类风湿关节炎患者血清Vaspin变化及相关因素的分析

胡 伟

株洲中医伤科医院关节外科，湖南株洲 412000

内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一种新发现的脂肪细胞因子，它属于丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin家族[1]。先前的研究表明Vaspin与胰岛素抵抗（IR）、肥胖以及2型糖尿病（T2DM）的发病密切相关[2-4]。近年来Seeger等研究发现长期行血液透析治疗的患者血清C反应蛋白（CRP）水平与血清Vaspin水平呈独立负相关，而且是血清Vaspin浓度的独立预测因子[5]。Ladislav Senolt等研究也发现RA患者滑膜液Vaspin水平明显高于骨关节炎患者[6]。提示血清Vaspin可能与炎症反应有关，在RA的发病中具有重要的作用。然而Vaspin在RA发生和发展中的作用机制目前并不十分清楚。类风湿关节炎是一个累及周围关节为主的多系统炎症性的自身免疫病，病因不明。其特征为多个对称性周围关节的慢性炎症病变，最常侵犯的部位是四肢小关节，可引起全身的关节肿胀疼痛及功能障碍，病变呈持续、反复发作的过程。本实验中，观察RA患者与正常人血清中Vaspin及相关炎性细胞因子浓度的差别，分析RA与相关炎性细胞因子的关系，从而探讨Vaspin在类风湿关节炎发生过程中可能的作用机制，进一步阐明Vaspin的生理功能。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2009年9月～2010年12月我院门诊或住院的RA患者60例作为RA组，所有患者均符合美国风湿病学会（ARA）1987年修订的RA诊断标准。RA患者按病情活动分为RA活动亚组（32例）和非活动亚组（28例）。活动RA患者活动性指标包括：晨僵＞30 min；3个以上关节肿胀；5个或5个以上关节压痛；血沉＞30 mm/h。RA患者年龄18～75岁，平均（50.4±9.0）岁；BMI 18.2～29.0 kg/m2，平均（20.5±2.3） kg/m2。 正常对照组28例，为健康体检或自愿者，年龄20～70岁，平均（49.8±8.5）岁，BMI17.9～30.0kg/m2，平均（21.0±2.3） kg/m2。 两组的年龄、性别及BMI比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。所有患者及对照组均无高血压、糖尿病、肿瘤、妊娠、内分泌疾病及其他自身免疫病。

1.2 标本采集及检测方法

受试者隔夜14 h采集空腹静脉血5 ml。其中1 ml用15%EDTA-K2。抗凝后在ALIFAXS.P.A公司的TEST-I型全自动血沉仪上测定血沉（ESR），其余4 ml离心后分离血清，置-70℃冰箱保存用于其他项目检测。α1-酸性糖蛋白（α1-acid Glycoprotein，AAG）和 C-反应蛋白（CRP）测定采用免疫比浊法，在IMMAGE仪器上检测，试剂由美国贝克曼库尔特公司提供。类风湿因子（RF）测定采用免疫速率散射比浊法（上海申能公司）。肿瘤坏死因子α（TNF-α）测定采用放射免疫分析（RIA）法。空腹血清Vaspin浓度采用酶联免疫法测定（北京爱迪博生物科技有限公司药盒）。

1.3 统计学分析

数据处理采用SPSS 16.0软件完成，数据以均数±标准差（±s）表示，非正态分布数据均经过自然对数转换。组内自身对比与两组间对比用t检验，指标间的关系判定采用直线相关分析及多元线性回归分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 RA组与对照组生化指标比较

RA 组 ESR、AAG、CRP、RF、TNF-α 显著高于对照组（P＜0.01）。 见表1。

2.2 血清Vaspin水平比较

2.2.1 RA组与对照组血清Vaspin水平比较 RA组血清Vaspin水平明显高于对照组[（1.58±0.20） μg/L vs（0.71±0.09） μg/L]（P＜0.01）。 见图 1。

表1 RA组与对照组临床生化指标比较（±s）

表1 RA组与对照组临床生化指标比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.01

RA组对照组组别 例数 TNF-α（μg/L）60 28 2.37±0.80*0.90±0.33 AAG（mg/L）1328.2±272.6*491.0±180.70 CRP（mg/L）17.53±4.08*8.40±2.23 RF（IU/ml）29.01±2.64*9.05±1.84 ESR（mm/h）34.70±11.05*11.93±5.76

2.2.2 RA患者活动亚组与非活动亚组血清Vaspin水平比较 RA患者活动亚组血清Vaspin水平明显高于非活动亚组[（1.98±0.15 ） μg/L vs（1.32±0.12） μg/L]（P＜0.01）。 见图 2。

2.2.3 不同性别血清Vaspin水平比较 RA组和对照组中所有女性患者血清Vaspin高于男性患者，其中，RA组、对照组中女性患者血清Vaspin分别低于男性患者，但差异均无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 血清Vaspin水平与其他指标相关性分析

RA组血清Vaspin与TNF-α及CRP呈正相关（r=0.64，P＜0.01；r=0.47，P＜0.05）。 以血清 Vaspin 为因变量， 以 ESR、AAG、CRP、RF、TNF-α为自变量进行多元回归分析表明，RA组人群中TNF-α是影响空腹血清Vaspin水平的独立相关因素（YVaspin=7.350+0.082XTNF-α）。

