褐蘑菇提取物对四氧嘧啶型糖尿病小鼠降血糖活性研究

刘 莹,刘 政,黄 静,李芳亮

辽宁工程技术大学理学院,辽宁阜新 123000

褐蘑菇提取物对四氧嘧啶型糖尿病小鼠降血糖活性研究

刘 莹,刘 政,黄 静,李芳亮

辽宁工程技术大学理学院,辽宁阜新 123000

本文通过对褐蘑菇提取物的降血糖作用研究,旨在开发降血糖药物新资源。试验数据显示褐蘑菇提取物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。褐蘑菇提取物高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是 16.9%,20.2%和 15.1%.阳性对照组的降糖率是 25.1%.褐蘑菇提取物中剂量组降糖效果要优于高、低剂量组。

褐蘑菇提取物;降血糖;糖尿病

褐蘑菇 (Agaricus bisporus)是双孢蘑菇的近缘种,辽宁田园实业有限公司独家生产的品种。是欧美市场最畅销的食用菌名贵品种,其特点是菌盖丰满,肉质感强,食用时,即有肉的口感,又没有肉类对人体的危害,被誉为“素牛排”。在疯牛病和禽流感多发时期,褐蘑菇作为肉的替代品倍受青睐,褐蘑菇除具备一般蘑菇所具有的高蛋白、低脂肪、低胆固醇特点外,还具有提高人体免疫力、防癌抗癌、保肝护肝、美容驻颜等作用。常食用褐蘑菇对人体健康非常有益[1]。

但有关褐蘑菇降血糖的研究国内外文献报道很少[2]。本文选用褐蘑菇作为研究材料,对褐蘑菇提取物有无降血糖的生物活性进行研究,为褐蘑菇药用价值研究奠定一定的基础。

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

KDC-160 HR型高速冷冻离心机 (沈阳博腾仪器设备公司)、岛津 GC-2010气相色谱仪(沈阳博腾仪器设备公司)、UV-1200紫外可见分光光度计 (上海精密仪器公司)、ATN-300凯氏定氮仪 (上海宏纪仪器公司)

1.2 试剂

Serharose CL-6B、NaOH、乙醇、苯酚、硫酸、3,5-二硝基水杨酸(购于沈阳化玻试剂公司)

1.3 材料

褐蘑菇是辽宁田园实业有限公司提供;雄性昆明小鼠(体重 18～22 g)

1.4 褐蘑菇提取物的提取方法[3]

将褐蘑菇滤渣(经过乙醇和水分别提取小分子和多糖)用 0.5 mol/LNaOH浸提三次,合并滤液,离心,上清液浓缩后加入 3倍体积 95%工业酒精醇沉,静置 24 h,离心,再经干燥得到粗提取物。褐蘑菇碱提水溶性提取物的收率为 29.3%.

2 实验方法

2.1 褐蘑菇提取物对正常小鼠血糖的影响[4]

取雄性昆明小鼠 40只,随机分为 4组,即空白对照组,褐蘑菇提取物高、中、低剂量组 (100,200, 400 mg/kg),连续灌胃 7 d,空白对照组在同样条件下灌胃生理盐水,末次给药前 12 h禁食 (不禁水),末次给药后 2 h,摘眼球取血,分离血清,采用血糖试剂盒测定空腹血糖值。

2.2 褐蘑菇提取物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠血糖的影响[5]

取雄性昆明小鼠 80只。从中随机抽取小鼠 70只,小鼠禁食 16 h(自由饮水),每只以 70 mg/kg尾静脉注射新鲜配制的四氧嘧啶溶液。饲养 72 h后,断尾取血,取造成高血糖模型 (禁食 12 h,血糖大于11.1 mmol/L)者,随机分为 5组,即模型对照组,阳性对照组 (消渴丸组,600 mg/kg),褐蘑菇提取物高、中、低剂量组 (100,200,400 mg/kg),另 10只作为正常对照组。褐蘑菇提取物组以褐蘑菇提取物溶液连续灌胃 7 d,模型对照组与正常对照组以生理盐水连续灌胃 7 d,阳性对照组灌胃消渴丸溶液连续 7 d。末次给药前 12 h禁食 (不禁水),末次给药后 2 h,摘眼球取血,分离血清,采用血糖试剂盒测定空腹血糖值。

2.3 血糖的测定方法[6](血清葡萄糖氧化酶法)

(1)原理:葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸内酯,并产生一分子过氧化氢。

在过氧化物酶作用下,过氧化氢分解,将无色的4-氨基安替比林偶联酚,氧化缩合生成红色的醌类化合物。其颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。在 505 nm测定吸光度,与标准管比较可计算血糖浓度。

