1 062例高龄孕妇的产前细胞遗传学诊断

任梅宏,张,张晓红

(北京大学人民医院产前诊断中心,北京 100044）

高龄孕妇由于卵子老化,发生染色体不分离的几率增高,致胎儿染色体异常的几率增加,生育畸形儿的几率也相应增加。因而,高龄孕妇应行产前诊断,以检测胎儿是否存在染色体异常。为进一步研究高龄孕妇与胎儿染色体异常检出率的关系,现将我院产前诊断中心自2004年1月至2008年12月的1 062例高龄孕妇染色体检测结果总结如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象2004年1月-2008年12月来自我院产前诊断中心行产前细胞遗传学诊断的高龄孕妇1 062例行羊膜腔穿刺检测胎儿染色体,产前诊断指征为高龄伴或不伴产前筛查唐氏(18-三体）高风险、超声提示胎儿可疑异常、不良生育史、夫妇之一为染色体异常携带者。

1.2 方法羊水细胞检测(孕中期）:妊娠16-28周,在B超引导下取羊水20 ml,1 000 r/min离心10 min,弃上清,留2.5ml-3.0ml细胞悬液,无菌条件下分别接种于Gibco和以色列羊水专用培养基中,置于37℃含5%CO2的培养箱中静置培养6 d-7 d,用羊水培养基换液后每天观察细胞生长情况。当羊水细胞贴壁生长旺盛,倒置显微镜下可见多个克隆,有较多中期分裂细胞时收获,以G带染色(必要时加做C带染色）,分析、计数标准按照ISCN(1985）标准。

2 结果

2.1 不同产前诊断标本中异常染色体核型分析

1 062例羊水细胞标本中,染色体异常核型24例,异常率为2.26%。其中三体综合征12例,性染色体数目异常3例,三倍体1例,染色体结构异常8例。见表1。

2.2 血清学筛查及母亲年龄对胎儿染色体异常发生率的影响

本研究1 062位高龄孕妇中802例未作血清学筛查,198例血清筛查为高危,62例低危,胎儿染色体异常分别为16、7、1例。

进一步将高龄孕妇按照35-37岁、38-40岁、≥41岁分组,分析胎儿异常染色体核型的发生率,可见胎儿染色体异常的发生率与孕妇年龄成正比。

同时将父亲年龄按照35-37岁、38-40岁、≥41岁分组,分析胎儿异常染色体核型的发生率,可见胎儿染色体异常的发生率与父亲年龄也成正比。

表1 24例胎儿羊水染色体异常核型类型

17 36 37 18 高龄,不良孕产史,妻子染色体:45,XX,t(13;14） 45,XY,t(13;14）(q10;q10） 继续妊娠18 37 35 20 孕妇染色体:46,XX,t(Y;14）(Yq12;14p11） 46,XY,t(Y;14）(Yq12;14p11） 继续妊娠19 36 40 17+ 高龄,丈夫染色体:46,XY,t(Y;13） 46,XY,t(Y;13）(Yq12;13p11） 继续妊娠20 35 35 21 高龄,孕妇染色体:46,XX,t(Y;15） 46,XY,t(Y;15）(Y12;15qter） 继续妊娠21 35 37 21 18三体高危,孕妇染色体:46,XX,t(2;6）(p11;q11） 46,XY,t(2;6）(p11;q11） 继续妊娠22 41 38 19 胎儿双侧脉络丛囊肿 46,XX,inv(9）(q11;q22） 继续妊娠23 36 40 19 不良孕产史,高龄 46,XY,inv(9）(p21;q13） 继续妊娠24 36 36 19 丈夫染色体:46,XY,(1qh+）(Y＞18） 46,XX,(1qh+） 继续妊娠

表2 不同年龄段高龄孕妇胎儿染色体异常发生率

表3 不同年龄段父亲胎儿染色体异常发生率

3 讨论

人类女性卵细胞的发生是在胚胎发育早期的卵巢中开始的,即女性胎儿时期卵子的发育就已达到第一次减数分裂前期,并保持在这个时期直至青春期性分化成熟。随着女性生育年龄的增大,其卵巢内处于减数分裂前期的初级卵母细胞在体内停留时间也会逐渐增长,由于长期受内外因素影响,卵子会出现不同程度的老化,导致减数分裂过程中染色体不分离的几率逐渐增高,使胎儿21-三体、18-三体等非整倍体风险增加[1-5]。本研究1 062例高龄孕妇,胎儿染色体异常者24例,异常发生率达2.26%。其中三体综合征12例,21-三体9例,18-三体1例,22-三体2例(1例纯合型,1例嵌合型）,47,XXY2例,Turner1例,三倍体1例,易位5例,inv(9）2例,1号染色体异染色质区重复1例。本研究24例染色体异常患者中加1例三倍体及常染色体、性染色体数目异常共16例,占总异常率的66.67%,与文献报道高龄孕妇由于染色体不分离导致染色体数目异常的概率增加相符合。可见,高龄妊娠,由于卵子老化,染色体不分离的几率较高,导致各种染色体数目异常的概率大大增加。

本研究高龄孕妇中,802例未作血清学筛查,198例血清筛查为高危,62例为低危,胎儿染色体异常分别为 16、7、1例。进一步将高龄孕妇分组,分析显示:35-37岁组胎儿染色体核型异常检出率为1.59%,38-40岁组为5%,≥41岁组则为6.52%,可见胎儿染色体异常的发生率与孕妇年龄成正比。这些再次提示高龄孕妇中胎儿染色体异常的发生率很高,可省略血清筛查,直接进行产前诊断避免患儿出生。

高龄父亲是否会增加染色体异常患儿的出生至今仍是一个有争议的问题[6]。以往资料中很少涉及父亲高龄与胎儿染色体异常之间关系的研究。本研究对父亲年龄进行分组,发现35-37岁组胎儿染色体核型异常检出率为1.32%,38-40岁组为4.10%,≥41岁组则为5.41%,同样出现胎儿染色体异常的发生率与父亲的年龄成正比的现象。因孕妇年龄升高胎儿染色体异常比率明显增高,上述父亲年龄变化是否为伴侣——母亲年龄升高的一种继发现象,不能排除。但也不能排除父亲年龄增高,精子老化,至染色体不分离几率也有所增加。

[1]夏家辉编著.医学遗传学[M].北京:人民卫生出版社,2004:137-360.

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[5]Chen W,Hu J,Liu Q,et al.Influence of maternal age on meiotic spindle and chromosome configuration of oocytes[J].Chin J Med Genet,2007,24:6.

[6]金 帆,戴莳茵,陈玉兰.父母年龄对染色体异常患者出生影响分析[J].中国优生与遗传杂志,1999,7(5）:44.