脱毒微型马铃薯生产技术研究

吴慧中

（天津市园艺工程研究所，天津 300384）

马铃薯是我国重要的粮食及蔬菜作物,生产上大多利用块茎进行无性繁殖。马铃薯在生长期间除了受到虫害的影响,还会因病毒侵染而出现退化。这些病毒一旦侵入马铃薯植株或块茎,就表现出各种各样的退化类型,主要有花叶、卷叶和束顶等。植株表现为矮小、叶片失绿、叶片卷曲坏死、顶部叶片变色、卷缩,块茎表现为变小、龟裂、变尖、内部网状坏死,严重者失去发芽能力,一般减产20%～30%；严重者减产80%以上,而且病情逐年加重,最后失去种用价值。利用茎尖组织培养技术进行马铃薯脱毒快繁已广泛应用于生产,是目前解决马铃薯种薯退化最直接有效的方法。

在原种生产上，马铃薯脱毒试管苗和脱毒试管薯起着非常重要的作用。但是由于脱毒苗运输不便、成活率低，脱毒试管薯生产成本高、生产速度慢，限制了生产上大面积推广脱毒马铃薯。因此，大量地、工厂化生产脱毒马铃薯微型薯显得尤为重要。笔者认为工厂化生产脱毒马铃薯微型薯须掌握以下几项关键技术。

1 马铃薯的茎尖脱毒方法

1.1 脱毒方法

采用茎尖剥离和接种后热处理来脱毒。

1.2 品种

荷兰薯15号大田生产薯块。

1.3 茎尖组织培养基

MS+6-BA 1.0～1.5+NAA 0.1～0.2+肌醇 0.8 mg/L+3.5%蔗糖+0.72%琼脂粉,培养基的PH值5.8～6。

在严格的无菌环境中，在40 x解剖镜下，用无菌刀片，切下0.1～0.2 mm、带1～2个叶原基的茎尖，接种于配制好的茎尖组织培养基中，放入培养室内进行培养。

1.4 培养条件

培养温度23～24℃，培养湿度80%～85%，光强度 2000～2500 lx，光照（12～14） h/d。

在此培养条件下，有利于茎尖的分化和愈伤组织分化，马铃薯茎尖分化率达72.5%～95.5%（不同品种茎尖分化率不同）。30～40 d茎尖明显增长后结合37±1℃的热处理6～8周。培养时及时去除污染苗，将生长正常的苗经3～4个月培养形成的小植株在继代培养基中再增殖1次，待植株生长到一定大小时进行病毒检测。

实验证明：马铃薯茎尖脱毒成功率的高低，除受茎尖大小影响之外，还受人员操作因素的影响。一般来讲，剥离的茎尖越小，所带病毒越少，获得无病毒植株的机会就越高，但培养越困难；离体茎尖越大，成活率越高，但脱毒效果降低。理想的茎尖大小是0.1～0.2 mm，带有1～2个叶原基。

2 脱毒试管苗的快速繁殖

通过茎尖培养获得的试管苗，须大量扩繁，方可满足工厂化生产脱毒微型薯的需要。

把保存的试管苗先进行病毒检测，确信不含各种病毒后再开始切繁。待获得的不含病毒试管苗长至6～8 cm时，在无菌操作室内，切段转接于继代增殖培养基。增殖培养基用MS大量元素+Fe盐IBA 0.2 mg/L+胡萝卜汁100 ml/L+3%食用白糖(卡拉胶12 g/L,pH 6)上，再放回室内培养。一般4周转接1次，繁殖系数5～7。培养最适温度23～24℃，光照时间（14～15） h/d，光照强度1500～2000 lx。

增殖培养基加入100 ml/L胡萝卜汁,成苗时间提前了13 d，成苗率增加了15%，能显著促进茎长和分枝数增加，茎粗大，诱导出的试管苗整齐，生根率高达92%。

为降低马铃薯试管苗快繁成本，可用一般白糖代替蔗糖，用市售的卡拉胶代替琼脂粉，结果单株成本降低35%，总成本降低约25%。

3 脱毒苗生产微型薯技术

3.1 设施准备

微型薯在防虫温室中种植，温室风口绷防虫网，在温室内用建筑用红砖沿温室宽方向铺砌苗床，苗床宽2 m、长7～8 m、深15 cm，底覆一层棚膜或地膜，再铺一层网纱。上铺蛭石和蚯蚓粪基质，厚度10 cm。苗床埂用两层砖错砌，宽度25 cm，配套6 m3晒水池，购置1台微型水泵，农用喷雾器用喷头、长80 cm左右、粗1 cm细胶管，并准备喷壶、塑料桶、塑料盆等。

3.2 铺覆基质

基质选用新蛭石和蚯蚓粪，如蛭石太细可加入适量珍珠岩。将基质倒入苗床中，大水浇透，将基质铺平，在基质表层每苗床撒施氮、磷、钾复合肥500 g，浅耙，与基质混合均匀，用木板将基质刮平，保证基质疏松。

苗床消毒。移栽前任选750～800倍液的代森锰锌、800～900倍液的敌克松、1000倍液的多菌灵、600～800倍液的百菌清、1%的福尔马林溶液其中一种进行苗床消毒。消毒后的苗床5 d后即可移栽脱毒苗。

