尼莫地平三次脉冲释药系统的研制

唐波，吴怡，邹梅娟，梁学攴瑜，曾燕群，程刚（沈阳药科大学药学院，沈阳市 110016）

尼莫地平三次脉冲释药系统的研制

唐波＊，吴怡，邹梅娟，梁学攴瑜，曾燕群，程刚#（沈阳药科大学药学院，沈阳市 110016）

目的：制备尼莫地平三次脉冲释药系统并考察其体外释药性。方法：利用固体分散体技术制备尼莫地平的速释小片，采用干包衣法制备时滞4 h和8 h的脉冲小片，将此3种小片装入胶囊制成尼莫地平三次脉冲释药系统，并对小片和脉冲释药系统均进行体外释药研究。差示扫描量热（DSC）分析鉴别药物在固体分散体载体中的状态。结果：速释小片在30 min内释药95%以上，脉冲小片在4 h或8 h的时滞期内释药＜10%，时滞期过后的3 h内释药完全；脉冲释药系统分别在5 min、4 h、8 h时实现三次脉冲释药。药物均匀分散于载体中，并以无定型状态存在。结论：成功制备了尼莫地平三次脉冲释药系统。

尼莫地平；脉冲释药；干包衣法；固体分散体；体外释药

＊硕士。研究方向：缓控释制剂的研发及药动学。电话：024-23986326。E-mail：tangbobox@126.com

#通讯作者：教授，博士研究生导师。研究方向：药剂学和临床药学。电话：024-23986088。E-mail：chenggang63@hotmail.com

时辰药理学研究[1，2]表明：人的血压在24 h内呈“两峰一谷”状态波动，一般表现为上午9～11时、下午3～6时最高，午夜最低。在血压达到高峰时，患者常出现头晕、头痛、脑出血等症状。将患者的服药时间改为血压自然波动的两个高峰前，就会使药物显效与血压高峰同步化，从而更好地发挥药效以使血压平稳。

针对高血压疾病的上述时辰药理学特点，笔者制备了降压药尼莫地平（Nimodipine，NMD）三次脉冲释药系统，该系统系将3种不同释药性能的小片装入胶囊内而得。该剂型早晨服药，1日只服药1次，从而增加了患者的顺应性。服药后，胶囊内的3种小片分别实现早、午、晚3次脉冲释药，从而达到平稳降血压的目的。在本研究中，笔者使用干包衣法（又称压制包衣）制备时滞4、8 h的脉冲小片，此方法是当前国内、外研究热点，不但避免了水性包衣耗能、耗时的缺点，也避免了有机溶剂包衣环境污染、有毒的缺点[3，4]。目前，国内、外尚无NMD干包衣制剂的相关文献报道。

1 试药与仪器

1.1 试药

尼莫地平原料药及对照品（新华制药股份有限公司，批号：080211，纯度：99.65%）；尼莫地平市售片（天津市中央药业有限公司，批号：080406，规格：每片含30 mg）；尼莫地平三次脉冲释药系统（沈阳药科大学药学院）；微晶纤维素（MCC，江苏常熟药用辅料厂）；羟丙基甲基纤维素（HPMC，上海Colorcon公司，规格：K100M）；泊洛沙姆188（Poloxamer 188，德国BASF公司）；可压性淀粉（焦作市先达贸易有限责任公司）；十二烷基硫酸钠（SDS）、硬脂酸镁、氯化钠、醋酸钠（天津市博迪化工有限公司）；乳糖（天津市大茂化学试剂厂）；磷酸氢二钠（广东汕头市西陇化工厂），其它试剂均为分析纯。

1.2 仪器

ZRD6-B型药物溶出度仪（上海黄海药检仪器厂）；UV-2000型分光光度计（尤尼柯上海仪器有限公司）；智能型DZF2001A电热恒温真空干燥箱（上海苏进仪器设备厂）；TDP-120型单冲压片机（东港市制药设备厂）；电子分析天平（北京赛多利斯仪器有限公司）；恒温水浴锅（余姚电讯仪表实业公司）；差示扫描量热仪DSC-60（日本岛津仪器公司）。

