全蝎生物酶制剂对小鼠 H22肝癌、S180肉瘤移植瘤的抑制生长作用

陈国光 马 琴

(1太原市第四人民医院,山西省太原市西矿街 231号,030053;2山西医科大学)

全蝎又名全虫,为钳蝎科动物东亚钳蝎(Buthus martensiikirsch)的干燥体 。性味咸 、辛 、平,有毒 ,具有清热解毒、熄风止痉、祛风除湿之功效,符合中医扶正固本、软坚散结、活血祛瘀、清热解毒治疗肿瘤的原则[1]。笔者以全蝎酶提物和全蝎原粉作用于 H22肝癌、S180肉瘤移植瘤小鼠,观察其对肿瘤生长的影响,为全蝎抗肿瘤和全蝎在现代中药制剂中的提取方法提供实验依据。

1 材料

1.1 动物 昆明种小鼠,雌性,体重 18～22g,北京医科大学动物室提供。合格证号码:(京动字)scxk-2002-001。本室动物室自然饲养。

1.2 肿瘤细胞株 S180小鼠肉瘤腹水型荷瘤小鼠、H22小鼠肝癌腹水型荷瘤小鼠。均引自北大医院肿瘤研究所。

1.3 实验用药 全蝎酶解提取物,由北京中医药大学药学院王玉蓉教授提供,每 m L含酶提物 0.0669g,相当于生药 0.08g。复方天仙胶囊,通化白山药业股份有限公司出品,批号:0310061。环磷酰胺(MTX)注射液:江苏恒瑞医药股份有限公司,批号:04111221。

2 方法

2.1 肿瘤接种 据文献[2-3]稍加改动,无菌条件下抽取传代 7天的肿瘤腹水液,无菌生理盐水 1∶3稀释,混匀,冰浴中放置,取 0.2mL注入小鼠右腋皮下为移植性实体瘤。

2.2 动物分组 实验分两批进行,第一批接种 S180肉瘤腹水,接种次日荷瘤鼠随机分肿瘤对照组、阳性对照组、全蝎酶提物大、中、小剂量组 5组,每组最少 10只。全蝎酶提物大、中、小剂量组分别按成人临床剂量的40倍、20倍和 10倍,灌服全蝎酶提物 1.616g/kg、0.808g/kg和 0.404g/kg;灌服体积为 0.5mL,每天 1次,连续 10天。阳性对照组灌服复方天仙胶囊0.75g/kg,相当于成人用药量的 20倍,每天 1次,连续10天。肿瘤对照组灌服等体积蒸馏水,每天 1次,连续 10天。第二批接种 H22小鼠肝癌腹水,接种次日荷瘤鼠随机分肿瘤对照组、阳性对照组、全蝎酶提物大、中、小剂量组 5组,每组最少 10只。全蝎酶提物大、中、小剂量组和肿瘤对照组同第一批。阳性对照组一次性皮下注射环磷酰胺 80mg/kg,相当于临床成人用药量的 6倍。

2.3 观察抑瘤率 停药次日,移植性实体瘤动物脱颈椎处死,称体重后剥离皮下完整瘤块,万分之一电子天平上称重并计算抑瘤率。

表1 各组药物对小鼠 S180肉瘤的抑制试验结果

表2 各组药物对小鼠H22肝癌的抑制试验结果

表3 各组药物对 H22肝癌移植瘤小鼠一般状态和器官指数的影响

2.4 观察药物对荷瘤小鼠一般状态的影响 肿瘤接种后每天观察记录动物的精神、运动、生存的状况,隔日称体重。

2.5 观察药物对荷瘤小鼠免疫器官的影响 摘取小鼠的脾脏和胸腺并称重(mg),并计算器官指数。

3 结果

3.1 各实验组药物对小鼠 S180肉瘤移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小剂量对 S180肉瘤有一定的抑制肿瘤生长的趋势,抑瘤率分别为 11.54%、8.40%和29.78%,见表 1所示。

3.2 各实验组药物对 H22小鼠肝癌移植瘤的抑制作用 全蝎酶提物大、中、小剂量对 H22小鼠肝癌移植瘤均表现出明显的抑制生长作用,全蝎酶提物的抑瘤作用好于全蝎原粉。其抑瘤率分别为 35.58%、42.09%、39.61%,随着全蝎酶解提取物剂量的增大,其抗 H22移植瘤的疗效变化不明显,甚至高剂量组(1.616g/kg)要低于其他两组。对照药环磷酰胺表现出十分明显的抑瘤作用,抑瘤率达 76.10%。见表 2。

3.3 实验药物对荷瘤小鼠一般状况和器官指数的影响 试验所用药物对 S180肉瘤移植瘤小鼠和 H22肝癌移植瘤小鼠的一般状况(活动、精神、皮毛)都无明显的不良影响。实验阳性对照药环磷酰胺在用药的前六天明显抑制 H22肝癌移植瘤小鼠的体重增长,实验结束时小鼠的体重明显低于肿瘤对照组。全蝎酶提物中剂量组在实验结束时荷瘤小鼠体重也低于肿瘤对照组。实验药物对 H22肝癌移植瘤小鼠器官指数的影响见表 3所示。

4 讨论

全蝎是一味名贵中药,民间素有口服蝎毒稀释液治疗癌症的经验。大量的临床研究也证明,全蝎、全蝎复方、粗制蝎毒及蝎毒抗癌因子,对肝癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等均有较好的治疗效果[4]。既往研究表明蝎毒具有明显的细胞毒性及保护血管内皮,削弱肿瘤细胞浸润生长的能力[5]。田爱琴等用不同浓度的蝎毒(SVC)培养基培养人食管癌 Eca109细胞株细胞引起 DNA合成抑制,阻断 G0/G1向 S期的增殖[6]。另有报道,全蝎乙醇粗提物能防止荷瘤小鼠胸腺萎缩,恢复并增强胸腺免疫功能,故停药后机体对肿瘤生长仍有较高的抑制作用[7]。本实验结果也表明全蝎有明显的抑制 H22肝癌生长的作用,且从全蝎酶提物对荷瘤小鼠一般状况和体重的增长情况看其毒副作用明显小于阳性对照药(环磷酰胺)。

全蝎的传统临床应用主要有打粉、用水煎煮等方法,这些方法存在服用剂量大、不利储存、微生物难以控制等诸多弊端。若入煎剂经高温煎煮,其有效成分是否被破坏,此用药方式是否合理也未见文献报道[8]。本实验通过观察全蝎生物酶提取物的抗肿瘤效果。为全蝎在现代中药中的提取方法提供了实验依据。全蝎生物酶解提取物具有一定优势的抑制肿瘤生长的作用已初步在实验中得到证实,但其提取工艺有待进一步完善,具体的作用机理尚有待进一步深入研究。

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