冠心病患者血浆组织因子、组织因子途径抑制物、白介素18、白介素10水平的变化及其关系

李巧汶 ，李志梁，邱 健，马 骏，洪长江，阮云军，顾晓龙

冠心病患者血浆组织因子、组织因子途径抑制物、白介素18、白介素10水平的变化及其关系

李巧汶 ，李志梁，邱 健，马 骏，洪长江，阮云军，顾晓龙

目的 观察冠心病患者血浆组织因子(TF)、组织因子途径抑制物(TFPI)、白介素18(IL-18)、白介素10(IL-10)的变化，探讨其在冠心病(CHD)中的意义及其相互关系。方法 121例患者分为对照组(33例)与CHD组(96例)，CHD组又分为急性心肌梗死(AM I)(33例)，不稳定性心绞痛(UAP)(33例)和稳定性心绞痛(SAP)(30例)三个小组。采用酶联免疫吸附法分别测定血浆 TF、TFPI、IL-18、IL-10的含量。结果 CHD组患者血浆 TF、TFPI、TF/TFPI高于对照组，AM I小组患者血浆 TF、TFPI、TF/TFP显著高于 UAP及SAP小组患者，UAP小组患者高于SAP小组患者；CHD组患者血浆IL-18、IL-10、IL-18/IL-10高于对照组，AMI小组患者血浆 IL-18、IL-18/IL-10显著高于UAP及SAP小组患者，UAP小组患者高于SAP小组患者；AMI和UAP小组患者血浆IL-10水平低于SAP小组患者；CHD组患者血浆TF与IL-18呈显著正相关(r=0.753，P=0.03)，TF/TFPI与IL-18/IL-10呈正相关(r=0.496，P=0.01)。结论 CHD患者促凝因素和促炎症因子均显著升高，且与病情平行。促凝因子和促炎因子呈正相关，提示凝血因子和炎症因子在CHD发病中起重要作用，并可作为病情严重程度评价的参考指标。

冠心病；组织因子；白细胞介素18；白细胞介素10

凝血系统功能紊乱和炎症在冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病，coronary heart disease，CHD)的发病机制中发挥重要作用。人们已从不同的方面进行研究，证实不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris，UAP)患者的冠脉内膜中有大量的凝血因子及炎症因子表达，不同类型CHD患者外周静脉血和血小板、巨噬细胞中含量亦明显升高，且与CHD患者预后密切相关[1～4]。近年来，国外学者认为凝血和炎症系统相互激活，形成炎症-凝血-血栓循环，该循环可能是促进CHD发生发展的重要因素[5～7]。因此，把凝血系统功能紊乱、血栓形成和炎症等病理生理过程联合起来可能是CHD发病机制研究的新方向，但相关的临床资料缺乏。本研究同时检测血浆中分别在外源凝血途径及炎症反应中发挥重要作用的组织因子代谢(tissue factor，TF)、组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor，TFPI)和白介素 18(interleukin-18 ，IL-18)、白介素 10(interleukin-10，IL-10)，以探讨 CHD患者中凝血因子及炎症因子的相互关系及其在CHD的发生发展中的可能作用。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2007年3月至2007年7月收住南方医科大学珠江医院心血管内科96例CHD患者(CHD组)和25例非CHD患者(非CHD组)。CHD患者男63例，女 33例，平均年龄(65±10)岁；对照组患者男 14例，女11例，平均年龄(62±14)岁。CHD组与对照组的CHD危险因素均无显著性差异(表1)。CHD患者均经冠状动脉造影证实至少有1支主要血管狭窄≥50%，而非CHD患者经冠状动脉造影提示主要血管均正常，主要包括心脏自主神经功能症、肋软骨炎、更年期综合征等患者。CHD患者无禁忌证的情况下均予以阿司匹林(拜阿司匹林)或氯吡格雷、β受体阻断剂和(或)血管紧张素转换酶抑制剂、硝酸酯类药物等CHD基础药物治疗，在此基础上，UAP和急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者均予以氯吡格雷、低分子肝素治疗，合并糖尿病、高血压、高脂血症的患者均予以相应的药物治疗。根据ACC/AHA的 CHD分型标准将 96例CHD患者分为AMI小组(33例)、UAP小组(33例)和稳定性心绞痛(stable angina pectoris，SAP)小组(30例)。表2示CHD组各小组患者的病变部位及病变支数。所有对象均询问病史、体检、实验室检查及辅助检查，排除合并心肌炎、严重心功能不全、周围血管疾病、脑卒中、严重肝肾疾病、自身免疫性疾病、血液病、炎症感染、严重的全身其他系统疾病以及使用炎性抑制物的患者。

