茶多酚对蛋鸡生产性能、蛋品质和蛋黄胆固醇含量的影响

张 旭 蒋桂韬 王向荣 胡 艳 李昊帮 戴求仲

茶多酚(tea ployphenols,TP)又名茶单宁、茶鞣质,是茶叶中含有的一类以儿茶素类(cate chines)为主体的多羟基酚类化合物的总称。茶多酚有很强的抗氧化作用,且有抑菌、降血脂、降胆固醇和免疫调节等多种功能,可作为饲料添加剂应用于畜牧业生产,前景十分广阔。鸡蛋营养丰富,是居民主要消费的畜产品之一,但由于鸡蛋的胆固醇含量偏高(每枚鸡蛋含 200～300 mg),老人和高胆固醇血症患者不宜多食。饲粮中添加茶多酚能够一定程度地提高畜禽生产性能,改善畜产品品质[1-2],降低鸡蛋中的胆固醇含量[3]。由此,本研究旨在从分析茶多酚对蛋鸡生产性能、鸡蛋品质及蛋中脂肪、胆固醇和丙二醛(MDA)含量的影响入手,对茶多酚在蛋鸡饲粮中的适宜添加量进行优选和分析,为茶多酚在蛋禽养殖和低胆固醇鸡蛋生产提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 试验材料

茶叶提取物:主要成分为茶多酚,茶多酚含量 ＞98%(杭州禾田生物技术有限公司)。

胆固醇标准品:纯度≥99.7%(中国计量科学研究院)。

微量 MDA测定试剂盒:南京建成生物工程研究所。

1.2 试验动物与饲粮

试验选用 56周龄健康罗曼褐蛋鸡 384羽,采用单因子完全随机设计,将试鸡分为 4组,每组 6个重复,每个重复 16羽。试验为期 63 d,其中前 7天为预试期,正试期 56 d。

试验基础饲粮参照 NRC(1994)蛋鸡的营养需要配制。基础饲粮组成及营养水平见表 1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of basal diet(air-dry basis) %

1.3 试验设计与饲养管理

试验 1组为对照组,饲喂基础饲粮,试验 2、3、4组分别在基础饲粮中添加 100、150和200 mg/kg茶多酚。

试验蛋鸡分上、下 2层阶梯笼养,各重复均匀分布于鸡舍。自由采食与饮水,自然光照与人工光照相结合,自然通风和横向负压通风相结合。每日清理鸡粪和捡蛋各 2次,按常规程序进行鸡只免疫和栏舍消毒。

1.4 测定指标与方法

1.4.1 蛋鸡生产性能

试验期间每天按重复记录产蛋总数、总蛋重、采食量、软破蛋(软壳蛋、破壳蛋)数、次蛋(畸形蛋、薄壳蛋、沙壳蛋)数和死淘数,以组为单位统计平均蛋重、日产蛋量、产蛋率、合格蛋率、软破蛋率、次蛋率、死淘率、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 鸡蛋品质

试验期间每 7 d从各重复中抽取鸡蛋样品。每组取 6枚蛋用于测定蛋黄比率、蛋白比率、蛋壳厚度(蛋壳厚度测定仪)、蛋形指数(游标卡尺测量法)、蛋黄颜色(蛋黄比色表)及蛋白高度(蛋白高度测定仪),计算哈夫单位(HU),并另从每组中取6枚蛋于 4℃冷藏 30 d后再次测定鸡蛋哈夫单位。HU=100×lg(H-1.7W0.37+7.6),其中 H为蛋白高度(mm),W为蛋重(g)。

1.4.3 蛋黄中粗脂肪和胆固醇含量

每 7 d从各重复中抽取接近平均蛋重的鸡蛋,每组取 6枚蛋用于分析蛋黄中粗脂肪含量(索氏提取法);另取 6枚蛋采用高效液相色谱(Agilent 1200)法测定蛋黄中胆固醇含量,前处理方法参照张蓉真等[4]的直接萃取法,准确吸取蛋黄稀释液1.0 mL于 10 mL离心管中,加入 1.0 mL 95%乙醇,用漩涡振荡器混匀后,加入 2.5 mL乙醚,再次混匀后加入 2.5 mL石油醚,振荡混匀,用离心机3 000 r/min离心 5 min,将上层萃取液取出在低于45℃条件下用氮气吹干,加 2.0 mL无水乙醇溶解,用 0.22μm有机微孔滤膜过滤后进样,色谱条件如下。