2 方法与结果

以下各项片剂的制备均在避光条件下进行。

2.1 NMD速释小片的制备

2.1.1 NMD固体分散体的制备。采用熔融法，准确称量质量比为2∶1的载体泊洛沙姆188与NMD原料药，置于90℃水浴上，搅拌混匀，待混合物完全熔融呈黏稠状时，迅速置于冰盐浴上冷却，待完全固化为止。固化物置于冰箱冷冻层放置8 h，取出，置于真空干燥箱中干燥24 h，取出粉碎，过100目筛，干燥、保存、待用。

2.1.2 NMD速释小片的制备。分别称取适量的NMD固体分散体粉末、可压性淀粉、滑石粉等，混匀，并过80目筛3次，用直径6 mm浅凹冲头全粉末直接压片。片重95 mg，含NMD 30 mg。

2.2 时滞4 h脉冲小片的制备

2.2.1 片芯的制备。称取适量的固体分散体粉末、滑石粉，混匀，并过80目筛3次，用直径4 mm浅凹冲头全粉末直接压片。片重50 mg，含NMD 15 mg。

2.2.2 干包衣法压制脉冲小片。以30 mg HPMC、30 mg乳糖及适量滑石粉组成的混匀粉末作为包衣层，用6 mm浅凹冲头直接压制包衣片：先将2/3重的包衣层粉末填入冲模内，将片芯置于冲模中心，预压固定衣层粉末在片芯的侧面和底部，再填入剩余包衣层粉末，压片，即得时滞为4 h的脉冲片。片重115 mg，含NMD 15 mg。

2.3 时滞8 h脉冲小片的制备

片芯的制备及包衣压片方法均同“2.2”项下方法，只是包衣层变为40 mg HPMC、20 mg MCC及适量硬脂酸镁组成的混匀粉末。片重115 mg，含NMD 15 mg。

2.4 体外释放度测定的方法学考察

2.4.1 测定方法的选择。参照《中国药典》2005年版尼莫地平片相关规定[5]，含量测定方法选用紫外分光光度法，在波长238 nm处测定。专属性试验显示，泊洛沙姆188等辅料在238 nm波长处的吸光度小于0.001，说明辅料不干扰NMD的测定。NMD速释小片的释放介质选用pH 4.5醋酸盐缓冲溶液（含0.3%SDS），脉冲小片的释放介质先后分别选用pH 1.2盐酸溶液（含0.3%SDS）和pH6.8磷酸盐缓冲溶液（含0.4%SDS）。

2.4.2 标准曲线制备。精密称取NMD对照品10 mg，置于100 mL容量瓶中，加乙醇10 mL，振摇使溶解，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，得NMD对照品贮备液（100 mg·L－1）。再用释放介质分别稀释制成浓度为20、15、10、8、5、4、2、1 mg·L－1的对照品溶液，在238 nm波长处测定吸光度。以吸光度（A）对浓度（C）进行线性回归，得回归方程。结果，上述pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8 3种释放介质的标准曲线方程及检测浓度线性范围分别为C＝10.897A－0.051（r＝0.999 6，n＝6）、1～10 mg·L－1，C＝33.333A+0.191（r＝0.999 8，n＝6）、4～20 mg·L－1，C＝11.006A－0.018 3（r＝0.999 9，n＝6）、1～10 mg·L－1。

2.4.3 精密度试验。取pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8 3种释放介质的8 mg·L－1对照品溶液，按精密度方法测定并计算。结果在3种释放介质中的RSD分别为0.182%、0.168%、0.197%（n＝6）。

2.5 NMD速释小片体外释药试验

参照《中国药典》2005版尼莫地平片相关规定[5]，以市售NMD片、NMD原料药（30 mg）为对照。以900 mL pH 4.5醋酸盐缓冲溶液（含0.3%SDS）为释放介质，转速75 r·min－1，介质温度（37±0.5）℃。在0、15、30 min时取样5 mL，0.8 μm 微孔滤膜过滤，并即时补加同温同种介质5 mL。续滤液稀释后按紫外分光光度法在波长238 nm处测定吸光度，计算药物累积释药百分率（Q）。速释小片、市售片及原料药的体外Q-时间（t）曲线见图1。