1.2 标本的采集 SAP患者和对照组于入院第2天清晨空腹抽静脉血，急性冠脉综合征(acute coronary syndromes，ACS)患者在应用肝素、低分子量肝素、静脉溶栓药及抗血小板药之前抽静脉血，留取外周静脉血5ml，所有血标本放置在ENTA-2Na抗凝管。

所有标本经3000 r/min半径1cm，离心15 min后，留取上层血浆1ml送检血脂、血糖、肝肾功能等生化项目，余上层血浆置EP管冻存在-70℃超低温冰箱备用。

1.3 血浆TF、TFPI检测 采用酶联免疫吸附法测定。ELISA检测试剂盒购自美国 RB公司，酶标仪为Biocell H T2酶联免疫检测仪型，操作严格按试剂盒说明书进行。血浆血脂的测定采用酶比色法，血糖、肝肾功能等生化项目分别采用酶法、免疫比浊法等，经医院检验科由全自动生化分析仪(日立1600-020型)测定。

表1 CHD组与对照组患者CHD危险因素的比较〔n(%)〕

表2 CHD组各小组患者的病变部位与病变支数

2 结 果

2.1 不同类型CHD患者血浆 TF、TFPI水平及TF/TFPI的变化 CHD组患者血浆 TF、TFPI、TF/TFPI比值高于对照组(均P＜0.05)。其中，AMI小组血浆TF水平高于UAP小组，UAP小组患者高于SAP小组患者，SAP小组患者高于对照组(均P＜0.05)；AMI小组血浆 TFPI水平高于UAP小组，UAP小组患者高于 SAP小组患者，SAP小组患者高于对照组(均P＜0.05)；AMI小组血浆TF/TFPI高于UAP小组，UAP小组患者高于SAP小组患者(均P＜0.05)，SAP小组与对照组无显著性差异(P＞0.05；表3)。

表3 不同类型CHD患者血浆 TF、TFPI水平及TF/TFPI的变化(±s)

表3 不同类型CHD患者血浆 TF、TFPI水平及TF/TFPI的变化(±s)

注：CHD：冠心病；TF：组织因子；TFPI：组织因子途径抑制物；AMI：急性心肌梗死；UAP：不稳定性心绞痛，SAP：稳定性心绞痛。与对照组比较，*P＜0.05；与 SAP小组比较，#P＜0.05；与 UAP小组比较，ΔP＜0.05

组别 n TF(ng/L)TFPI(μ g/L)TF/TFPI(×10-3)CHD组 96100±22* 101±17* 0.99±0.15*AM I小组 33 120±9*#Δ 114±13*#Δ 1.07±0.13*#Δ UAP小组 33 98±14*# 99±14*# 0.99±0.11*#SAP小组 30 81±20* 89±12* 0.91±0.15对照组 25 61±17 67±13 0.92±0.17

2.2 不同类型CHD患者血浆IL-18、IL-10水平及IL-18/IL-10变化 CHD组患者血浆IL-18、IL-10水平及 IL-18/IL-10明显高于对照组(均P＜0.05)。其中，AMI小组血浆IL-18水平高于UAP小组，UAP小组患者高于SAP小组患者，SAP小组患者高于对照组(均P＜0.05)；AMI小组血浆IL-10水平与UAP小组无显著性差异(P＞0.05)，两者均低于SAP小组(均P＜0.05)，但均高于对照组(均P＜0.05)；AMI小组血浆 IL-18/IL-10高于 UAP小组，UAP小组患者高于SAP小组患者(均P＜0.05)，SAP小组与对照组无显著性差异(P＞0.05；表4)。

