不同剂量60Co γ辐照对生骨胶囊的灭菌效果比较

周娟，贾恩礼，孔宪波

不同剂量60Co γ辐照对生骨胶囊的灭菌效果比较

周娟，贾恩礼，孔宪波

生骨胶囊；60Co辐照；细菌；霉菌；灭菌

60Co辐照主要是破坏细菌细胞中的DNA和RNA，受损的DNA和RNA分子发生降解，失去合成蛋白质和遗传功能，使细胞死亡。60Co辐照灭菌较之高温高压或化学方法灭菌，可避免对药物有效成分的破坏。在常温下进行，既不使挥发性成分损失，又不会形成有害成分残留于药品中，且一次处理量大。采用合理剂量辐照，对中成药色、香、味及化学成分等影响甚微，对环境也不会造成污染。此外，因其穿透力强，可将包装完好的药品进行灭菌，以避免拆包后再次污染[1]。因此，利用60Co进行辐照很受药品生产商的青睐，且随着微生物限度检查被载入《中国药典》，利用60Co进行辐照灭菌在医疗行业应用也越来越广泛。

辐照灭菌有很多优点，但也存在一定的安全隐患，关键在于辐照剂量的选择。应对被辐照的药物建立定性定量指标，以最小的剂量，达到最大的灭菌效果，保证药物成分及其含量不变，保证药物质量。生骨胶囊是用于治疗骨坏死、骨折、骨折迟缓愈合、骨质疏松等骨病的全军扩大调剂使用制剂。该制剂为纯中药制剂，能达到补肾生骨，活血化瘀，行气镇痛之功效。本文拟利用0、2、4、6、10、15 kGy的钴-60γ射线对中药制剂生骨胶囊进行辐照，并通过对不同辐照剂量下生骨胶囊细菌总数、霉菌总数进行检测，确定既能有效灭菌又安全可靠的辐照剂量。

1 方法

随机选取包装完好的生骨胶囊（批号090907，规格：0.4 g/粒，60粒/瓶，100瓶/箱），放入专用灭菌室,药品距60Co γ辐射源在60 cm左右。辐照剂量分别为2、4、6、10、15 kGy。未辐照的作为对照，辐照单位是山东省农业科学院辐照中心。

供试液制备：用随机取样法，取灭菌前后生骨胶囊60粒，以无菌操作将生骨胶囊内容物取出，称取10 g药粉置于100 ml 0.9%的无菌NaCl溶液中，置磁力搅拌器上搅拌混匀后，静置，离心（500 r/min）5 min，取全部上清液，用0.9%的无菌NaCl溶液进行系列稀释，稀释级别分别为102、103、104。

取1 ml供试液注入平皿中,将融化的约45℃普通营养琼脂（检测细菌总数时）或玫瑰红钠琼脂（检测霉菌总数时）倾入平皿内，混匀。待琼脂凝固后,倒置于37℃培养箱中，培养48 h（测细菌），或28℃培养箱中培养72 h（测霉菌）,计数菌落数。每个稀释级做3个重复。

2 结果

生骨胶囊进行不同剂量辐照后，随着辐照剂量的增大，细菌数和霉菌数逐渐降低，灭菌率逐渐升高。霉菌较细菌对辐照剂量敏感，2 kGy时灭菌率已到94.6%，但此时霉菌数还超标。当剂量达到4 kGy时霉菌指标符合药典规定（<100个/g），平均灭菌率达到了98.3%。当剂量达到6 kGy时细菌微生物限量检测指标符合药典规定（<1000个/g），平均灭菌率达到了99.9%。当剂量达到10 kGy后，已无可培养的细菌、霉菌。因此，笔者认为6 kGy的剂量即可达到药典规定的微生物限量检测指标。见表1。

3 讨论

本文结果表明在0～15 kGy范围内随着辐照剂量的增大，细菌数和霉菌数逐渐降低，且霉菌较细菌对辐照剂量敏感。10 kGy的剂量可杀灭生骨胶囊中所有可培养的细菌和霉菌。

本文结果表明生骨胶囊经过6 kGy的辐照后，其微生物限量检测指标符合药典规定，细菌、霉菌灭菌率分别达到了99.9%、100%。生骨胶囊在长期的临床应用过程中从未发现过不良反应。1983年世界食物法规委员会（CAC）已接受FDA/IAEA/WHO联合专家委员会以下结论：10 kGy以下辐射食品是安全的[1]。因此，对比其它灭菌方法，综合灭菌效果，笔者认为用6 kGy60Co辐照对纯中药制剂生骨胶囊的灭菌是值得应用的。

由于60Co辐照，操作简便，速度快，比较经济，因而近年来在医药食品行业得到了广泛应用。然而不当的辐照会对食品的颜色、味道、营养、成分产生一些不良反应。因此，从微生物的限量检测角度考虑，只要各项微生物指标合格，不要刻意加大辐照剂量。对于产品卫生质量把关，药品生产者一定要抓好生产过程中的各个环节，不能单纯依靠加大辐照剂量进行灭菌。对于不同的产品，因根据药品的活性成分、剂型、微生物的含量、安全等各方面的因素出发，综合考虑，选择合适的辐照剂量。

本实验只是利用细菌、霉菌含量对辐照前后灭菌效果进行研究，而不同微生物菌群对辐照可能具有不同的响应效果，因此有必要开展辐照对本制剂中其它微生物种类灭菌效果的研究。

[1]李继珊.60钴辐照对中成药灭菌效果的检测[J].中国消毒学杂志，2002，19（1）：36-37.

[2010-09-14收稿，2010-10-20修回]

Q93.332

B

250014山东济南，济南军区联勤部疾病预防控制中心（周娟，贾恩礼，孔宪波）

表1 不同剂量60Co γ辐照生骨胶囊含菌量及灭菌率

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[本文编辑：宋敏]