高效液相色谱法测定食品中的姜黄素

2011-01-22夏春

化学分析计量 2011年1期

夏春

(安徽国家农业标准化与监测中心，合肥 230051)

色素与食品的关系密不可分，色素赋予食品诱人的色泽，从而给消费者带来良好的感官质量和强烈购买欲。姜黄素(Curcumin)作为食品的着色剂一直为人们所利用，是国内外允许使用的重要天然食用色素之一。姜黄素(E100)是欧盟批准使用的食品添加剂，据2010年9月6日食品伙伴网讯：欧洲食品安全局根据欧洲委员会的要求，食品添加剂及营养强化剂科学委员会(ANS)被要求重新科学评估姜黄素(E100)作为食用色素的安全性。我国的国家标准GB 2760-2007[1]规定姜黄素可作为食用色素在人造黄油、碳酸饮料、胶基糖果、巧克力制品、冷冻饮品等食品中使用，同时规定了使用量。GB 2760-2007[1]规定姜黄在食品中最大使用量以姜黄素计。目前姜黄素的测定方法主要为薄层色谱和液相色谱法等[2-5]，我国目前尚未制定食品中姜黄素的检测方法标准，因此建立一种快速、简便、高灵敏的检测方法十分必要。为此笔者建立了高效液相色谱法测定食品中的姜黄素。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

高效液相色谱仪：附带LC20A型PDA检测器，日本岛津公司；

甲醇、乙腈：色谱纯；

乙腈、乙酸氨、正己烷：分析纯；

姜黄素对照品：纯度不低于99%，CAS-458-37-3；

姜黄素标准储备溶液：1 mg/mL，准确称取10 mg姜黄素对照品，以甲醇溶解定容至10 mL，于0～4℃避光保存，储存时间为6个月。

1.2 液相色谱分析条件

色谱柱：反相C18柱(250 mm×4 .6 mm，5 μm)，美国Agilent公司；流动相：乙腈(A)-0.05%乙酸氨水溶液(B)洗脱；检测波长：430 nm；柱温：30℃；流速：1.0 mL/min；进样量：20 μL。

1.3 实验方法

液态样品直接取样，固态样品置入粉碎机(或均质机)中粉碎均匀。

酒类、碳酸饮料等食品：取1 mL样品，超声脱气，以甲醇定容至10 mL，漩涡均匀，超声10 min，经0.45 μm滤膜过滤，作为测试液。

果蔬汁饮料等食品(含固态颗粒流体)：取1 mL样品，以10 000 r/min离心5 min，将清液转入25 mL试管中，加入10 mL甲醇，漩涡均匀，超声10 min，经0.45 μm滤膜过滤，作为测试液。

固态样品：称取5.0 g试样，置于50 mL具塞试管瓶中，加50 mL甲醇，漩涡均匀，超声提取10 min，冷冻离心(-10℃，10 000 r/min)10 min，取1 mL经0.45 μm滤膜过滤，作为测试液。

2 结果与讨论

2.1 检测波长选择

对姜黄素对照品进行紫外可见波长扫描，姜黄素在425 nm处有最大吸收峰，扫描图见图1。《食品添加剂姜黄色素》标准[6]指出在425 nm附近有最大吸收峰，因此方法选择425 nm作为检测波长，在该波长处检测灵敏度高、干扰小。姜黄素对照品色谱图见图2。

图1 姜黄素对照品的波长扫描图

图2 姜黄素对照品的液相色谱图

2.2 提取方式的选择

姜黄素溶于甲醇、乙醇、丙酮、冰乙酸等试剂，不溶于水、乙醚等试剂。进行提取溶剂选择试验，几种试剂对姜黄素的提取率基本满足试验要求,其中甲醇的提取率最高，因此提取试剂选择甲醇。

用同一试剂分别采用索氏法、加热回流法、超声波振荡法对供试品进行提取[4,7]，结果用前两种方法试验时间较长，操作较繁琐；而采用超声波振荡法提取效果最佳。因此实验选择超声波振荡提取法。

2.3 线性方程、相关系数及检出限

分别吸取适量姜黄素标准贮备液，用甲醇稀释成浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/mL的系列标准使用溶液，进样分析，以峰面积为纵坐标(y)，姜黄素浓度为横坐标(x)进行线性回归，在0.5～50.0 μg/mL范围内，得到良好的线性关系,线性方程为y=7 440x-29 500，相关系数r=0.999 8。根据信噪比S/N=10,计算姜黄素的检出限为1 mg/kg。