维药罗勒不同提取物对角叉菜胶所致大鼠急性胸膜炎模型的影响

古兰·托来西， 艾尼瓦尔·吾买尔， 田树革， 娜迪拉·热依木， 阿布来提·阿布力孜， 依巴代提·吐乎提*

(1.新疆医科大学药学院药理教研室，新疆乌鲁木齐 830054;2.新疆医科大学中医学院实验中心，新疆 乌鲁木齐 830054;3.新疆医科大学第二附属医院，新疆乌鲁木齐 830054)

维药罗勒不同提取物对角叉菜胶所致大鼠急性胸膜炎模型的影响

古兰·托来西1， 艾尼瓦尔·吾买尔1， 田树革2， 娜迪拉·热依木3， 阿布来提·阿布力孜1， 依巴代提·吐乎提1*

(1.新疆医科大学药学院药理教研室，新疆乌鲁木齐 830054;2.新疆医科大学中医学院实验中心，新疆 乌鲁木齐 830054;3.新疆医科大学第二附属医院，新疆乌鲁木齐 830054)

目的 探讨罗勒不同提取物对胸膜炎模型大鼠的肿瘤坏死因子-a(TNF-a)，前列腺素E2(PGE2)，白细胞介素-8(IL-8)的影响。方法 实验分为9组，每组连续灌胃7 d，末次给药30 min后采用角叉菜胶所致大鼠胸膜炎模型。结果模型组大鼠胸腔渗出液中TNF-a，蛋白质量明显升高(P＜0.001，P＜0.01)及血清中IL-8，PGE2显著升高(P＜0.001)。结论 罗勒不同提取物对角叉菜胶所致大鼠急性胸膜炎有显著的抑制作用，其作用机制可能是通过抑制炎性介质PGE2的生成和细胞因子TNF-a，IL-8的升高等环节产生抗炎作用。

维药罗勒;角叉菜胶;胸膜炎

罗勒Ocimum basilicumL.是唇形科罗勒属一年生草本植物，是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之一，植物维文名为热依汗(Rayhan)［2］，别名九层塔，毛罗勒，丁香，香草等［3］。原产于以印度为中心的亚洲热带［8］，我国中部，南部，东部有栽培，主要分布与云南，四川，广东，台湾，湖南，福建，新疆等地。现代化学研究表明罗勒的主要成分包括挥发油类，黄酮类及其苷类，香豆素类，此外还含萜类和生物碱类［4］。本实验所研究的是在新疆栽培的罗勒。本课题组前期研究已表明新疆罗勒有降血压，调血脂及抗血栓作用，在国外研究表明罗勒具有抗炎作用，但国内尚未见罗勒抗炎作用的研究报告。本实验研究罗勒不同提取物(水，乙酸乙酯，正丁醇)对胸腔渗出液的炎症因子，炎性介质以及蛋白质量的影响作了相关研究，从中探讨其抗炎作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 药品及试剂 盐酸地塞米松片:0.75 mg/片(天津药业集团新郑股份有限公司，批号090817)，戊巴比妥钠(批号860901)，角叉菜胶(Carrageenan，Car)(Biosharp公司，批号1000245)，大鼠肿瘤坏死因子-a(TNF-a)ELISA试剂盒(批号201005)，大鼠白细胞介素8(IL-8)ELISA试剂盒(批号201005)，大鼠前列腺素 E2(PGE2)ELISA试剂盒(批号201005均由R＆D公司)，Bradford蛋白浓度测定试剂盒(北京博迈德科技发展有限公司，批号20301151)，肝素钠(Solarbio公司，批号H8060)。

1.1.2 实验仪器 旋转蒸发器 RE-52AA，恒温水浴锅 B-220(上海亚荣生化仪器厂，新疆医科大学中药-生药学实验室提供)，冷冻干燥机(北京博医康实验仪器有限公司，FD-1)，ODA-LO2510102酶标分析仪(BIO-RAD公司)，LXJ-IIB低速大容量多管离心机。