色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB-C18,4.6 mm×150 mm,5μm;流动相:乙腈 -异丙醇(4∶1,V/V);流速 :0.8 mL/min;柱温:35 ℃;检测波长:210 nm;进样量:10μL。

1.4.4 蛋黄中 MDA含量

蛋黄中 MDA含量采用 MDA试剂盒分析。

1.5 数据统计分析

结果以平均值 ±标准差表示,用 SPSS 16.0统计软件进行方差分析,差异显著者用 LSD法进行多重比较。

2 结 果

2.1 茶多酚对蛋鸡生产性能的影响

各试验组蛋鸡生产性能见表 2,各组的平均日采食量、产蛋率、日产蛋量、料蛋比、死淘率、软破蛋率和次蛋率均差异不显著(P＞0.05),其中以试验 2组的产蛋量最高,料蛋比最低。添加茶多酚的 3个试验组的平均蛋重分别较对照组高 2.48%(P＜0.05)、0.53%(P＞0.05)和 0.18%(P＞0.05)。

表2 茶多酚对蛋鸡生产性能的影响Table 2 Effects of tea polyphenols on performance of laying hens

2.2 茶多酚对蛋品质的影响

茶多酚对蛋品质的影响见表 3,各组的蛋黄比率、蛋白比率、蛋壳厚度、蛋形指数、蛋黄颜色和哈夫单位均差异不显著(P＞0.05),其中 3个茶多酚试验组的蛋形指数和蛋黄颜色均在一定程度上高于对照组。将蛋在 4℃贮藏 1个月后,与对照组比较,添加茶多酚的 3个试验组蛋的哈夫单位值降低很少,分别较对照组高 7.13%(P＜0.01)、6.65%(P＜0.01)和 5.65%(P＜0.05)。

表3 茶多酚对蛋品质的影响Table 3 Effects of tea polyphenols on egg quality

2.3 茶多酚对蛋黄中粗脂肪、胆固醇和 MDA含量的影响

由表 4可知,添加茶多酚的 3个试验组蛋黄中粗脂肪含量分别较对照组低 1.79%(P＞0.05)、2.04%(P＞0.05)和 1.07%(P＞0.05);添加茶多酚的 3个试验组蛋黄中胆固醇和 MDA含量显著降低,胆固醇含量(mg/蛋黄)分别较对照组低36.83%(P＜0.01)、37.46%(P＜0.01)和41.65%(P＜0.01),MDA含量分别较对照组低18.40%(P＜0.05)、19.76%(P＜0.05)和31.76%(P＜0.01)。

表4 茶多酚对蛋黄中粗脂肪、胆固醇和 MDA含量的影响Table 4 Effects of tea polyphenols on the contents of crude fat,cholesterol and MDA in yolks

3 讨 论

3.1 茶多酚对蛋鸡生产性能的影响

本研究与前人研究结果不尽相同,Biswas等[5]在饲粮中添加 0.3%的绿茶粉(饲粮中茶多酚含量约 600 mg/kg)使蛋鸡采食量显著下降,平均蛋重显著降低,与本研究结果不同的原因可能是茶多酚的来源和添加量不同。王人悦[6]的试验表明茶多酚能够显著增加平均蛋重,显著降低料蛋比,与本试验结果具有一致性,其原因可能与茶多酚能够提高蛋鸡对营养物质的利用率、改善蛋鸡营养状况、增强免疫力和减少应激等因素有关。楼洪兴等[7]在饲粮中添加 100、220和 400 mg/kg茶多酚使软破蛋率显著下降,而本试验中茶多酚的添加对软破蛋率和次蛋率均无显著影响,此差异可能与试验用茶多酚纯度、饲粮组成、蛋鸡周龄等因素有关。

