黑线仓鼠及其白化突变系血液生理生化值的测定与分析

赵 爽，王冬平，刘 晓，李桂军，曾 林，白杰英

（军事医学科学院实验动物中心，北京 100071）

黑线仓鼠（Cricetulus barabensis）俗称中国地鼠，属于哺乳纲/真兽亚纲/啮齿目/仓鼠科/仓鼠亚科/仓鼠属的一种动物。1919年我国学者谢恩增首次将黑线仓鼠引入实验室进行医学研究，用于肺炎球菌的检定［1］。虽然在仓鼠家族中黑线仓鼠的使用不如金黄地鼠广泛，但是黑线仓鼠作为实验动物，自身有许多优良特性：睾丸大、颊囊发达、染色体数目少、自身传染性疾病少、脾和脑的重量相对较大等［2］。

作者信息在黑线仓鼠的驯育与研究方面开展较早，从1983年开始野生黑线仓鼠的驯化研究，在驯育过程中获得了黑线仓鼠的白化突变品系，并建立了黑线仓鼠白化突变系（A：CHA）［3］。黑线仓鼠及其白化突变系（以下称：白化黑线仓鼠）本身是非常理想的疾病模型动物。但动物本身生理生化值尚未有明确报道，这使该实验动物在生命医学研究中的应用受到一定的限制。本研究旨在测定黑线仓鼠及白化黑线仓鼠的血液生理生化正常值，以供研究人员参考。同时，比较黑线仓鼠与白化黑线仓鼠，以及仓鼠与小鼠在血液生理生化值方面的差异，为黑线仓鼠及其白化突变系更好的开发利用奠定基础。

1 材料和方法

1.1 实验动物

黑线仓鼠及白化黑线仓鼠，体重为18～20 g，每种动物雌雄各20只，购自军事医学科学院实验动物中心［SCXK-（军）2007-004］。实验动物分组编号：雌性黑线仓鼠用BF表示；雄性黑线仓鼠用BM表示；雌性白化黑线仓鼠用WF表示；雄性白化黑线仓鼠用WM表示。

1.2 仪器设备和主要试剂

CX5PRO全自动生化测定仪，由美国 Beckman公司生产，所用试剂均为 Beckman公司原装试剂。血球计数为日本光电MEK-7222K全自动血细胞分析仪（应用本仪器调试的动物参数），及配套试剂。

1.3 血液样品制备

眼眶静脉取血，EDTA-2K抗凝血及全血，抗凝血用于血液生理指标测定。全血5000 rpm离心2 m in，吸取上清液，用于血清生化指标测定。

1.4 血液生理生化值测定

生理值：白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC）、血小板计数（PLT）、血小板比积（PCT）、血小板体积分布宽度（PDM）。白细胞分类计数及百分比：嗜碱性粒细胞（BAS）、嗜酸性粒细胞（EOS）、中性粒细胞（NEUT）、淋巴细胞（LYM）、单核细胞（MON）。

生化值：总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、ALB/GLB、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、血糖（GLU）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LD）、淀粉酶（AMY）、AST/ALT、总胆红素（TBIL）、尿素氮（BUN）、尿酸（URIC）、肌酐（Crea）、BUN/Crea、磷（P）、钠（Na）、钾（K）、氯（Cl）、钙（Ca）、镁（Mg）、二氧化碳（CO2）、阴离子间隙（AG）、渗透压（OSM）。

1.5 数据分析

用SPSS10.0软件包对所测得的数据进行 t检验分析。

2 结果

2.1 血液生理值测定

测试结果显示黑线仓鼠的嗜酸性粒细胞绝对值、嗜碱性粒细胞绝对值、嗜酸性粒细胞百分数差异显著（P＜0.05）；白化黑线仓鼠的单核细胞的绝对值、嗜碱性粒细胞的绝对值、单核细胞绝对值差异显著。雄性黑线仓鼠和白化黑线仓鼠的WBC、淋巴细胞绝对值、单核细胞绝对值、嗜碱性粒细胞绝对值、淋巴细胞百分数、单核细胞的百分数、中性粒细胞的百分数、嗜碱性粒细胞的百分数差异显著；雌性黑线仓鼠和白化黑线仓鼠的平均红细胞血红蛋白浓度、嗜碱性粒细胞绝对值差异显著。（见表1）

