五灵脂的脂溶性成分GC-MS分析△

杨琦，赵岩，陈文学，王健，王寅秀，张连学

（吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118）

化学成分

五灵脂的脂溶性成分GC-MS分析△

杨琦，赵岩，陈文学，王健，王寅秀，张连学*

（吉林农业大学中药材学院，吉林 长春 130118）

目的：研究五灵脂中的脂溶性成分及相对含量。方法：采用连续回流提取法提取，GC-MS法测定相对含量。结果：鉴定出42种化合物，其中脂肪酸15种，占脂溶性成分总含量的49.162%，非脂肪酸类成分27种，占脂溶性成分总含量的44.184%。结论：用该方法快捷可靠，可对中药五灵脂进行质量评价。

五灵脂；气相色谱-质谱联用；脂肪酸；含量测定

五灵脂为脊索动物门哺乳纲鼯鼠科（Petauristidae）复齿鼯鼠Trogopterus xanthipesMilne-Edwards的干燥粪便，主产于山西、河北等省及北京市郊，湖北、四川等省亦有少量饲养，全年均可在岩洞或石缝周围寻找收集［1］。五灵脂主要有效成分为五灵脂酸，为异海松酸的衍生物；并含邻苯二酚、苯甲酸、3-蒈烯-9，10-二羧酸、尿嘧啶、间羟基苯甲酸、原儿茶酸、次黄嘌呤、尿囊素、L-酪氨酸［1］。五灵脂性温，味咸、甘，无毒，入肝经。具有疏通血脉，散瘀止痛的功效，是妇科要药。主治血滞、经闭、腹痛；胸胁刺痛跌扑肿痛和蛇虫咬伤等症。魏垠等［2］利用同时蒸馏萃取法（SDE）提取五灵脂中的挥发性组分，得到化合物的种类主要为醇类（10种），酮类（8种），醛类（6种），烯类（5种），酸类（4种），酚类（4种）。目前对于五灵脂的脂肪酸的研究尚未见报道，因此本文主要对五灵脂脂肪酸及其他脂溶性成分进行了GC-MS分析。

1 材料

1.1 样品

本样品2009年6月份采于河北省，经吉林农业大学中药材学院张连学教授鉴定为五灵脂。

1.2 仪器与试剂

石油醚、苯、甲醇、氢氧化钾均为分析纯，超纯水，气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司），HH-6B数显恒温水浴锅（泰特牌），RE-52AA旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），索氏提取器。

2 方法

2.1 五灵脂脂肪酸成分提取

取干燥至恒重的五灵脂，精密称取45.03 g置于索式提取器中，以石油醚为溶剂提取8 h，旋转蒸发回收石油醚，得到油状物。

2.2 脂肪酸的甲酯化

加入4 mL苯－石油醚（1∶1）混合溶剂于油状物中使之溶解，将其置于25 mL具塞试管中，再加入0.4 mol·L－1氢氧化钾－甲醇溶液4 mL，混匀，40℃恒温水浴30 min，然后加入10 mL超纯水，静置24 h，待其完全分层后，取上清液作色谱分析试样。

2.3 脂肪酸成分的GC-MS分析条件

2.3.1 气相色谱条件 RTX-5MS型弹性石英毛细管色谱柱（0.25 mm×30 m，0.25μm）；进样口温度为250℃；升温程序：从80℃开始，先以10℃·min－1升至200℃，再以1℃·min－1升至220℃，220℃维持2 min，然后以8℃·min－1升至280℃，280℃再维持3 min；载气为高纯度氦气；柱内载气流量1.26 mL·min－1；分流比为20∶1；进样量2μL；汽化室温度为250℃。

2.3.2 质谱条件 EI离子源，电子能量70 eV；离子源温度200℃；接口温度250℃；溶剂延时4 min；倍增器电压0.9 kV；扫描范围40～600 amu。

3 结果与分析

在上述实验条件下，用毛细管气相色谱法从五灵脂中分离出组分。以面积归一法定量分析各成分的相对质量分数，按上述GC-MS分析条件对五灵脂成分进行分析，得其总离子流图如图1所示。

图1 五灵脂脂溶性成分总离子流色谱图

总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图，经过质谱计算机数椐系统检索，人工谱图解析，按各色谱峰的质谱裂片图与文献核对，查对质谱资料［3-6］，对基峰、质荷比和相对丰度等方面进行比较，分别对各色谱峰加以确认，综合各项分析鉴定，确定出五灵脂脂肪酸中的化学成分，结果见表1。