3.2 茶多酚对蛋品质的影响

茶多酚能够延缓贮藏过程中哈夫单位的下降,在贮藏 1个月后添加茶多酚试验组的哈夫单位显著高于对照组。由于哈夫单位能够反映蛋白的状况和蛋的新鲜程度[8],说明茶多酚能够延缓鸡蛋蛋白品质的下降,利于蛋的保鲜。影响蛋哈夫单位的因素有贮藏时间和温度、蛋鸡年龄、应激、营养、维生素(维生素 C和维生素 E)的补充、疾病、药物等[9-11],在环境和条件相同的情况下,营养和外源物质的补充是影响哈夫单位的关键因素。茶多酚是具有清除自由基能力的抗氧化剂,自由基会对蛋白质造成损伤,导致蛋白质变性和功能丧失[12],饲粮中添加茶多酚延缓蛋哈夫单位下降的主要原因可能就与其抗氧化作用有关。

3.3 茶多酚对蛋黄中粗脂肪、胆固醇和 MDA含量的影响

本研究在饲粮中添加 100～200 mg/kg茶多酚对蛋黄中粗脂肪含量无显著影响,但能够显著降低蛋黄中的胆固醇含量,降低幅度达 36.83%～41.65%。茶多酚的降胆固醇作用,在一些研究试验中也得到证实,尹靖东等[13]在饲粮中加入0.005‰～0.040‰的茶多酚可使蛋黄中胆固醇降低 6.22%～16.02%,其他研究人员也有过相似的报道[5,14]。可以看出,随着茶多酚在饲粮中用量的增大,蛋黄胆固醇的下降幅度有增大趋势。由本研究结果可知,饲粮中添加茶多酚可用来生产低胆固醇鸡蛋,综合考虑成本、生产性能、蛋品质和降低胆固醇效果等因素,100 mg/kg为生产低胆固醇鸡蛋的最佳添加量。

茶多酚的降胆固醇机理尚未完全清楚,虽然有研究表明茶多酚能够降低高血脂人群血液中的胆固醇含量[15]和高脂膳食肥胖小鼠血浆中的胆固醇含量[16],但并不能显著降低蛋鸡血清中的胆固醇含量[14,17],这说明茶多酚在蛋鸡体内并不是单纯地促使血液中的胆固醇分解或排泄掉,而很可能是主要通过减少胆固醇的合成来降低蛋中的胆固醇含量的。对蛋鸡来说,肝脏和卵巢是合成胆固醇的主要场所[18],肝脏的合成速度最快,蛋黄中胆固醇主要来源于肝脏中的极低密度脂蛋白(VLDL)和卵黄蛋白原(VTG),蛋黄中胆固醇含量主要取决于 VLDL进入卵母细胞的数量[19],茶多酚很可能是通过影响肝脏中脂蛋白的合成来影响蛋黄中胆固醇含量的,其机制还需试验进一步验证。

本研究结果表明,饲粮中添加茶多酚能够显著降低蛋黄中 MDA含量,这与尹靖东等[20]的试验结果一致。茶多酚的抗氧化作用与其具有清除体内自由基的作用有关[21],其能够减少蛋黄中脂质过氧化物的形成,增加蛋黄中脂质的稳定性,有利于延长蛋的货架期,本研究中茶多酚延缓鸡蛋在贮藏过程中哈夫单位的下降也可证实此点。

4 结 论

①饲粮中添加 100～200 mg/kg茶多酚对蛋鸡的生产性能和蛋品质无不良影响,并能够显著延缓蛋在贮藏过程中哈夫单位的下降。

②饲粮中添加 100～200 mg/kg茶多酚能够使蛋黄中胆固醇含量下降 36.83%～41.65%,使蛋黄中 MDA含量降低 18.40%～31.76%。

③饲粮中添加茶多酚可用来生产低胆固醇鸡蛋,100 mg/kg为生产低胆固醇鸡蛋的最佳添加量。

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