2.2 血清生化值测定

测试结果显示黑线仓鼠的血糖、总蛋白、甘油三酯、谷丙转氨酶、肌酐、差异显著（P＜0.05），谷草转氨酶、氯、二氧化碳和渗透压存在极显著差异（P＜0.01）；白化黑线仓鼠的乳酸脱氢酶、磷、钠和钙差异显著（P＜0.05）。雌性黑线仓鼠和白化黑线仓鼠的血糖、碱性磷酸酶和阴离子间隙差异显著（P＜0.05），其渗透压、钙、氯、钠间差异极显著（P＜0.01）；雄性黑线仓鼠和白化黑线仓鼠的二氧化碳差异显著（P＜0.05），其钠、尿酸、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、胆固醇和总蛋白间异极显著（P＜0.01）。（见表2）

表1 黑线仓鼠及白化黑线仓鼠血液生理值测定Tab.1 Blood biochemical parameters in Cricetulus barabensis and Albinomutant

表2 黑线仓鼠及白化黑线仓鼠血清生化值测定Tab.2 Serum biochem ical parameters in Cricetulus barabensis and Albino mutant

注：P＜0.05，0.01表示黑线及白化仓鼠本身雌雄之间差异显著或极显著P＜0.05，0.01表示黑线及白化仓鼠之间比较差异显著或极显著。（雌雄分别比较）。

Note：P＜0.05，0.01means there is significant different between male and female in Cricetulus barabensis and Albino mutant；P* ＜0.05，0.01means there is obvious different between Cricetulus barabensis and Albinomutant.（Compared male and female respectively）

3 讨论

实验动物血液生理生化值是生物医学研究的基础指标，是临床医疗和科学研究的重要依据。不同品系（种）的动物血液正常生理生化值存在较大差异［4-7］，每个品系（种）的血液指标都有其相对稳定值，这也是区别各品系（种）的一个指标［8］。黑线仓鼠及其白化突变系出自同一品系，具有相同的遗传背景［3］，其本质区别可通过分子标记等技术进行区别和鉴定。这两种实验动物在生物医学研究中却大有用途，它们是一对天然的对照组合，对于研究毛发发生机制、生长因子及其受体机制、白化机理、毛囊结构等具有得天独厚的优势，测定其生理生化值也将有助于其研究和应用。

黑线仓鼠与白化黑线仓鼠大部分生理生化值与大、小鼠无明显差异［5，6］，同种动物雌雄个体间在少数几个指标存在一定差异，如嗜碱性粒细胞的绝对值、谷丙转氨酶、血糖等，这可能与性别有关。而黑线仓鼠与其白化突变系之间的差异很值得注意：两者雌雄间的嗜碱性粒细胞绝对值、碱性磷酸酶均存在极显著差异，这或许与白化黑线仓鼠的变异有一定关系，这两个指标有助于将白化黑线仓鼠作为特殊动物模型的开发。另一个值得注意的特点是：黑线仓鼠与白化黑线仓鼠的血小板计数（PLT）均高于其它动物2～3倍［5-7］。血小板（PLT）增多是一种临床常见的血液学表现，血小板量和质的异常均可导致岀血性疾病［9-10］。而黑线仓鼠与白化黑线仓鼠血小板的异常表现可能有助于其作为血液病学研究的良好模型，此项研究正在进一步证实中。

［1］K lumpp H，Lydia MF，Flaviane CVB，Mario M.Experimental model in hamster（Mesocricetus auratus）to study heterologous graft of scars and cutaneous diseases in plastic surgery［J］.Acta Cir Bras，2004，19：68-78.

［2］James GF，Benett JC，Franklin ML.Laboratory Animal Medicine［M］.Chapter 5：140-143.

［3］遇秀玲，郑振锋.白化黑线仓鼠解剖学与组织学特性的比较研究［J］.中国实验动物学杂志，1991，3：60-62.

［4］Friedrich G，Soriano P.Promoter traps in embryonic stem cell：a genetic screen to identity and mutate developmental genes inmice［J］.Genes Dev.1991，5：1513-1523.

［5］王冬平，李慕，尚世臣，等.不同日龄SPF级KM小鼠血液生理生化正常指标的探讨［J］.实验动物科学，2008，25 （4）：5-9.

［6］詹纯列，肖育华，李新春，等.普通级、SPF级 SD、W istar大鼠血液生化值的测定与比较［J］.中国比较医学杂志，2004，14（2）：94-96.

［7］杨锋，王红星，何永亮，等.实验Beagle犬血液学及血液生物化学参考值的探讨［J］.中国比较医学杂志，2004，14（6）： 355-358.

［8］娄成民.实验动物质量管理标准与检验检测技术实用手册［M］.贵阳：贵州科技出版社，2003：1168.

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［10］金莱，胡慧仙，何芳，等.血小板参数与成人急性白血病相关性研究［J］.中国临床保健杂志，2010，13（1）：84-85.