(2)操作:取 3支试管,按表 1进行操作。置于37℃水浴中,保温 15 min钟,用分光光度计波长505 nm,以空白管调零,分别读取标准管及测定管吸光度。用此公式计算:

表 1 葡萄糖测定结果Table 1 The results of glucose

3 褐蘑菇提取物调节小鼠血糖的结果与讨论

3.1 褐蘑菇提取物对正常小鼠血糖的影响

对正常小鼠连续灌胃褐蘑菇提取物 7 d,测此提取物对正常小鼠血糖的影响,实验结果见表 2。

表 2 褐蘑菇提取物对正常小鼠血糖的影响Table 2 The impact of brown mushroom extract base of the normal blood sugar in mice

表 2的结果表明,灌胃褐蘑菇提取物对正常小鼠血糖有降低作用,褐蘑菇提取物高、中、低剂量组与空白对照组相比,均到达显著水平 (p<0.05),其中褐蘑菇提取物中剂量组的降血糖效果要优于高、低剂量组。

3.2 褐蘑菇提取物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠血糖的影响

褐蘑菇提取物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠的影响,结果如下表 3所示。

表 3 褐蘑菇提取物对四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠血糖的影响Table 3 The impact of brown mushroom extract base of alloxan-induced tetraoxypyrimidine blood sugar in diabetic mice

由表 3的实验结果可见,褐蘑菇提取物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。褐蘑菇提取物高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降血糖率分别是 16.9%,20.2%和 15.1%。同时,表中数据显示褐蘑菇提取物中剂量组降血糖效果要优于高、低剂量组。

4 结论

本论文通过对碱提褐蘑菇提取物降血糖作用的研究,得出实验结果如下:

4.1 褐蘑菇提取物能显著降低四氧嘧啶所制备的糖尿病小鼠血糖浓度。

4.2 褐蘑菇提取物高、中、低剂量组对糖尿病小鼠的降糖率分别是 16.9%,20.2%和 15.1%.同时,从数据中能够看出褐蘑菇提取物中剂量组降糖效果要优于高、低剂量组。有无临床应用价值有待进一步深入研究。

1 Liu Y(刘莹).Nutritional component analysis and corn straw material for cultivation research of portobello mushroom. NortheastNormalUniv(东北师范大学),PhD.2007.

2 Liu Y(刘莹),Zhang LP(张丽萍),Study on methods of deproteinization from portobello mushroom polysaccharide. Guangdong Agric Sci(广东农业科学),2008,221:114-115.

3 FuBQ(傅博强),XieMY(谢明勇),Zhou P(周鹏).A survey of the studies on the extraction,purification,composition and pharmaceutical effectsof tea polysaccharide.J Nanchang Univ,Nat Sci(南昌大学学报,理科版),2001,25:358-364.

4 Wang TX(王庭欣),Zhao W(赵文),Jiang DS(蒋东升). The hypoglycemic effect of laminarina japonica polysaccharides in diabetic mice.Acta Nut Sin(营养学报),2001,23: 137-139.

5 Li FC(李福川),Tang ZH(唐志红),Cui BW(崔博文). Hypoglycemic activity of three polysaccharides from laminaria japonica.Chin J M arineD rugs(中国海洋药物),2000,19 (5):12-15.

6 Yu j(余杰),Cui PJ(崔鹏举),Cen MZ(陈美珍).Selenium-enriched fer mentation mycelia of Coprinus comatus enhance the antihyper-glycemia and antioxidant activities in alloxan-induced diabetic mice.M ycosystema(菌物学报), 2009,28:120-128.

Brown M ushroom Extract Falls the Blood Sugar Activeness Research to the Alloxan D iabetic M ice

L IU Ying,L IU Zheng,HUANG Jing,L I Fang-liang
B iological Science and Engineering Departm ent,Liaoning Technological University,Liaoning,Fuxin 123000,China

This article base on the research of brown mushroom hypoglycemic activity,in order to development new resources of Hypoglycemic drug.Test data show that the brown mushroom extract can significantly reduce the prepared alloxan diabetic mice blood glucose levels.Brown mushroom extract high,medium and low-dose group of diabetic mice hypoglycemic rateswere 16.9%,20.2%and 15.1%.Positive control group of hypoglycemic rate is 25.1%.Brown mushroom extract hypoglycemic effect ofmiddle dose group is superior to high-and low-dose group.

brown mushroom extract;regulate blood sugar;diabetic

1001-6880(2010)02-0323-03

2009-07-20 接受日期:2009-10-26

国家发改委重点资助项目子课题:发改办工业[2006] 1852号

＊通讯作者 Tel:0418-6811582;E-mail:liuyingfx02@126.com

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