2.3 TF与 IL-18、TF/TFPI与 IL-18/IL-10的相关性 在控制CHD患者血浆TFPI、IL-10变化的情况下，CHD组患者血浆TF与IL-18呈显著正相关(r=0.753，P=0.000)，TF/TFPI与 IL-18/IL-10呈正相关(r=0.496，P=0.000；图1)。

表4 不同类型CHD患者血浆IL-18、IL-10水平及IL-18/IL-10变化

图1 CHD患者血浆TF/TFPI与IL-18/IL-10的相关性

3 讨 论

TF即凝血因子Ⅲ，是外源性凝血途径启动子，能启动外源性凝血系统而引起机体的高凝状态，参与冠状动脉内血栓的形成，在CHD的发病机制尤其在ACS的发生中发挥重要作用。最近有研究[8]表明，ACS患者血小板、单核细胞等有大量 TF表达并可引起高凝状态，这可能与ACS的发生密切相关。Morange等[3]研究认为血浆的TF浓度可预测ACS患者的心血管病病死率。TFPI是 TF内源性抑制因子，可抑制活化因子Ⅹa(FⅩa)及活化因子Ⅶ(Ⅶa)/TF复合物，从而特异性地抑制TF介导的血栓形成过程。Golino等[9]体外试验证实，TFPI参与调节ACS患者的血栓形成过程。另外有研究证实[3]，ACS患者血浆TFPI的水平明显升高，且与心肌受损的严重程度相关。本研究通过检测CHD患者的TF、TFPI的水平以反映机体的凝血状态。结果发现，患者血浆TF、TFPI、TF/TFPI随着病情的加重而升高，说明病情越重的CHD患者，其血浆中存在高浓度TF和(或)合并TFPI的相对不足，导致机体的凝血系统失调使机体处于一定的高凝状态，而更容易形成血栓，这解释了血浆TF可预测ACS患者的心血管病病死率的原因。因此，CHD患者血浆TF、TFPI的浓度对于CHD的危险分层、病情评估和预后有一定的临床价值。

IL-18是近年来被证实的一个重要的多功能炎症细胞因子，它可能加速动脉粥样硬化的进展，促使动脉粥样硬化斑块变得不稳定，斑块容易破裂[10]，而不稳定粥样硬化斑块已证实有大量IL-18等促炎因子表达[2]，且血浆IL-18的浓度与冠状动脉斑块面积的大小密切相关[11]，在CHD的预后中也扮演重要的角色[12]。IL-10则是主要的抗炎细胞因子，既能抑制单核、巨噬细胞等活性，又能下调趋化因子和炎症因子对平滑肌细胞增殖的刺激作用，还能直接抑制黏附分子的表达，防止心肌缺血、缺血再灌注损伤，保护心肌，在抑制CHD的发生发展中可能发挥重要作用。Dubey等[13]认为，CHD患者血浆IL-10浓度下降可能是导致斑块不稳定的因素。故CHD患者血浆IL-18、IL-10不但在一定程度上可反映CHD患者炎症状态，而且与CHD的发生发展密切相关。本组资料显示，AMI患者血浆IL-18水平及IL-18/IL-10随着病情的加重而升高，与以往的文献报道相似[14]。AMI和UAP患者血浆IL-10水平明显低于SAP患者，但高于对照组，与国内外研究结果相似[10，15]。提示了IL-10在维持动脉粥样硬化的稳定上可能发挥重要作用。本研究还显示，AMI患者IL-18/IL-10比值高于 UAP及SAP患者，UAP患者高于SAP患者。可见，病情重的CHD患者存在严重的促炎症因子/抗炎症因子失调。Chalikias等[16]研究认为，IL-18/IL-10比值是ACS近期不良事件的独立预测因子。笔者认为联合检测机体的炎症因子与抗炎因子才能准确评估机体的炎症反应状态，这对CHD的危险分层、病情评估及预后有一定的临床价值。

