抗核抗体谱检测在弥漫性结缔组织病诊断中的价值

何建伟，李 静，程 江，曹薇薇

弥漫性结缔组织病是风湿性疾病中的一大类，包括很多种疾病，如:系统性红斑狼疮 (SLE)、类风湿关节炎 (RA)、混合性结缔组织病 (MCTD)、原发性干燥综合征 (pSS)、系统性硬化病 (SSc)、多肌炎/皮肌炎 (PM/DM)、血管炎等［1］。以上均是自身免疫性疾病，当自身抗原变性、损伤、移位及免疫功能失调、免疫耐受破坏、原发或继发性免疫缺陷或障碍和免疫识别紊乱时，会对自身抗原产生抗体，即自身抗体，从而造成免疫性病理损伤或功能障碍，引发自身免疫性疾病。弥漫性结缔组织病病变累及多个系统，临床症状个体差异较大，诊断也较困难。但由于此病患者的血清中均会出现特异或相对特异的自身抗体，临床医生大多依据抗核抗体 (ANA)检查诊断此类疾病。本研究对2009年1—12月在我院行ANA检查的854例住院患者的临床资料进行回顾性分析，旨在探讨ANA谱与弥漫性结缔组织病发生的相关性及对临床诊断的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 213例弥漫性结缔组织病患者中男74例，女139例;年龄28～70岁，平均 (41.6±12)岁;其中 SLE 89例，RA 83例，PM/DM 17例，MCTD 12例，SSc 6例，pSS 3例，血管炎3例，均根据临床表现、影像学和实验室检查确诊。选取同期非弥漫性结缔组织病患者641例作为对照组。其中男402例，女239例;年龄18～82岁，平均 (45.4±18.3)岁。包括血液系统疾病 (如白细胞减少症、白血病、贫血、骨髓异常增生症、真性红细胞增多症)、慢性肝炎伴肝功能异常、各种肾病伴肾功能异常、甲状腺疾病 (甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退、甲状腺炎)、皮肤系统疾病 (银屑病、过敏性皮炎、湿疹)、呼吸系统疾病、心血管系统疾病等。

1.2 方法 所有患者于上午8:00～9:00空腹采集静脉血5 ml，分离血清，保存于-20℃待测。采用德国欧蒙公司试剂，免疫印迹法检测ANA谱，按说明书操作，结果以出现一条黑色标志线判为阳性。

1.3 统计学方法 不同组别间率的比较用χ2检验，p＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

弥漫性结缔组织病与非弥漫性结缔组织病患者自身抗体谱的检测结果见表1。SLE患者中抗dSDAN抗体、抗组蛋白抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体阳性率分别为 46.1%、19.1%、23.6% 和 68.5%，与对照组比较差异均有统计学意义 (p＜0.05)。MCTD患者抗组蛋白抗体、抗U1nRNP抗体阳性率分别为 16.7%和66.7%，与对照组比较差异均有统计学意义 (p＜0.05)。SSc患者抗 Scl-70抗体阳性率为66.7%，与对照组比较差异有统计学意义 (p＜0.05)。pSS患者抗SSA抗体、抗SSB抗体、抗CENP-B抗体阳性率分别为 66.7%、66.7% 和 33.3%，与对照组比较差异均有统计学意义 (p＜0.05)。血管炎患者抗 CENP-B抗体阳性率为33.3%，与对照组比较差异有统计学意义 (p＜0.05，见表1)。

表1 各种结缔组织病患者与对照者的ANA阳性率比较〔n(%)〕Table1 Comparison of ANA positive rates between patients with diffuse connective tissue disease and controls

3 讨论

ANA是最常出现于结缔组织性疾病患者血清中的一组自身抗体的总称，其靶抗原主要是真核细胞的核成分，也包括细胞质和细胞骨架成分。ANA有3个组成部分:抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和可提取的核抗原 (extractable nuclear antigen，ENA)，ENA 又 包 括 抗 Sm、抗U1nRNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70抗体等多种自身抗体［2］。本研究ANA谱的检测，就是测定上述3种不同类型的自身抗体。

本研究结果显示抗dsDNA抗体阳性率在SLE患者为46.1%，显著高于MCTD的 25.0%、PM/DM 的 5.9% (P ＜0.05)。pSS和SSc患者抗 dsDNA抗体均为阴性。据文献报道:抗dsDNA抗体在SLE患者中的阳性率为37.9% ～78.0%。抗dsDNA抗体是SLE最重要的标志性抗体，美国风湿病协会已经将抗dsDNA抗体列为SLE的诊断标准之一［2］，而且抗dsDNA抗体与SLE的活动性有明显的相关性，与狼疮性肾炎密切相关。SLE患者定期检测抗dsDNA抗体有助于监控临床病情变化和治疗效果。

本研究结果表明SLE患者的抗Sm抗体阳性率为 23.6%，在 RA、SSc、pSS、PM/DM、血管炎患者中抗Sm抗体均为阴性。据报道:抗Sm抗体在SLE中阳性率为20%～40%，诊断SLE具有很高的特异性，是目前公认的SLE的血清标记抗体，且不受糖皮质激素治疗的影响［3］。本研究结果与报道的相符。同时，本研究中76.4%的SLE患者Sm抗体呈阴性，说明抗Sm阴性并不能排除SLE诊断。