图1 速释小片、市售片及原料药的体外释药曲线Fig 1 Dissolution curves of nimodipine immediate-release tablets，sale nimodipine tablets and crude drugs

由图1可见，NMD原料药、市售片和自制速释小片在30 min内的Q（平均值）分别为14.8%、91.5%和95.6%。表明自制NMD速释小片符合《中国药典》相关规定，达到了或略优于市售片的释药性能，30 minQ值为原料药的6.4倍，说明固体分散体有效地解决了难溶药NMD的释放问题。

2.6 NMD脉冲释药小片释药试验

参照相关文献[6～8]，采用2种释放介质分别模拟胃、肠道内的环境。以900 mL pH 1.2盐酸溶液（含0.3%SDS）为第1种释放介质，转速75 r·min－1，介质温度（37±0.5）℃，在第1、2 h时取样。第2 h时取样后立即将溶出杯中第1种释放介质倒去，换上第2种介质，即900 mL pH 6.8磷酸盐缓冲溶液（含0.4%SDS），转速75 r·min－1，介质温度（37±0.5）℃，在第3、4、5、6、7、8、9、10、11 h时取样。续滤液稀释后按紫外分光光度法在波长238 nm处测定吸光度，计算药物Q，Q-t曲线见图2。

图2 2种脉冲释药小片的体外释药曲线Fig 2 In vitro dissolution curves of 2 kinds of nimodipine pulsatile tablets

由图2可见，时滞4 h脉冲释药小片在1～7 h内的Q（平均值）分别为1%、3.2%、5.5%、8%、70.5%、92.2%、100%。时滞8 h脉冲释药小片在1～11 h内的Q（平均值）分别为0.8%、1.6%、2%、3%、4.5%、6%、7.6%、9.3%、75.6%、91.6%、100%。结果表明，2种脉冲释药小片在规定时滞时间段内几乎不释药，时滞过后能迅速释药且释药完全。

2.7 三次脉冲系统的体外释药试验

将1片速释小片（每片含量30 mg）、2片时滞4 h脉冲释药小片（每片含量15 mg）、2片时滞8 h脉冲释药小片（每片含量15 mg）全装入空硬胶囊内构成一个脉冲释药3次的系统（共含药90 mg）。对此系统进行体外释药试验。试验条件同“2.6”项下释药试验条件。分别在5、10、40 min及1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11 h时取样，续滤液稀释后按紫外分光光度法在波长238 nm处测定吸光度，计算药物累积释药量（W，mg），W-t曲线见图3。

图3 尼莫地平三次脉冲释药系统的体外释药曲线Fig 3 In vitro dissolution curves of nimodipine three-pulse drug release system

由图3可见，胶囊壳在5 min左右溶蚀完全，这时胶囊内的药片才开始释药。结果表明，将3种具有不同释药性能的小片装入胶囊后，其各自的释药性能未受影响；脉冲释药系统分别在5 min、4 h、8 h时实现三次脉冲释药。

2.8 差式扫描量热（DSC）分析

将NMD、泊洛沙姆188以及两者的物理混合物（质量比为1∶2）和固体分散体分别进行DSC分析。测试条件：以空铝坩埚为参比物，另一坩埚内放入样品，扫描速度5℃·min－1，扫描范围20～150℃。4种物质的DSC分析结果见图4。

Fig 4 DSC analysisA.nimodipine；B.poloxamer188；C.nimodipine-poloxamer188 physical mixture；D.nimodipine-poloxamer188 solid dispersion

由图4B可见，泊洛沙姆188在49.25℃处有一吸热峰，即熔点峰。由图4A、C可见，NMD的吸热峰位于122.58℃，为NMD熔点峰，而在图D中NMD的熔点峰消失了，这说明在固体分散体中药物很大程度上以无定型状态存在，药物均匀分散在载体中。

2.9 稳定性试验[9]