3 讨论

近年来研究表明脂肪因子如 leptin、adiponectin、resistin、visfatin不仅参与糖脂代谢的调节，而且在调节免疫反应及炎症反应中具有重要作用并与RA发病及RA的严重程度密切相关[7-12]。Vaspin是由内脏脂肪组织分泌的一种属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的细胞因子，与肥胖和胰岛素敏感性有关。Ladislav Senolt等研究发现RA患者滑膜液Vaspin水平明显高于骨关节炎患者，滑膜液Vaspin水平与DAS28有相关的趋势[6]。提示血清Vaspin可能在RA患者炎症反应中发挥了重要的作用。为此，本研究测定了RA患者血清Vaspin水平，并与正常人群进行比较，结果发现RA患者血清Vaspin水平明显高于对照组，RA患者活动亚组血清Vaspin水平明显高于非活动亚组。这进一步提示Vaspin参与了RA的发病，在RA的发病机制中具有重要的作用。

类风湿关节炎（RA）是一种以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾病，其关节压痛、肿胀都与炎症存在一定关系，许多细胞因子参与了其病理过程，其中肿瘤坏死因子（TNF-α）被认为在RA的细胞因子网络中起中心作用，通过多种途径参与关节的炎症反应，促进滑膜细胞增殖和介导关节软骨及骨质损害；α1-酸性糖蛋白（AAG）和CRP一样，都属于急性时相反应蛋白，可反映RA病情的活动性，可作为判断RA疾病活动性的指标之一；CRP、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）均已被认为与本病活动性有一定关系。目前证据表明上述细胞因子在类风湿关节炎患者中均有异常升高。

本研究实验结果表明 RA 患者 ESR、AAG、CRP、RF、TNF-α较正常对照组明显增高，这与国内外相关研究结果类似。相关分析发现血清Vaspin水平与TNF-α、CRP成明显正相关，而与AAG、ESR、RF无相关性。多元回归分析表明血清TNF-α是影响RA患者血清Vaspin水平的独立相关因素。这些结果进一步提示Vaspin与RA的发生和发展可能具有重要的关系。但是促进炎症发生还是对炎症具有抑制作用现在也没有明确的定论。本研究通过查阅文献及归纳分析，推测Vaspin可能在RA患者炎症反应中对机体发挥一定的保护作用，其升高可能提示了其在炎症状态下的一种代偿机制，这与2型糖尿病患者及肥胖患者血清Vaspin水平升高是IR的一种代偿性机制相类似，但其作用的具体环节及机制尚需进一步研究。

实验中笔者还发现女性血清Vaspin水平较男性有升高趋势，但差异无统计学意义。直线相关分析也提示了血清Vaspin水平与性别不相关。这在文献中也有报道，但原因还未明了，可能是女性雌激素和孕激素对脂肪细胞分泌具有促进作用。

综上所述，本研究结果表明RA患者血清Vaspin水平明显升高，与炎症反应指标TNF-α、CRP成明显正相关。因此，笔者推测Vaspin可能是一种在RA患者炎症反应中对机体发挥保护作用的脂肪细胞因子，而其具体的作用机制，尚需进一步研究。

[1]Hida K,Wada J,Eguchi J,et a1.Visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor：a unique insulin-sensitizing adipocytokine in obesity[J].Proc Natl Acad Sci,2005,102(30)：10610-10615.

[2]Zvonic S,Lefevre M,Kilroy G,et al.Secretome of primary cultures of human adipose-derived Stem cells：modulation of serpins by adipogenesis[J].Mol Cell Proteomics,2007,6(1)：18-28.

[3]Kloting N,Berndt J,Kralisch S,et al.Vaspin gene expression in human adipose tissue：association with obesity and type 2 diabetes[J].Biochem Biophys Res Commum,2006,339(1)：430-436.

[4]Youn BS,Kloting N,Kratzsch J,et al.Serum vaspin concentrations in human obesity and type 2 diabetes[J].Diabetes,2008,57(2)：372-377.

[5]Seeger J,Ziegelmeier M,Bachmann A,et a1.Serum levels of the adipokine vaspin in relation to metabolic and renal parameters[J].J Clin Endocrinol Metab,2008,93(1)：247-251.

[6]Senolt L,Polanska M,Filkova M,et a1.Vaspin and omentin：new adipokines differentially regulated at the site of inflammation in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis,2010,69(7)：1410-1411.

[7]Lago F,Dieguez C,Gomez Reino J,et al.Adipokines as emerging mediators of immune response and inflammation[J].Nat Clin Pract Rheumatol,2007,3(12)：716-724.

[8]Tilg H,Moschen AR.Adipocytokines：mediators linking adipose tissue,inflammation and immunity[J].Nat Rev Immunol,2006,6(10)：772-783.

[9]Bokarewa M,Bokarew D,Hultgren O,et al.Leptin consumption in the inflamed joints of patients with rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis,2003,62(10)：952-956.

[10]Schaffler A,Ehling A,Neumann E,et al.Adipocytokines in synovial fluid[J].JAMA,2003,290(13)：1709-1710.

[11]Senolt L,Housa D,Vernerova Z,et al.Resistin is abundantly present in rheumatoid arthritis synovial tissue,synovial fluid,and elevated serum resistin reflects disease activit[J].Ann Rheum Dis,2007,66(4)：458-463.

[12]Brentano F,Schorr O,Ospelt C,et al.Pre-B cell colony-enhancing factor/visfatin,a new marker of inflammation in rheumatoid arthritis with proinflammatory and matrix-degrading activities[J].Arthritis Rheum,2007,56(9)：2829-2839.