归胃经寒性中药对胃热症大鼠体征的影响

黄雪群， 李小梅， 李续娥

(1.华南师范大学广东省植物发育生物工程重点实验室，广东广州 510631；2.清远职业技术学院，广东清远511510； 3.广州大学生命科学学院，广东广州 510511)

归胃经寒性中药对胃热症大鼠体征的影响

黄雪群1,2， 李小梅1,3， 李续娥1*

(1.华南师范大学广东省植物发育生物工程重点实验室，广东广州 510631；2.清远职业技术学院，广东清远511510； 3.广州大学生命科学学院，广东广州 510511)

用干姜水煎剂连续给大鼠灌胃15 d，复制胃热症大鼠模型，再分别以黄连、蒲公英、枳实水煎剂灌胃治疗10d.比较大鼠的饮食量、大小便、舌色舌苔变化，用放射免疫分析法测定大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)的浓度变化.结果显示，造模后大鼠呈现舌红苔黄(Plt;0.05)、饮食量增加(10%以上)、大小便量减少(10%以上)、且大便多数干结、小便颜色加深(Plt;0 .01)、IL-8显著升高(Plt;0.01).黄连、蒲公英、枳实可改善上述胃热症的指标，且寒性程度愈高、治疗效果愈好.经分析得知，黄连、蒲公英、枳实通过降低胃热症大鼠血清中的IL-8，改善胃热症大鼠的体征.

黄连； 蒲公英； 枳实； 胃热症； 体征

中医胃热症是指火热炽盛、雍滞于胃所致的症候，证见胃脘灼热或灼痛、口渴喜冷饮、牙龈肿痛、便结尿黄、舌红苔黄等症[1].按照中药药性的寒热与治则关系“寒者热之，热者寒之”，本试验拟研究归胃经寒性中药黄连、蒲公英、枳实对胃热证大鼠体征的影响，并通过检测大鼠血清中IL-4、IL-8的变化来探讨3味中药影响胃热症大鼠体征的机理.

1 材料与方法

1.1动物及分组

SD大鼠120只，SPF级，雄性，体质量220～280 g，2～3月龄，由广州中医药大学实验动物中心提供(合格证号：粤监证字2005A031号)，随机分成8组(每组15只)：空白对照组，模型对照组，黄连大、小剂量组，蒲公英大、小剂量组，枳实大、小剂量组.

1.2中药制剂及剂量

干姜(ZingiberofficinaleRosc.)、黄连(CoptischinensisFranch.)、蒲公英(TaraxacummongolicumHand. Mazz.)、枳实(CitrusaurantiumL.)均购自广州寿生堂大药房，由广东药学院药用植物教研室鉴定.按传统中药水煎法分别将各味药用蒸馏水浸泡煮沸后，改文火继续煮30 min成煎剂.取煎剂上清液经过滤除菌后分别浓缩成含干姜、黄连、蒲公英、枳实1.0、0.1、0.5、0.5 kg/L的质量浓度，置于4 ℃冰箱保存备用.黄连、蒲公英、枳实大剂量和小剂量分别按人用剂量[2]的10倍和5倍计，则有：黄连(0.6、0.3 g/kg)、蒲公英(2.0、1.0 g/kg)、枳实(1.0、0.5 g/kg).

1.3胃热证模型的建立及治疗

将大鼠置于温度为18～27 ℃，湿度为45%～75%，气流10～25 cm/s，噪音低于50 dB(A)的安静环境中.除空白对照组，其余各组按5 g/kg 的剂量灌胃1.0 kg/L的干姜水煎剂(空白对照组则灌胃等量生理盐水)连续15 d造模[3].大鼠造模后,黄连、蒲公英、枳实的大剂量和小剂量组以设定的剂量连续灌胃治疗10 d(空白对照组和模型对照组灌胃等量生理盐水).

1.4体征的测定

食量、饮水量及大小便均以24 h为时间单位，分别于造模前、造模后、治疗后连续观测3 d，然后分别取其平均值为各指标测定值.进行舌象观测时，用灌胃针的针管拉开大鼠上下门齿，使其自然舒展地将舌伸出口外，充分暴露，在自然光下肉眼直视舌象，舌色分为淡白舌、淡红舌、红舌、红绛舌、青紫舌，分别记为0、1、2、3、4级；舌苔特征分为薄白苔、白腻苔、薄黄苔、黄腻苔，分别记为1、2、3、4级[4].