苗床杀虫。喷施10%的一遍净或10%的吡虫啉可湿性粉剂，消灭网室中的多种传播病毒的媒介害虫。

3.3 炼苗定植

温室在炼苗前用高锰酸钾和甲醛熏蒸，培养20 d的脱毒苗即可拿到温室炼苗。将培养瓶行列整齐摆放到苗床上，棚内炼苗温度20～25℃、湿度80%～90%，光强时适当遮阳。3 d后打开瓶盖封膜，每天用喷壶喷水1次，4 d后脱毒苗变绿就可以定植。将试管苗切成带有一个芽的茎段，转入生根培养基一周后，小苗长成带有苗高7～10 cm、茎粗0.6～0.8 mm、叶片5～8片及3～4条小根的健壮苗，移栽前去掉试管封口，锻炼2 d，即可移栽。在温、湿度条件合适时移栽成活率可达90%以上。生根培养基1/2MS+吲哚乙酸0.2 mg/L+食用白糖2%+琼脂 0.7%，pH 5.8。

将脱毒苗用镊子从培养瓶中取出，放在清水中轻轻洗净根部的培养基，按株距5 cm、行距12 cm，密度为167株/m2打孔栽植，栽植时压实基部的培养土，浇透定根水。移栽后，苗床加盖薄膜以保温保水，提高成活率，7 d后揭去薄膜。

将脱毒苗从培养瓶中取出，放在清水中轻轻清洗根部的培养基，清洗脱毒苗时应注意避免损伤脱毒苗根部，并注意将脱毒苗根部的培养基清洗干净。将脱毒苗剪成双茎节的茎段，用3 mg/l GA3加5 mg/l NAA浸泡，然后按株距5 cm、行距10 cm栽植，栽植时压实基部，用喷壶浇透定根水。

4 生产管理

每年最晚不超过6月15日，在防止蚜虫传播病毒的保护条件下，生产出无病毒和其它病菌的脱毒微型小薯即原原种。

4.1 水分管理

扦插后立即浇透水，使空气湿度保持在85%左右，3 d后略喷点水，以保持湿润。当发现基质变干，要立即浇水，正常情况下2 d浇水一次，具体情况应视苗床干湿情况决定浇水与否，要用手深入到基质中掌握干湿。注意避免由于水分过多引起的烂苗。浇水应该在上午10时以前进行。

4.2 温度管理

新生根成活前15 d以高温、高湿环境，遮阳避光养护为主，温度以25～28℃为宜，减小昼夜温差。生根后注意通风降温，以20℃左右为宜，最低不低于15℃。

4.3 营养管理

不同生育时期使用不同营养液配方，5～8 d浇施一次，同时观察植株的营养生长情况。脱毒苗生长较差时，加大营养液的施用量和施用次数，并辅以根外追肥，植株营养生长过剩时，应减少营养液的施用量和施用次数。在前期加施氮肥可以促进营养生长，培育壮苗，减少病害的发生，后期加施钾肥以满足结薯期的生长需要。

4.4 及时培土

棚内90%的脱毒苗达到3～5 cm时开始压苗，增加匍匐茎的生成。培土进行两次，第一次是压苗前刨沟起垄；第二次是在脱毒苗长到10 cm左右时，用蛭石填满第一次所刨的沟。培土可以增加匍匐茎的生成，因而提高微型薯的结薯率。

4.5 控制徒长

扦插初期小拱棚内相对湿度保持在95%～100%，蛭石基质持水量达到饱和；扦插苗生长前期创造19～22℃的茎叶生长适温；生育后期调低温度至15～18℃，并设法扩大昼夜温差。叶面肥喷施。

扦插苗用0.2%尿素液和磷酸二氢钾水溶液加少量葡萄糖叶面喷施。营养生长过旺，冠盖层覆盖率达95%以上时要控制徒长，用（150～200）mg/L的多效唑处理。

4.6 病虫害防治

发现中心病株及时拔除。中心病株拔除后，苗床用代森锌、瑞毒霉或硫酸铜等药剂喷洒防病。蚜虫首先要加强预防，清除温室或网棚内外杂草，处理作物残枝枯叶，药剂防治用菊酯类杀虫剂。

微型薯生产过程中，虫害主要有金针虫和地老虎，以及传播病毒蚜虫。主要病害有真菌性早疫病、晚疫病以及基质传播放线菌疮痂病。金针虫和地老虎等地下害虫在基质铺覆前，用“地虫特杀”22 kg/hm2均匀撒施防治。瓶苗定植后，每隔10 d喷一次抗蚜威；或用40%乐果乳剂2000倍液喷雾防治蚜虫。并注意检查温室是否有破损之处，及时堵阻漏洞。真菌性病害应以防为主。脱毒苗栽植20 d后，用25%甲霜灵锰锌或72%克露等2 kg/hm2，用水稀释600～800倍液叶面喷雾，每7 d一次，药物交替使用。

5 采收与贮藏

试管苗开始褪绿变黄时停止生长液和水分供应，茎叶全部枯萎后采收微型种薯。收获后将微型薯置于阴凉处晾干表皮水分，剔除个别病烂薯和不够级别的薯块后，微型薯经过摊晾后用尼龙袋或其它透气容器小量包装（5～7.5 kg），按大小分级装袋。最好单存单贮，贮藏期间窖内温、湿度分别控制在2～4℃和80%～90%，并保持良好的通风换气条件。

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