ERK2蛋白在宫颈癌中的表达及意义*

章丽霞，文 彬,2，黄一凡,2，刘 钧,2△

（1.川北医学院，四川南充 637000；2.川北医学院附属医院病理科）

ERK2蛋白在宫颈癌中的表达及意义*

章丽霞1，文 彬1,2，黄一凡1,2，刘 钧1,2△

（1.川北医学院，四川南充 637000；2.川北医学院附属医院病理科）

目的:研究ERK2蛋白在宫颈癌组织中的表达水平及其与宫颈癌生物学特性的关系。方法:采用免疫组化SP法，检测80例宫颈癌组织及30例正常宫颈组织中ERK2蛋白的表达。结果:ERK2在宫颈癌中阳性表达率为75.00%，明显高于正常宫颈组织的13.33%(P＜0.01)。ERK2阳性表达率与临床分期、分化程度和淋巴结转移有关(P＜0.01，P＜0.05），与年龄、生育史及组织类型无关(P＞0.05）。结论:ERK2的表达与宫颈癌的生长、浸润、转移等生物学行为关系密切，在宫颈癌的发生发展过程中发挥着重要作用。

宫颈癌；ERK2；免疫组织化学

1 材料与方法

1.1 一般资料 收集川北医学院附属医院病理科2005年-2009年经病理证实并手术切除的宫颈癌石蜡组织块80例，所有患者术前均未接受放化疗治疗。年龄23-66岁，中位年龄44.3±9.70岁；鳞癌68例，腺癌12例；高分化12例、中分化58例、低分化为10例；根据FIGO临床分期：Ⅰ期29例、Ⅱ期43例、Ⅲ期8例，并依据宫颈癌治疗原则分为≤Ⅱa期40例，≥Ⅱb期40例；有淋巴结转移者20例，无淋巴结转移者60例；生育史≤5次者62例，＞5次者18例。选择因子宫肌瘤全子宫切除的正常宫颈组织石蜡块30例为对照组，年龄31-67岁。所选病例均有完整的临床病理资料。

1.2 试剂与方法 兔抗人ERK2多克隆抗体(sc-154），工作浓度(1：200），购于北京金杉生物公司；SP试剂盒购自福建迈新生物技术有限公司。将常规石蜡包埋的蜡块，厚度4μm连续切片，SP免疫组化法观察ERK2蛋白的表达。免疫组化染色各步骤均按试剂盒说明书严格操作；已知阳性切片为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定 以细胞质出现棕黄色颗粒为ERK2阳性细胞。两人双盲法观察切片，采用半定量积分法[2]：每张切片随机选取具有代表性的10个高倍视野(×400）进行观察计数，每个视野计数100个肿瘤细胞，阳性细胞数＜10%为0分，11%-30%为1分，30%-75%为2分，＞75%为3分；阳性强度无着色为0分，淡黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。染色强度与阳性细胞百分比的乘积≤1分为阴性，1-2分为弱阳性，2-4分为阳性，＞4分为强阳性。若两人判断结果相差2分则重新判定。

1.4 统计方法 采用SPSS 13.0统计分析软件对数据进行χ2检验，P＜0.05为差异显著性的标准。

2 结果

2.1 ERK2在不同宫颈组织中的表达情况 见图1-2。80例宫颈癌和30例正常宫颈组织ERK2阳性率分别为75.00%(60/80）和13.33%(4/30），两组比较差异有统计学意义(χ2=34.101，P＜0.01）。

图1 宫颈鳞癌ERK2蛋白的表达

图2 宫颈腺癌ERK2蛋白的表达

2.2 ERK2表达与宫颈癌临床病理因素的关系 见附表。有淋巴结转移者ERK2阳性率显著高于无淋巴结转移者，临床分期≥Ⅱb期显著高于≤Ⅱa期，病理分化程度高、中、低3组间的表达差异有显著性(P＜0.01，P＜0.05）。ERK2阳性率与宫颈癌患者年龄、生育史、组织类型无关(P＞0.05）。

附表 ERK2表达与宫颈癌临床病理因素的关系(例数）

3 讨论

ERK是80年代末期发现的一类丝氨酸/苏氨酸激酶，是传递丝裂原信号的信号蛋白[3]。ERK家族有5个成员，包括ERK1-ERK5，其中ERK1和ERK2的分子量分别为44KDa和42KDa，是丝裂原活化蛋白激酶（Mitogenactivated protein kinases，MAPKs）/ERK通路中的两个重要成员，属于丝氨酸／苏氨酸残基的蛋白激酶，是细胞信号传导的重要途径[3]。ERK1/2能将多种细胞外信号(如生长因子、细胞因子、肿瘤启动因子等)通过磷酸化活化逐级传递至细胞核，并激活多种核转录因子，参与细胞的生长、发育、分裂及分化等[4]。ERK1/2的活化形式是P-ERK1/2，进入细胞核作用于Elk-1、c-myc、c-fos、c-jun、NF-κB等转录因子，可磷酸化核转录因子和其它蛋白激酶等多种底物，调节相关基因的转录，进而参与细胞的生长、发育、分裂及细胞间的功能同步等多种生理过程，并在细胞恶性转化等病理过程中起重要作用[4]。

