萃取法与索氏提取法提取当归中阿魏酸含量结果的比较

2011-05-02张培培韩春超

药学研究 2011年5期

张培培，韩春超

(山东中医药大学药学院，山东济南 250355)

当归为伞形科植物Angellica sinensis(Oliv)Diels.的根。具有补血调经，活血止痛，润肠通便的功效。主要用于热血虚诸症，血虚血瘀，月经不调，经闭，痛经，虚寒性腹痛，跌打损伤，痈疽疮疡，风寒痹痛，血虚肠燥便秘［1］。当归所含有效成分主要是阿魏酸［2］，具有促进细胞免疫和体液免疫，增强单核细胞的吞噬功能［3］。本实验以阿魏酸为指标综合评判，对萃取法与索氏提取法进行对比研究。

1 仪器与材料

MA110型电子分析天平(上海第二分析仪器厂);KQ—100B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);LXI—Ⅲ离心沉淀器(上海医疗器械三厂);Agilent 1100高效液相色谱仪。

阿魏酸对照品(批号:110773－200611，供含量测定用)购自中国药品生物制品检定所;甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 样品液的制备将当归中药材粉碎，称取10～20目的当归粗粉25 g，浸泡0.5 h，用中性水加热回流提取3次(加水量依次为药材重量的10，8，8倍，提取时间依次为3.0，3.0，3.0 h)，提取液用8层纱布分别滤过，滤液离心(3000 r·min－1，15 min)，合并上清液，在水浴锅上浓缩并定容。

2.2 提取方法比较

2.2.1 索氏提取法制备供试液取样品液于蒸发皿中水浴蒸至近干，加硅藻土3 g，搅匀，烘干，研细，以甲酸－乙酸乙酯(1∶19)索氏提取2 h，回收溶剂，残渣加适量甲醇使溶解，转移至25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到供试液A。

2.2.2 萃取法制备供试液取样品液用甲酸－乙酸乙酯(1∶19)萃取(20 mL×6次)，合并萃取液，回收溶剂至干，残渣加适量甲醇使溶解，转移至25 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得到供试液B。

2.3 对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品2.370 mg，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)溶解并定容至5 mL，制成对照液A(每1 mL含当归液0.474 mg)，取对照液A，用甲醇－1%冰醋酸(30∶70)稀释成 0.0077 mg·mL－1，0.0159 mg·mL－1，0.0316 mg·mL－1，0.0633 mg·mL－1，0.1263 mg·mL－1对照液 A1～5。

2.4 阿魏酸的含量测定

2.4.1 色谱条件色谱柱为 Kromasil C18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm);流动相为甲醇－1%冰醋酸(30∶70);检测波长320 nm;进样量20 μL;柱温30 ℃。

2.4.2 线性关系考察精密吸取2.3项下对照品溶液A1～5，按2.4.1项下色谱条件，依法测定。以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，计算回归方程为:Y=3151.9X－3.7704，r=0.9999，表明在0.0077～0.1263 mg·mL－1浓度范围内线性关系良好。

2.4.3 含量测定［4］依次吸取阿魏酸对照品溶液和2.2项下供试液A、B，按2.4.1项下色谱条件，依法测定，结果见图1、图2 和图3、表1。