葛根素注射液对小鼠耐缺氧能力的实验研究

纪 慧 ，刘 富 ，田 华

1.齐齐哈尔医学院基础医学院办公室，黑龙江齐齐哈尔 161006；2.齐齐哈尔医学院解剖教研室，黑龙江齐齐哈尔 161006；3.齐齐哈尔医学院药理教研室，黑龙江齐齐哈尔 161006

葛根素(Puerarin)是由豆科植物野葛或甘葛藤根中提取的一种黄酮苷，其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖4′,7-二羟基异黄酮[1]。多项研究表明，葛根素具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用[2]。本研究拟观察葛根素注射液对小鼠在不同缺氧环境下的耐缺氧能力的影响，为进一步探讨其药效及药理作用奠定理论基础。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 昆明小鼠，体重18～22 g，雌雄不限，购自齐齐哈尔医学院动物室。

1.1.2 药品及仪器 刺五加注射液（黑龙江省珍宝岛制药有限公司，国药准字Z23020780）；葛根素注射液（河南海尔森药业公司，国药准字H20055583）；钠石灰（重庆鹏程工业公司钙化厂，国药准字H50021688）；亚硝酸钠（湖南尔康制药有限公司，国药准字H43020204）。磨口瓶，专业秒表，BL-310A精密天平等。

1.2 实验方法

1.2.1 葛根素注射液影响小鼠耐缺氧能力的急性试验 小鼠购进后，置于室温（20±2）℃，相对湿度 60%的动物室中，6只/笼，自由进食和饮水适应3 d。①取昆明小鼠60只，随机分为三组，即对照组（每只每次0.2 ml生理盐水）、刺五加注射液组、葛根素注射液组[150 mg/（kg·d）]，每组 20 只，三组小鼠分别腹腔注射相应药液，于给药后30 min将每只小鼠置于盛有10 g钠石灰的150 ml磨口瓶中，用凡士林涂抹瓶塞周围密封，立刻用秒表记录每只小鼠从瓶口密封到死亡的时间，作为小鼠在常压低张性缺氧条件下的耐受时间。②另将60只小鼠随机分成三组（同上），每组20只，三组小鼠分别腹腔注射相应药液，于给药后30 min每只小鼠腹腔注射0.4 ml 5%亚硝酸钠。用秒表记录每只小鼠自注射结束至死亡的时间，作为小鼠在亚硝酸钠中毒性缺氧条件下的耐受时间。

1.2.2 葛根素注射液影响小鼠耐缺氧能力的慢性试验 ①取80只小鼠，随机分成4组，每组20只，即对照组（每只每次0.2 ml生理盐水）、刺五加组[25 mg/（kg·d）]、葛根素注射液低剂量组[50 mg/（kg·d）]、高剂量组[150 mg/（kg·d）]。 各组分别每天腹腔注射相应药液，7 d后进行观察。各组末次给药后1 h，观察小鼠一般行为、口唇黏膜、皮肤颜色、呼吸情况等。将每只小鼠放入150 ml磨口瓶中（瓶内含10 g钠石灰），加盖密封后立即用秒表记录小鼠从瓶口密封到呼吸停止的时间，作为小鼠耐低张性缺氧的时间。比较低张性缺氧前后小鼠的一般情况、呼吸情况、口唇黏膜及皮肤颜色变化情况。②另取小鼠80只，随机分成4组（组别同上），每组20只，腹腔注射7 d后进行观察。各组末次腹腔注射相应药物后1 h，取单个小鼠观察呼吸频率及皮肤、黏膜颜色后，腹腔注射0.4 ml 5%亚硝酸钠，立即用秒表记录每只小鼠自注射结束至呼吸停止的时间，作为小鼠耐亚硝酸钠中毒性缺氧的时间。比较亚硝酸钠中毒性缺氧前后呼吸频率及深度、口唇黏膜颜色变化情况。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 形态学改变

在低张性缺氧条件下，小鼠呼吸加深加快，口唇黏膜、皮肤、血液为青紫色或紫蓝色。而亚硝酸钠中毒的小鼠呼吸很快就变得深快、口唇黏膜、皮肤、血液表现为棕色。

2.2 葛根素注射液影响小鼠耐缺氧能力的急性试验

急性试验结果表明，葛根素注射液可明显提高小鼠对常压低张性、亚硝酸盐中毒性缺氧的耐受能力，具有统计学意义，见表1。

2.3 葛根素注射液影响小鼠耐受缺氧能力的慢性试验

慢性试验结果显示，葛根素注射液低、高剂量组均可显著增强小鼠耐常压低张性、亚硝酸钠中毒性缺氧的能力。同时，在两种缺氧条件下，该药低剂量组延长小鼠耐缺氧的时间均显著长于该药高剂量组。见表2。

表1 葛根素注射液影响小鼠耐受缺氧能力的急性试验

表2 葛根素注射液影响小鼠耐受缺氧能力的慢性试验

3 讨论

葛根素是由葛根提取制成，主要化学成份为皂苷类化合物葛根黄酮，具有提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用[3-6]。

缺氧是一种劣性刺激，影响可使机体产生应激性反应。本实验通过急性、慢性试验观察葛根素注射液对小鼠耐缺氧能力的影响及机体病理变化特点。实验结果显示，葛根素注射液低、高剂量均能显著提高小鼠在低张性缺氧、亚硝酸钠中毒性缺氧条件下的耐缺氧能力，且葛根素注射液低剂量组效果好于高剂量组，提示葛根素注射液的耐缺氧能力并不呈剂量依赖性。

葛根素对缺氧损伤有一定保护作用，作用机制复杂，可能通过影响前列腺素代谢、清除自由基、抑制炎症的级联反应、提高组织对缺血的耐受性等途径抑制脑缺血损伤[7,8]。可延长小鼠在不同缺氧条件下的存活时间主要与葛根黄酮有关，葛根黄酮能改善微循环，扩张冠状动脉，增加脑和冠状动脉血流量，减慢心率，降低心肌耗氧指数而改善缺血心肌的代谢，从而增强耐缺氧能力。今后的工作将进一步研究葛根素抗缺氧作用及具体机制。

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[3]郭密,张仲君,徐寿水,等.葛根素抗缺氧及抗氧化作用的实验研究[J].中华老年心脑血管病杂志,2007,8(4)：279.

[4]刘军利.葛根素对心绞痛的治疗作用[J].中国医药导报,2008,5(24)：102-103.

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[6]历淑芬,刘海清,从晓东.葛根素注射液的药理作用研究进展[J].黑龙江医药,2010,23(4)：587-589.

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[8]郭密,韦倩,张仲君,等.中药葛根素抗缺氧及抗氧化的药效学研究[J].解放军保健医学杂志,2007,9(2)：104-105.