1.1.3 实验动物 雄性 SD大鼠108只，清洁级，体质量(200±20)g，均由新疆医科大学动物中心提供。

1.2 实验方法

1.2.1 药材的提取 新疆托克逊县采集的罗勒地上部分粉碎后用8～10倍量水浸泡，用回流法回流提取3次，合并3次滤液，进行减压浓缩至浸膏状，置－70℃冷藏1 h，取出后放入冷冻干燥机24 h后得罗勒水提物的固体粉末;乙酸乙酯，正丁醇部分从乙醇提取液中分别萃取得到的(乙醇提方法采用95%乙醇溶液，其余方法完全相同)罗勒乙酸乙酯，正丁醇萃取物的固体粉末。

实验时罗勒水提取物和正丁醇萃取物固体粉末加蒸馏水溶解，乙酸乙酯萃取物在5%的CMC-Na溶液溶解至所需浓度。本实验前期定性实验结果表明水提物主要含糖类，乙酸乙酯提取部分含黄酮类、皂苷类、萜类，正丁醇提取部分含黄酮苷类。

1.2.2 雄性SD大鼠108只，随机分为9组，每组12只:正常组，模型对照组，阳性对照组(地塞米松7.5 mg/kg)，罗勒水提物高，低剂量组(400 mg/kg，100 mg/kg)，罗勒乙酸乙酯萃取物高，低剂量组(400 mg/kg，100 mg/kg)，罗勒正丁醇萃取物高，低剂量组(400 mg/kg，100 mg/kg)。每组动物连续灌胃7 d，每日1次，正常组与模型组给予等体积的生理盐水，末次给药30 min后，模型对照组及各给药组动物分别用乙醚轻度麻醉后向胸腔内注入角叉菜胶(0.2 mL/100 g)［1，5-7］，正常组注入等体积生理盐水，致炎 12 h 后，大鼠摘除眼球取血后，戊巴比妥钠麻醉处死，打开胸腔，用玻璃吸管将胸腔内全部渗出液吸出，然后以PBS溶液(含肝素5 U/mL)2 mL冲洗胸腔2次，冲洗液和渗出液合并，将渗出液和血液3 000 r/min离心15 min，取上清液，按试剂盒说明书操作。

1.3 统计学方法 数据用SPSS16.0统计软件处理，所有结果用±s表示，采用多组之间单因素方差分析和SNK两两比较，P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠胸腔渗出液中TNF-a，Pro量的影响 与正常组比较，模型组大鼠胸腔渗出液中TNF-a，Pro量显著升高。与模型组比较，阳性对照组大鼠胸腔渗出液中TNF-a，Pro量显著降低(P＜0.001)，罗勒提取物水溶性部位高、低剂量组，乙酸乙酯高、低剂量组，正丁醇高、低剂量组均有显著降低 TNF-a量(P＜0.001，P＜0.01)。水提物高剂量与乙酸乙酯，正丁醇高剂量比较，与正丁醇高剂量有明显差异(P＜0.01)，乙酸乙酯高剂量与正丁醇高剂量比较也有差异，水提物与乙酸乙酯高剂量的相互接近，无差别。水提物低剂量与乙酸乙酯，正丁醇低剂量比较，与正丁醇低剂量有显著性差别(P＜0.05)，乙酸乙酯低剂量与正丁醇低剂量比较也有明显的差别(P＜0.01)。结果见表1。

表1 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠胸腔渗出液中TNF-a，Pro质量的影响(±s)

表1 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠胸腔渗出液中TNF-a，Pro质量的影响(±s)

注:与模型组比较，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0. 001;与水提物高剂量比较，##P ＜0. 01;与乙酸乙酯高剂量比较，▲▲P ＜0. 01;与水提物低剂量比较，△P ＜0. 05;与乙酸乙酯低剂量比较，▷P ＜0.05。

组别 剂量/(mg/kg) 动物数/只 TNF-a/(ng/L) Pro/(μg/L)正常组 — 10 11.86±2.55＊＊＊9.09 ±4.18模型组 — 9 27.99±8.34 17.33±2.18＊＊＊地塞米松组 7.5 9 11.61±2.22＊＊＊ 9.90±4.21###罗勒水提物高剂量组 400 10 11.97±1.02＊＊＊ 15.26±4.75###罗勒水提物低剂量组 100 10 13.47±2.23＊＊＊ 16.33±3.30＊＊罗勒乙酸乙酯高剂量组 400 10 12.33±1.39＊＊＊ 10.92±3.75###罗勒乙酸乙酯低剂量组 100 10 13.85±2.71＊＊＊ 13.54±4.36#罗勒正丁醇高剂量组 400 10 17.04±3.21＊＊##▲▲ 10.70±3.39###罗勒正丁醇低剂量组 100 10 17.32±2.64＊＊△▷ 10.72±2.48###