如表1所示，共鉴定出15种脂肪酸，其中饱和脂肪酸10种，不饱和脂肪酸5种。

除脂肪酸成分外，五灵脂中还含有醇、醛、酸等成分，对临床应用也有一定价值，共鉴定出27种非脂肪酸成分，见表2。

表1 五灵脂脂肪酸成分组分及相对含量

表2 五灵脂非脂肪酸成分组分及相对含量

续表2

4 结论

五灵脂脂肪酸中含量较高的是十四碳二酸（8.843%）、亚油酸（7.770%）、棕榈酸（5.538%），亚油酸能与胆固醇结合成酯并促使其降解为胆酸而排出，进而使血中胆固醇水平降低；通过改变胆固醇在体内分布，减少了脂质在血管壁的沉积；使血管壁的功能得到维持和改善，并降低血中低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白及三酰甘油水平，使高密度脂蛋白水平升高，医药上用于降低血脂和胆固醇、减少动脉粥样硬化、抑制癌细胞生长和促进大脑发育等。棕榈酸可以将人体内的氧自由基加以分解，起到延缓衰老，促进细胞再生，预防心脑血管疾病的功效［7］。

五灵脂非脂肪酸成分中含量较高的是叶绿醇（7.422%）、雪松醇（5.716%）。叶绿醇是由4个异戊二烯单位组成的双萜，是一个亲脂的脂肪链，它决定了叶绿素的脂溶性，是合成维生素K及维生素E的原料，有综合利用价值，并有较高经济效益。雪松醇主要存在于松柏科植物中［8］，有较强的抗肺癌细胞活性［9］。但五灵脂和松针、侧柏叶中都含有石竹烯、叶绿醇、雪松醇这些成分，这可能与复齿鼯鼠多以松针、松子及侧柏叶等为食有关。

本文通过气相色谱-质谱-计算机联用技术分析了五灵脂中的脂溶性化学成分，共鉴定出15种脂肪酸、27种非脂肪酸，并就其中含量较多的几种进行分析，非脂肪酸中很多组分都有杀菌消炎作用［9］，例如低沸点的醇、醛、酸，杀菌抗感染性强。至于哪些组分使五灵脂既可“行血”又可“止血”，有待于进一步研究。

［1］康廷国.中药鉴定学［M］.北京：中国中医药出版社，2007：526.

［2］魏垠，张秀，黄爱今.毛细管气相色谱和气相色谱／质谱法分析五灵脂挥发性成分［J］.分析化学，2001，29（2）：195-198.

［3］丛浦珠.质谱学在天然有机化学中的应用［M］.北京：科学出版社，1987.

［4］Masada Y.Analysis of Essential oils by Gas Chromatography and Mass Spectrometry［M］.New York：John Wiley and sons Inc，1976.

［5］中国质谱学会有机专业委员会.香料质谱图集［M］.北京：科学出版社，1992：146.

［6］Heller SR.EPA PNIH mass spectral data bese［M］.Washington：Govemment Printing office，1978.

［7］Fukuda N，Etoh T，Wada K，et al.Differential effects of geometrical isomers of octadecadi-enoic acids on ketogenesis and lipid secretion in the livers from rats fed a cholesterolenriched diet［J］.Annals of Nutrition and Metabolism，1995，39：185-192.

［8］GRANTHAMJ，DOUGLASA.G.The nature and origin of sesquiterpenoids in some tertiary fossil resins［J］.Geochim.Cosmochim.Acta，1980，44（8）：1801-1810.

［9］蒋继宏，李晓储，高雪芹.侧柏挥发油成分及抗肿瘤活性的研究［J］.林业科学研究，2006，19（3）：314.

Analysis of Fat-soluble Com ponents in Faeces Trogopterorum by GC-MS

Yang Qi，Zhao Yan，Chen Wenxue，Wang Jian，Wang Yinxiu，Zhang Lianxue
（College of Chinese Medicinal Materials，Jilin Agricultural University，Changchun Jilin130118，China）

Objective：To determine fat-soluble components and relative content fromFaeces trogopterorum.Methods：The fat-soluble components were extracted by continuous reflux extraction，the constituents and their relative content were determined by GC-MS.Results：42 compounds fromFaeces trogopterorumwere isolated and identified，15 kinds of fatty acids account for 49.162%of the total volatility components，27 kind of non-fatty acids account for 44.184%of the total volatility components.Conclusion：The method is rapid and reliable for evaluating the quality ofFaeces trogopterorum.

Faeces trogopterorum；GC-MS；Fatty acids；Content determination

国家科技支撑计划项目——平地栽参关键技术研究（2007BAI38B01）

*张连学，E-mail：zlx863＠163.com

2010-04-26）