HPV52型分别占第2、3位，而HPV18占第4位。长江以南，HPV18、HPV58分别占第2、3位，而 HPV52型位于第 4位，其他型别如 HPV33、HPV53、HPV31、HPV66型与北方差异不大。本组研究显示HPV16的感染率29.17%，位于第1位，和国内其他研究组的结果基本吻合，并随着宫颈病变的危险度呈正比例增加，说明在宫颈疾病的发展过程中HPV16的感染起到积极地促进作用;其后 依 次 是 HPV18(4.58%)、HPV58(3.17%)、HPV52(2.64%)、HPV31(1.72%)等;本研究结果显示在河南省人群中以HPV16、18、58分布为主，其次为HPV52、HPV31等。对于HPV亚型的多重感染是否增加或促进宫颈癌变的发生一直是学者们关注的问题，本研究显示多重感染率并未随病变危险度的增加而变化，故认为在河南省HPV亚型的多重感染可能与本省宫颈癌的发生率无直接相关性，但本文观察到在本组多重感染的189个病例中，同时合并HPV16型感染的有48例(25.4%)，是否存在由于机体免疫机能的缺陷而致多重感染，进一步导致高危亚型的感染机会增加或清除能力下降有待进一步研究。在一般人口中不同年龄组HPV感染的流行数据对设计疫苗接种和宫颈癌筛查策略尤为重要。全球范围内的研究已经观察到四种HPV感染的特定年龄流行曲线模式。第1种模式是单峰曲线，发生在年轻女性，与其他性传播感染峰相同〔9～11〕;第2种模式是双峰U型曲线，第1峰位主峰，位于年轻妇女，第 2 峰低些，位于中老年妇女〔9，12～14〕;第 3 种模式是所有成年年龄组都呈高峰，在印度、尼日利亚的调查中均观察到〔6〕;而第4种模式是所有年龄组的患病率都呈低峰〔6〕。本研究显示河南妇女HPV感染模式为清晰地单峰曲线分布，总感染高峰从25岁开始，逐渐上升，持续到45岁开始下降，高危组及低危组感染的年龄峰值类似。说明在性生活活跃期感染几率增加，因此对于已婚妇女进行HPV的常规检查应成为宫颈癌防治中的重要内容，而预防HPV的感染和计划接种疫苗应提前在青少年期进行。

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