将制备的固体分散体置于相对湿度（RH）75%、40℃恒温箱中放置3个月，测定体外释放度并进行DSC分析。3个月后，未见明显老化现象，释药速率和DSC曲线几乎无变化，表明固体分散体稳定性较好。

3 讨论

NMD是第2代二氢吡啶类钙拮抗药，广泛应用于治疗高血压、冠心病及脑血管疾患，但其难溶于水、生物利用度低、半衰期较短，每天需3次给药。固体分散技术是提高难溶性药物体外溶出速度和生物利用度的有效方法之一[9]，因此本文应用该技术制备NMD速释制剂。

制备固体分散体时，笔者曾对不同化合物为载体以及NMD与载体的比例进行筛选。载体筛选除考察泊洛沙姆188外，还考察过聚乙二醇（PEG）6000、PEG4000及聚乙烯吡咯烷酮（PVP）k30等；NMD与载体的比例曾考察过2∶1、1∶1和1∶2等。结果，以泊洛沙姆188为载体、NMD与泊洛沙姆188以1∶2（熔融法或溶剂熔融法）组合的制备方法最佳、释药最快且制备的固体分散体稳定。笔者制备脉冲释药小片时，固定片芯重量和包衣层的总重后，对包衣层的组成和比例（1∶1、2∶1、1∶2）曾进行过筛选，包括HPMC K100M∶乳糖、HPMC K100M∶MCC、HPMC K100M∶PEG 4000、HPMC K100M ∶NaCl、HPMC K15M ∶MCC、HPMC K15M ∶PEG 4000、HPMC K15M ∶NaCl等。试验结果证明，这些处方可以制备时滞1.5 h至12 h的脉冲释药片。由于篇幅原因，本文在此不详述上述处方筛选试验。

脉冲片释放度测定前，为了满足漏槽条件，笔者通过试验确定了释放介质中SDS的加入量。结果表明，pH 1.2盐酸溶液中加入0.3%SDS能达到漏槽条件，pH 6.8磷酸盐缓冲溶液中加入0.4%SDS能达到漏槽条件。考察不同释放介质（水、pH 1.2盐酸溶液、pH 4.5醋酸盐缓冲溶液、pH 6.8磷酸盐缓冲溶液）对片剂释药的影响，结果显示无显著影响。

为了有效地治疗具有时辰药理学特点的高血压疾病，使药物显效与血压高峰同步，笔者成功制备了由3种不同释药性能的小片组成的三次脉冲释药系统。体外释药等试验证明，该处方设计合理，制备工艺简单易行，稳定性、重现性良好。本文所采用的干包衣法所需设备简单，操作方便，可准确地控制包衣层各成分的用量及比例，药物释放不受胃肠道pH值的影响[1]，与通常的水性包衣或有机溶剂包衣相比具有不可比拟的优点（如节能、节时、无毒、无污染），值得进一步推广和研究。

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Preparation of a Three-pulse Drug Release System of Nimodipine

TANG Bo，WU Yi，ZOU Mei-juan，LIANG Xiao-yu，ZENG Yan-qun，CHENG Gang（School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China）

OBJECTIVE：To prepare a three-pulse drug release system of nimodipine and study its drug release.METHODS：Solid dispersion technique and dry-coating method were respectively applied to prepare immediate-release mini-tablets and Pulsatile mini-tablets with lag-time of 4 h or 8 h.Then those mini-tablets were filled into capsule to obtain a three-pulse drug release system and subjected to in vitro dissolution test.DSC was employed to determine drug status in solid dispersion.RESULTS：Immediate-release mini-tablets were released more than 95%in 30 min.Pulsatile mini-tablets were released less than 10%in 4 h or 8 h of lag-time period.After lag-time period，pulsatile mini-tablets were released completely in 3 h.The whole pulsatile drug release system achieved three times of drug release at 5 min，4 h，8 h，respectively.Nimodipine kept amorphous form and were delivered into carrier evenly.CONCLUSION：A three-pulse drug release system of nimodipine has been prepared successfully.

Nimodipine；Pulse drug release；Dry-coating method；Solid dispersion；In vitro release

R944.9；R972+.4

A

1001-0408（2010）05-0430-03

2009-03-24

2009-05-22）