本研究中抗组蛋白抗体在多种疾病出现，其在SLE患者中阳性率达到19.1%，在类风湿性关节炎患者中达到6.0%，在MCTD患者中达到16.7%。目前，抗组蛋白抗体与病情的相关性报道不一［4］。有学者认为，抗组蛋白抗体是狼疮患者主要自身抗体之一，在整个病程中效价波动很大，提示抗组蛋白抗体可能参与SLE发病。但对SLE不具有诊断特异性。

本研究中，抗U1n-RNP抗体出现于多种自身免疫性疾病，包括MCTD、SLE、RA、PM/DM、pSS、SSc等。在MCTD中抗U1nRNP抗体阳性率达66.7%，在SLE中达25.8%，在 RA中达7.2%，在 SSc中为33.3%，在血管炎中为33.3%。抗U1n-RNP抗体在MCTD中的阳性率明显高于其他弥漫性结缔组织病的阳性率。据叶应妩等［2］报道:抗 U1n-RNP抗体是MCTD的标志性抗体但不是特异性抗体，在RA、pSS和血管炎中都有一定的阳性率。本研究结果中pSS患者抗U1n-RNP抗体无一例阳性，与此报道不相符，可能与pSS患者例数较少有关，待加大样本量后进一步分析。

本研究中，pSS患者抗SSA抗体阳性率为66.7%，SLE患者抗SSA抗体阳性率为68.5%，二者间无明显差异。既往有文献报道20%～60%的SLE患者可检测到此抗体，抗 SSA抗体也见于 RA、pSS、皮肌炎等疾病中，阳性率在3% ～7%［2］。抗SSA抗体在部分正常人中的阳性率为0.1%，这意味着抗SSA抗体诊断pSS的特异性并不高。本研究结果表明抗SSA抗体在RA、MCTD、SSc、PM/DM中阳性率为9.6% ～33.3%，无明显差异，而且非弥漫性结缔组织病患者抗SSA抗体阳性率为4.6%，均高于文献报道的阳性率，考虑与试验条件和新疆西北人群的患病率不同有关。本研究结果表明，单-抗SSA抗体对pSS的诊断特异性较低。

本研究中抗SSB抗体在pSS中的阳性率为66.7%，在SLE中为37.1%、在RA中为 4.8%、在 MCTD 中为 8.3%、在PM/DM中为5.9%，在其他弥漫性结缔组织病如SSc、血管炎中无一例呈阳性。抗SSB抗体诊断pSS的特异性较高。据报道:抗SSB抗体主要见于pSS，是pSS的血清特异性抗体［2］。抗 SSA与抗SSB抗体几乎同时出现，因此，抗SSA和抗SSB抗体被认为是pSS的标志性抗体，联合检测抗SSA和抗SSB抗体有助于确诊pSS病。

抗Scl-70抗体被视为SSc的血清特异性抗体［2］，本研究中 SSc患者抗 Scl-70阳性率为66.7%。此外，SLE、RA和MCTD等仅1例阳性外，其余都是阴性，抗Scl-70抗体阳性有助于SSc的确诊。

本结果显示，抗CENP-B抗体在SLE、RA、pSS、PM/DM、血管炎等多种自身免疫性疾病中出现，且阳性率比较无明显差异。据报道:抗CENP-B抗体对弥漫性结缔组织病无特异性诊断价值［2］。本研究结果也证实了这一点。

有必要指出:上述自身抗体谱仅是自身抗体中的一小部分，还有很多自身抗体因技术原因并未提纯以供特异性疾病检测和诊断。因此，为确定患者是否存在各种各样的自身抗体，首先用间接免疫荧光法检测血清中的各种自身抗体，以便于弥漫性结缔组织病筛查，然后用线性免疫法检测是哪一种或哪几种自身抗体，以便于对弥漫性结缔组织病的鉴别诊断，这一观点在许多学者的试验中得到证实［5-6］。

综上所述，通过检测分析ANA谱再次证实自身抗体谱检测结果与弥漫性结缔组织病密切相关，为诊断和鉴别诊断该病提供了重要依据。

1 叶任高，陆再英.内科学［M］.北京:人民卫生出版社，2001:891-892.

2 叶应妩，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.南京:东南大学出版社，2006:655-666.

3 葛文亮.抗核抗体谱的检测在自身免疫性疾病诊断中的价值［J］.放射免疫学杂志，2008，21(4):383-384.

4 Monestier M，Fasy TM，Losman MJ，et al.Structure and binging properties of monoclonal antibodies to core histones from autoimmune mice ［J］.Mol Immunol，1993，30:1069.

5 车文英，谭延国，韦希明，等.312例抗核抗体与抗细胞核细胞浆抗体谱检测结果的分析 ［J］.中国试验诊断学，2008，12(8):1031-1033.

6 张延林.自身免疫性疾病抗核抗体与抗ENA抗体相关分析 ［J］.医药论坛杂志，2008，29(24):52-54.