1.5IL-4、IL-8的测定

治疗结束后自大鼠腹主静脉取血样，分离出血清，用放射免疫分析法测定大鼠血清中的IL-4、IL-8的变化.所用仪器为上海原子核研究所日环仪器一厂SN-695B型放免γ测量仪，IL-4、IL-8试剂盒(批号050826)由解放军总医院放免所提供.测定过程在广州中医药大学核医学教研室进行.

1.6数据分析的方法

采用t检验分析饮食量、大小便、IL-4、IL-8等指标数据；采用卡方(2)检验分析舌色舌苔数据.

2 结果

表1为归胃经寒性中药对胃热症大鼠饮食量、大小便的影响，表2为归胃经寒性中药对胃热症大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影响.可见造模后，大鼠食量及饮水量均增加10%以上，而大小便量则减少10%以上，且大便多呈干结状、小便颜色加深(Plt;0.01)，呈现舌红苔黄(Plt;0.05)，IL-4降低不明显、IL-8显著升高(Plt;0.01)、IL-4/IL-8显著降低(Plt;0.01).使用黄连、蒲公英、枳实治疗后，胃热症大鼠的舌色、舌苔得到明显改善(Plt;0.05)，日饮水量显著降低(Plt;0.05 或Plt;0.01)，尿液颜色明显变淡(Plt;0.01)，大便粒数显著增加(Plt;0.05 或Plt;0.01)，大便干结得到改善，日尿量及日食量有些改善但不明显.黄连和蒲公英能使胃热证大鼠血清中IL-8明显降低(Plt;0.01)、IL-4/IL-8显著升高(Plt;0.01)，黄连尚能使胃热症大鼠血清中IL-4明显增加(Plt;0.05 或Plt;0.01).

表1 归胃经寒性中药对胃热症大鼠饮食量、大小便的影响

注：与空白对照组比较，1)Plt;0.05、2)Plt;0.01；与模型对照组比较，3)Plt;0.05、4)Plt;0.01(表2同).

表2 归胃经寒性中药对胃热症大鼠舌色、舌苔及IL-4、IL-8的影响

比较表1、表2中黄连、蒲公英、枳实对胃热症大鼠的治疗效果，可以看到：除日尿量及尿液吸收值外，其它指标的治疗效果从大至小依次为黄连、蒲公英、枳实.

3 讨论

3.1胃热证大鼠模型的建立

从本研究所复制的胃热症大鼠体征看，其达到了文献[3]中胃热症体征的评定指标：日饮水的体积分数增加10%以上，舌红；食量的质量分数增加10%以上；粪便的质量分数减少10%以上，有干结出现；小便的体积分数减少10%以上，小便较造模前变黄；符合《中药新药临床研究指导原则》中胃热症诊断的体征评定指标:主症为口渴喜饮、舌红，次症为消谷善饥、大便秘结、小便短黄.本试验胃热症大鼠的血清IL-8显著增高亦与文献[5]结果一致.表明本试验造模成功.

3.2黄连、蒲公英、枳实对胃热证的治疗作用

黄连清热燥湿，因其长于苦降而能泻火下气，可使胃热胃火速清而胃气能降；蒲公英为中医传统清热解毒药物，在清解脏腑热毒病症方面有显著疗效，用于胃病热象者时可清泻胃火；枳实理气消滞，在治疗胃肠动力障碍性疾病中疗效显著，为消积导滞之要药.它们的功效有所区别，但均归胃经，三者的寒性程度以黄连为大寒、蒲公英为中寒、枳实为微寒.本研究以它们的水煎剂治疗胃热症大鼠后，其体征得到明显改善，且改善程度以黄连最强、蒲公英次之、枳实再次.说明三者均可有效治疗胃热症，且治疗效果与它们的寒性程度相对应.