本研究发现，ERK2在正常宫颈上皮中的阳性表达率为13.33%，在宫颈癌组织中的阳性表达率为75%，二者比较差异有统计学意义(P＜0.01)；宫颈癌临床分期≥Ⅱb期ERK2的阳性表达率明显高于≤Ⅱa期(P＜0.05）。因此提示，ERK2与宫颈癌的发生有关。本研究还发现，宫颈癌中有淋巴结转移者ERK2阳性率显著高于无淋巴结转移者(P＜0.05）；病理分化程度高、中、低3组间ERK2的表达率比较差异有显著性(P＜0.01），中、低分化比较差异无显著性(P＞0.05），可能与低分化病例偏少有关系，有待进一步研究。同时发现，ERK2阳性率与宫颈癌患者年龄、生育史、组织类型无关(P＞0.05）。本研究结果表明，ERK2过量表达与肿瘤转移、病理分级及临床分期相关，与苏连明等[5]在肝癌组织中的研究结果相似。

宫颈癌的发生发展是一个多因素的复杂过程，与其它恶性肿瘤一样，是多基因异常改变的结果。本研究发现，ERK2在宫颈癌的发生、发展及转移过程中可能起着十分重要的作用，有可能成为宫颈癌癌基因治疗的靶点。

[1]Webb CP,Van AL,Wigler MH,et a1.Signaling pathways in Rasmediated tumorigenicity and metastasis[J].Proc Natl Acad Sci USA,1998,95(15):8773-8778.

[2]Hao XP,Willis JE,Pretlow TG,et a1.Loss of fragile histidine triad expression in colorectal carcinomas and premalignant lesion[J]. Cancer Res,2000,60(1):18-21.

[3]Boulton TG,Nye SH,Robbins DJ,et al.ERKs:a family of protein-serine/threonine kinases that are activated and tyrosine phosphorylated in response to in insulin and NGF [J].Cell,1991, 65(4):663-675.

[4]Widmann C,Gibosn S,Jarpe MB,et a1.Mitogen activated protein kinase: conservation of a three kinase module from yeast to human[J]. Physiol Rev,1999,79(1):143-180.

[5]苏连明，朱雯.ERK2蛋白在肝癌组织中的表达及临床意义[J].牡丹江医学院学报，2009，30(6)：7-9.

EXPRESSION AND SIGNIFICANCE OF ERK2 PROTEIN IN HUMAN CERVICAL CARCINOMA

ZHANG Li-xia, WEN Bin, HUANG Yi-fan, et al
(North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637000, China)

Objective:To investigate expression of ERK2 protein in human cervical carcinoma, and its relationship with biological features of cervical carcinoma.Methods:SP immunohistochemical method was used to detect expressionof ERK2 in 80 cases cervical carcinoma and 30 cases normal cervix tissues.Results:The positive expression of ERK2 in cervical carcinoma was 75.00%, which was obviously higher than that in normal cervix tissue (13.33%, P＜0.01). The positive expression of ERK2 in cervical carcinoma had relations with clinical stage, differentiation degree and lymph node metastasis (P＜0.01, P＜0.05); and had no relations with age, childbearing history and pathological type (P＞0.05).Conclusions:The expression of ERK2 has close relations with biological behavior of cervical carcinoma, such as growth, infiltration and metastasis; and play important role in development of cervical carcinoma.

Cervical carcinoma; ERK2; Immunohistochemistry细胞外信号调节激酶(Extracellular signal-regulated kinase，ERK）级联是细胞内重要的信号转导途径，可将细胞外刺激传递至细胞核，参与细胞的生长、发育、分化等一系列生理过程，其异常表达在细胞的恶性转化和肿瘤的发生发展中起重要作用[1]。本研究采用免疫组化SP法检测ERK2蛋白在宫颈癌组织中的表达情况，探讨其在宫颈癌发生、发展中的作用及临床意义。

R737.33

A

1004-6879(2011）02-0117-03

2010-11-22）

* 四川省科技厅资助课题（07SG004-002）△ 通讯作者