栀子减压提取工艺实验研究

韩 丽， 韦 娟， 周子渝， 赵强强， 陈晓东， 杨 明，3

(1.成都中医药大学药学院中药材标准化教育部重点实验室，四川 成都611137;2.南京至成制药设备有限公司，江苏 南京210008;3.江西中医学院，江西 南昌330004)

1 前言

提取是中药生产最关键的工艺之一，中药提取过程中多采用水为溶媒，常压下提取温度相当于溶媒的沸点，水为100℃，不利于含热敏性有效成分中药的提取。由于溶媒的沸点是随外界大气压的降低而降低，在减压操作即负压条件下，可在较低的温度下使溶液处于沸腾状态而进行动态提取，这样既可保证药材中热敏性成分免遭高温煎煮破坏，又能减少许多大分子杂质如淀粉、鞣酸、黏液质等的析出，便于制剂的成型和稳定［1，2］。同时，通过减压控制温度提取，可以找到中药各类成分最适宜的沸腾状态下的提取温度，对于改进中药提取工艺现状具有重要意义。

减压提取具有提取温度低、效率高等特点，但目前研究报道较少，本实验选取栀子为研究模型，对栀子进行减压提取工艺初步研究，并与常用的回流提取法进行比较，期望为中药减压提取工艺的推广应用提供研究数据。

2 实验部分

2.1 材料与试药 岛津LC-10A高效液相色谱仪;SPD-10AVP紫外检测器;SCL-6A系统控制器;TC-100恒温箱;LC2000色谱数据工作站;KUUDOS SK250HP型超声波清洗器;BP211D AG电子天平;SHZ-Ⅲ型循环水式多用真空泵。栀子苷对照品，中国药品生物制品检定所(批号:110749-200613);栀子对照药材，中国药品生物制品检定所(批号:120986-200605)。乙腈:色谱纯;其余试剂均为分析纯。

2.2 方法与结果

2.2.1 样品制备 实验装置自制，通过真空泵及放气阀调节三颈瓶中的真空度及提取温度。见图1。

图1 减压提取装置

报道［3］，采用水为提取溶剂，依照表1所示条件分别在常压 100、减压40、50、60、70、80 ℃进行样品的制备:每份样品称取栀子50 g，第1次8倍量水提取1 h，第2次6倍量水提取1 h，合并滤液，定容至1 000 mL。

2.2.2 栀子苷含量测定(HPLC法) 依照中国药典2005年版测定［4］。色谱条件:色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱;依利特 ODS(250 mm ×4.6 mm)，5 μm，柱号:13180911908;乙腈-水(15:85)为流动相，检测波长238 nm，流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;栀子苷色谱峰与相邻峰达到基线分离，理论板数按栀子苷峰计算应不低于1 500。

2.2.2.1 绘制标准曲线 精密称取经硅胶干燥器干燥的栀子苷对照品10.63 mg，置于50 mL量瓶中，以甲醇溶解并稀释至刻度，作为贮备液;精密吸取3.0 mL置于10 mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，混匀，即得栀子苷对照品溶液(63.78 μg/mL)。分别精密进样 5、7.5、10、12.5、15 μL，照上述色谱条件测定峰面积积分值，以峰面积值(A)对进样量(C)进行回归，得到标准曲线y=452 744x-57 637、r=0.999 9。结果表明，栀子苷进样量在0.318 9～0.956 7 μg之间线性关系良好。

2.2.2.2 精密度实验 精密吸取对照品溶液和同一样品溶液各10 μL，按上述色谱条件，重复进样6次，其峰面积值的RSD分别为0.9%和1.2%，表明仪器精密度良好。

2.2.2.3 稳定性试验 精密吸取对照品溶液和同一样品溶液各 10 μL，按照上述色谱条件在 0，2，4，6，8 h 分别进样 10 μL，测定峰面积，结果RSD分别为1.3%和1.8%，表明标准品及样品溶液在8 h内基本稳定。

2.2.2.4 样品含量测定 精密量取2.2.1项下各栀子提取液1.0 mL，甲醇定容于25 mL量瓶，取适量溶液于EP管中，10 000 r/min离心30 min，取10 μL注入液相色谱仪测定峰面积，代入标准曲线中计算栀子苷含量，结果如表1所示。

2.2.3 干膏收率测定 取2.2.1项下制备的样品溶液25 mL于已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴浓缩至干，置105℃烘箱中干燥3 h，取出，冷却至室温，称重并计算干膏收率如表1所示。

表1 栀子常压回流及减压提取中栀子苷含量、干膏收率变化情况

2.2.4 薄层鉴别 参照中国药典2005年版测定［4］。取栀子苷对照品制备为1 mg/mL的对照品溶液;取栀子对照药材1 g，加50%甲醇超声40 min，滤过，制成对照药材溶液;取各提取样品1 mL，加入1 mL甲醇，轻摇混匀制备为样品溶液。以上溶液各点样10 μL，以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5:5:1:1)为展开剂展开，取出晾干后喷10%硫酸乙醇为显色剂，在相应位置有相同的斑点。

3 结论与讨论

3.1 结论 栀子苷含量方面:在真空度为0.07 MPa，提取温度为60℃时栀子苷的提取效率最高，且较常压回流提取含量相对提高10.4%。当温度高于60℃时栀子苷含量逐渐降低;在真空度过高、提取温度过低时提取效率亦不理想，表明温度对栀子苷的提取有一定影响，栀子提取有一最佳提取温度。

干膏收率方面:减压提取可不同程度降低干膏收率。在真空度为0.07 MPa，提取温度为60℃时干膏收率与常压回流提取比较，相对减少6.97%;且随着真空度的降低及提取温度的升高干膏收率依次增大。

薄层鉴别结果初步显示:与常压提取相比较，栀子减压提取成分基本保持一致。

3.2 讨论 随着中药新剂型不断朝着精细小的方向发展，对中药提取物的质量要求也越来越高，但是中药提取物，尤其是复方提取物往往存在体积大，黏性强，吸湿性强等特点，这些物理特性往往造成提取物贮存及制剂成型困难，解决以上问题的方法在于(1)分离纯化精制，即通过不断地提纯去除无效成分，富集有效成分;(2)辅料法，即通过加入功能性辅料改善其不良性质。以上两种方法各有利弊。本文所述的减压提取方法在不改变提取溶媒的条件下，较低温度下可增大热敏性有效成分的提取效率，降低导致提取物易吸湿、强黏性的大分子物质的提取率(表现为干膏收率下降)，并且提取设备简易、操作简单方便、费用低，特别适用于对热不稳定有效成分。减压提取是中药提取的一种新技术。

参考文献:

［1］陈晓东.中药减压提取法原理及突破点［J］.机电信息，2008，23:31-34。

［2］陈晓东.用于中药提取的减压提取装置［J］.机电信息，2005，16:55-57.

［3］谢 静，冷 静.中药栀子水提工艺研究［J］.中国药业，2008，17(21):43.

［4］中国药典［S］.一部.2005:173.