3.3IL-4、IL-8指标对胃热症大鼠的影响

IL-8是一种强大的中性粒细胞趋化和激活肽,主要由单核-巨噬细胞、内皮细胞、细菌成分或产物刺激过的上皮细胞等产生.它能激活中性粒细胞脱颗粒引起呼吸爆发,被认为是中性粒细胞在损伤组织中浸润的主要介导者,已被证实与许多炎症性疾病有关[6].IL-4是由Th2细胞产生的一种重要的抑炎性细胞因子，对机体的免疫功能和炎症过程具有重要的调节作用[7].文献[8]报道，黄连、蒲公英、枳实对胃热症大鼠的胃黏膜炎细胞浸润有治疗作用，可有效促进其受损胃黏膜的修复，且寒性程度愈强，效果愈好.本试验结果表明，造模后血清中IL-8显著升高、IL-4降低不显著、IL-4/IL-8显著降低，是导致胃黏膜发生了以中性粒细胞为主的炎细胞浸润而呈现出炎性变化的重要原因；黄连、蒲公英、枳实按寒性程度大小依次使胃热症大鼠的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8得到相应程度的改善，从而改善了胃黏膜的炎性损害，使胃热证大鼠的胃黏膜得到修复，并呈现出寒性程度愈强、效果愈好.

同时IL-8是消化性溃疡寒热辨证关系的重要指标，消化性溃疡热症组IL-8均值明显高于寒证组[9].因此IL-8的明显升高，是引起模型大鼠饮食、大小便、舌色、舌苔等体征的变化而呈现出胃热症的原因；黄连、蒲公英、枳实按寒性程度大小依次使胃热症大鼠的IL-8得到相应程度的改善，从而有效治疗了胃热症，且治疗效果与它们的寒性程度相对应.

综上所述，黄连、蒲公英、枳实通过影响胃热症大鼠血清中的IL-8、IL-4、IL-4/IL-8 ，改善胃热症大鼠的体征，发挥对大鼠胃黏膜炎细胞浸润的治疗作用.本试验的研究结果将同归胃经寒性中药黄连、蒲公英、枳实对胃热症大鼠胃部生理机能影响的数据[8,10-11]合并，为建立归胃经寒性中药的寒凉程度与胃热症动物体征及胃部生理机能之间的因子分析模型提供数据.

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Keywords： Rhizoma Coptidis; Herba Taraxaci; Fructus Aurantii Immaturus; stomach-heat syndrome; general symptom

【责任编辑 成 文】

INFLUENCESOFCOLDCHINESEHERBALMEDICINEWITHSTOMACH-MERIDIANTROPISMONGENERALSYMPTOMOFRATSWITHSTOMACH-HEATSYNDROME

HUANG Xuequn1,2, LI Xiaomei1,3, LI Xu’e1*

(1. Guangdong Key Lab of Biotechnology for Plant Development, South China Normal University, Guangzhou 510631, China; 2. Qingyuan Polytechnic College, Qingyuan, Guangdong 511510, China; 3. School of Life Science, Guangzhou University, Guangzhou 510511, China)

Rats were fed with decoction of Rhizoma zingiberis for 15 days to induce the model of stomach-heat syndrome. After modeling, the decoctions of Rhizoma Coptidis (RC), Herba Taraxaci (HT) and Fructus Aurantii Immaturus (FAI) were given respectively to corresponding groups for 10 days. After the treatment, the amount of the daily diet, volume and absorbance of urine, pellet number and moistness of excrement, color and coating degree of tongue were recorded, the contents of interleukin-4 (IL-4) and interleukin-8 (IL-8) in serum were measured by radioimmunoassay. The results showed: the model rats had yellow coating and red tongues (Plt;0.05), amount of daily diet were increased (over 10%), urine volume and excrement pellet number were decreased (over 10%), the urine color became yellow (Plt;0.01), the excrement became dry, and the content of IL-8 increased noticeably (Plt;0.01). RC, HT and FAI could improve the indexes observed above, and the colder the nature, the better the effects. It can be concluded that the reason why RC, HT and FAI relieve the general symptom of rats with stomach-heat syndrome is that they can decrease the content of IL-8 in serum.

2009-09-07

广东省自然科学基金资助项目(7005844)

黄雪群(1977—)，女，广东连州人，华南师范大学2004级在职硕士研究生，清远职业技术学院讲师，Email:huangxuequn@163.com；李续娥(1964—)，女，陕西兴平人，博士，华南师范大学教授，主要研究方向：中药药性理论，Email:lixuescnu@sohu.com.

*通讯作者

1000-5463(2010)01-0088-04

R285.5

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