上述结果显示，病情严重的CHD患者处于高凝状态与高炎症反应状态，提示两者可能存在一定的相关关系。国外有学者[17]证实，ACS患者血浆FⅪa与IL-6呈正相关，提示凝血因子与炎症因子可能存在一定的相关性。笔者进一步分析CHD患者血浆 TF与IL-18、TF/TFPI与IL-18/IL-10的相关性。结果发现，血浆的TF与IL-18的浓度呈显著正相关，而TF/TFPI与IL-18/IL-10呈正相关。提示了凝血、炎症反应系统不是相互独立，而是密切相关的。国外学者推测，两者在TF等的连接作用下，互相激活、互相促进，并形成了炎症-凝血-血栓循环，该循环可能在CHD的发病机制中发挥关键作用[5]：炎症不但引起单核细胞等表达TF并使其活性增加，而且导致血管内皮细胞损伤，致使TF暴露于血液中，进而激活外源性凝血途径而易于形成血栓并沉积在血管内壁致血管狭窄、闭塞，而且产生大量凝血酶、FⅩa、TF/Ⅶa/Ⅹa复合物等，这些物质能激活粥样斑块相关细胞，并产生大量炎症介质加重原有的炎症反应，这些炎症介质(如IL-18、血管内皮生长因子等)既能促进血管平滑肌细胞的增生、迁移，又能诱导 TF表达，促使斑块内 TF的促凝活性增加，进一步激活凝血系统[6，18]，这样就形成炎症-凝血-血栓循环。在该循环中，炎症反应不断加重，血栓不断形成，两者共同促进CHD的发生发展。

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Changes in plasma tissue factor，tissue factor pathway inhibitor，interleukin-18 and interleukin-10 concentrations in patients with coronary heart disease and their relationships

L I Qiaowen，L I Zhiliang，QIU J ian，et al Department of Cardiology，Zhujiang Hospital，SouthernMedical University，Guangzhou510282，China

Objective To explore the changes in plasma tissue factor(TF)，tissue factor pathway inhibitor(TFPI)，interleukin-18(IL-18)，and interleukin-10(IL-10)in patients with coronary heart disease(CHD)，and to investigate their roles in the development of CHD and their mutual relationships.Methods A total of 121 patients were divided into control group(n=25)and CHD group(n=96).CHD group was further divided into acute myocardial infarction(AMI)subgroup(n=33)，unstable angina pectoris(UAP)subgroup(n=33)and stable angina pectoris(SAP)subgroup(n=30).Plasma TF，TFPI，IL-18，IL-10 levels were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results The plasma concentrations of TF，TFPI and TF/TFPI ratio were higher in CHD group than in control group；they were higher in AMI subgroup than in UAP and SAP subgroups，and higher in UAP subgroup than in SAP subgroup.The plasma concentrations of IL-18 ，IL-10，and IL-18/IL-10 ratio in CHD group were higher than those in control group.The plasma concentrations of IL-18 and IL-18/IL-10 ratio were higher in AMI subgroup than in UAP and SAP subgroups，and higher in UAP subgroup than that in SAP subgroup.The plasma concentration of IL-10 in AMI and UAP subgroups was lower than that in SAP subgroup.In CHD group，plasma TF was positively correlated with IL-18(r=-0.302 2，P＜0.01)and TF/TFPI ratio was also positively associated with IL-18/IL-10(r=0.3494，P=0.01).Conclusion Hypercoagulability activity and high inflammatory response exist in CHD patients；further more，they parallel with the severity of the disease.The positive relationship between coagulation factors andinflammatory factors suggests that they play an important role in the development of CHD and be used to evaluate the severity of the disease.

coronary heart disease；tissue factor；interleukin-18；interleukin-10

R541.4

A

1671-5403(2010)03-05

广东省自然科学基金项目(2006B36008015)

510282广州市，南方医科大学珠江医院心血管内科〔李巧汶(在读博士研究生)、李志梁〕；510010广州市，广州军区总医院心血管内科(邱健、马骏、洪长江、阮云军、顾晓龙)

邱健，Tel：020-36653568，E-mail：stevenxzf@sina.com.cn

2009-01-21；

2009-11-23)