2.2 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影响 与正常组比较，模型组大鼠胸腔渗出液中IL-8，PGE2的量显著升高。与模型组比较，阳性对照组大鼠血清中IL-8，PGE2的量显著降低(P＜0.001)，罗勒提取物水溶性部位高、低剂量组，乙酸乙酯高、低剂量组，正丁醇高、低剂量组均有显著降低血清中 IL-8，PGE2的量(P＜0.001，P＜0.01)。与地塞米松组比较，乙酸乙酯低剂量，正丁醇低剂量有显著性差异(P＜0.05)，水提物低剂量与乙酸乙酯低剂量也有显著性差异(P＜0.05)。结果见表2。

表2 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影响(±s)

表2 罗勒不同提取物对各组胸膜炎大鼠血清中IL-8，PGE2的影响(±s)

注:与模型组比较，＊＊P ＜0.01，＊＊＊P ＜0. 001;与地塞米松组比较，+P ＜0. 05;与水提物低剂量比较，△P ＜0.05。

组别 剂量/(mg/kg) 动物数/只 IL-8/(ng/L) PGE2/(ng/L)正常组 — 10 139.51±18.91＊＊＊ 38.08±4.41＊＊＊模型组 — 9 215.78±39.19 77.33±3.59地塞米松组 7.5 9 126.10±15.63＊＊＊ 45.92±3.82＊＊＊罗勒水提物高剂量组 400 10 140.21±18.42＊＊＊ 47.65±4.47＊＊＊罗勒水提物低剂量组 100 10 142.88±7.79＊＊＊ 51.36±4.23＊＊罗勒乙酸乙酯高剂量组 400 10 155.38 ±5.23＊＊＊+ 47.82 ±4.37＊＊＊罗勒乙酸乙酯低剂量组 100 10 159.47±8.08＊＊＊+△ 48.90±4.81＊＊＊罗勒正丁醇高剂量组 400 10 143.33±30.88＊＊＊ 44.27±2.66＊＊＊罗勒正丁醇低剂量组 100 10 154.10 ±18.91＊＊＊+ 47.60 ±6.22＊＊＊

3 讨论

角叉菜胶诱导的大鼠胸膜炎模型是常用的急性炎症模型［9］，该模型在炎症反应时，巨噬细胞，中性粒细胞，血小板等炎细胞激活，释放大量的炎症介质，如TNF-a，PGs，组胺，纤维蛋白裂解物等，本研究罗勒不同提取物对胸腔渗出液的炎症因子，炎性介质以及蛋白质量的影响作了相关研究。

TNF-a是一种重要的由激活的单核-巨噬细胞系统产生，并具有广泛生物学功能的促炎性因子和免疫调节因子，可通过对血管内皮细胞的作用，引起肺部损伤和胸膜炎，能增加中性粒细胞的黏附，指导胸腺细胞的成熟，并可刺激增强中性多核白细胞的浸润，吞噬活性与氧化自由基的产生，启动单核-巨噬细胞释放 IL-6，IL-8，PGE2等炎症介质［9］。急性炎症过程中涉及体内TNF，IL-1，IL-6，IL-8水平增加。本实验预防性给予罗勒不同提取物可抑制炎症时细胞因子TNF-a大量产生，从而进一步抑制IL-6，IL-8，PGE2的释放，罗勒不同提取物对TNF-a有显著地抑制作用(P＜0.001)。其中笔者还测了IL-8，PGE2的含量，罗勒不同提取物对血清中IL-8，PGE2有显著地抑制作用(P＜0.001)。

通过本次实验，初步发现罗勒不同提取物对胸膜炎有抑制作用，其作用机制可能是通过抑制细胞因子TNF-a和IL-8的升高，抑制炎性介质PGE2的生成，从而达到抗炎效果。

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R285.5

B

1001-1528(2011)08-1410-03

2010-12-27

国家自然科学基金(30660210)

古兰·托来西(1984—)，女，硕士研究生。Tel:15099509375，E-mail:Gulan.215@163.com

*通信作者:依巴代提·吐乎提(维吾尔族)，女，教授，硕士生导师，研究方向:心血管药理。Tel:13899930546