辣椒品种疫霉菌抗性鉴定试验研究

咸文荣 ，张登峰 ，董亮

（1.西北农林科技大学，陕西杨凌，712100；2.青海省农科院植保所）

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌（Phytophora capsici）引起的毁灭性土传真菌病害，轻者减产20%～30%，重则减产一半以上，甚至绝收[1，2]。近年来随着陕西省辣椒种植面积的不断扩大，辣椒疫病发生为害程度日趋严重，成为辣椒生产的重要障碍因子。目前，改进栽培措施和使用化学农药是防治辣椒疫病的常规技术，但防效均不理想[3]。探索新的防治途径已成为控制辣椒疫病，发展辣椒产业亟待解决的重大问题。选育和种植抗病的辣椒品种不仅可以减轻病害损失，且不污染环境，是防治辣椒疫病最经济有效的措施。本研究拟对引进的辣椒品种进行疫霉菌抗性鉴定，以期从中筛选出抗疫病性强的材料，为抗病育种和辣椒嫁接试验筛选砧木提供可靠的依据。

1 材料与方法

1.1 供试辣椒品种

从国内外引进辣椒品种共计77个，其中线椒、干椒和朝天椒29个，牛角椒和羊角椒38个，甜椒10个。

1.2 供试菌种的分离及孢子囊培养

①供试菌种的分离和纯化 辣椒疫病病株采自青海省乐都县碾伯镇北门村白如蒲大棚辣椒发病田中，用PSA培养基分离培养疫霉菌，纯化保存备用。

②孢子囊诱导[4，6]土壤浸出液制备：取菜田肥沃表土500 g，加入1 000 mL蒸馏水，搅拌后静置24 h，取上清液用滤纸过滤2次，滤液即为土壤浸出液，置于4℃冰箱中保存备用。

土壤浸出液培养法：将25 mL土壤浸出液加入9 cm×9 cm培养皿中，把PSA平板上生长7 d的疫霉菌用手术刀分割成1 cm×1 cm大小的菌丝块，取8～10块置于土壤浸出液中，菌丝块的菌丝面朝上，让土壤浸出液刚刚淹过菌丝面，置于26℃，光照连续照射72 h，菌丝块表面可产生大量孢子囊。将培养72 h的菌丝块及浸出液一同倒入三角瓶中，用力振荡10 min，促使孢子囊从菌丝丛上脱落，用双纱布过滤悬浮液，滤去培养基和部分菌丝，滤液为孢子囊悬浮液。用血球计数板测定孢子囊悬浮液的浓度，然后稀释到试验所需的接种浓度，接种液要求现配现用。

1.3 试验设计

试验分2次育苗，2006年6月15日播种干椒和线椒品种，6月19日播种牛角椒、羊角和甜椒品种，各品种直播于4 cm×4 cm（72目）育苗盘的基质中。育苗和接菌试验在西宁市蔬菜研究所自控温室中进行。

接种采用育苗盘灌根法。接种前1 d苗盘浇适量水，保证土壤保持半干半湿状态。育苗47 d后，即苗龄为5～6叶期接种，接种孢子囊浓度为10 250个/mL，用注射器吸取5 mL接种液接种于植株根际土壤中，接种液不能接触到植株根茎部。每个品种重复3次，每次重复10株幼苗，共30株，留10～20株不接种作对照。接种至发病期间保持土壤湿度近饱和。于接种后见有发病株开始调查，间隔3 d调查1次，计算发病率、病情指数。

1.4 调查分级标准

0级：无病；1级：幼苗根茎部轻微变黑，叶片不萎蔫或可恢复性萎蔫；2级：幼苗根茎部变黑达1～2 cm，叶片不可恢复性萎蔫，下部叶片偶有脱落；3级：幼苗根茎部变黑超过2 cm，叶片明显萎蔫或落叶明显；4级：幼苗根茎部变黑缢缩，除生长点外全部落叶或植株萎蔫；5级：植株枯死。

1.5 品种群体抗病性划分标准

高抗（HR）：病情指数≤10；抗病（R）：10<病情指数≤30；中抗（MR）：30<病情指数≤50；感病（S）：病情指数>50。

2 结果与分析

接菌15 d后幼苗发病速度缓慢，病情稳定，故以接菌后15 d调查的结果进行抗性分析。调查时发现甜椒品种发病速度最快，其次是干椒、线椒和朝天椒。另外，各品种发病率和病情指数亦存在一定差异，结果如下。

2.1 干椒、线椒和朝天椒品种苗期疫霉菌抗性鉴定

从图1可以看出，供鉴定的29份干椒、线椒和朝天椒品种中高抗品种有12个，其中，发病率为0的品种 6 个， 分别是 4，6，23，25，26，31 号； 抗病品种有 6个；感病品种有11个。

2.2 甜椒品种苗期疫霉菌抗性鉴定

从图2可以看出，供鉴定的10份甜椒品种中，没有高抗、抗病品种，中抗品种1个（8号），感病品种有9个。

2.3 牛、羊角椒品种苗期疫霉菌抗性鉴定

从图3可以看出，供鉴定的38份牛、羊角椒品种中，没有高抗品种，抗病品种有 4 个（7，9，24，38 号）；中抗品种3个；其余31个品种抗性系数小，表现为感病。

3 结论

鉴定辣椒种质资源对疫霉菌的抗性是抗病育种的关键。通过温室接种试验发现，不同辣椒品种对疫病的抗性存在明显差异。供试的77个样品中，干椒、线椒和朝天椒品种 1，4，6，7，8，9，10，23，25，26，27 和31号共12个品种表现为高度抗病，属高抗品种，占鉴定总数的15.58%；抗病品种共计10个，其中6个来自干椒、线椒品种，4个来自牛、羊角椒品种，占鉴定总数的12.99%；甜椒没有高抗、抗病品种。试验中还发现，随着接种时间的延长，3类不同品种的发病速率不同，甜椒发病速率最快；其次为牛、羊角椒，而线椒、干椒和朝天椒相对较慢。以上结果可为青海省辣椒生产合理利用品种，减少辣椒疫病的为害提供依据。

图1 干辣椒品种接种抗性鉴定

图2 甜椒品种接种抗性鉴定

图3 牛角椒、羊角椒品种接种抗性鉴定

[1]周启明，李林英，杨淑华.辣椒疫病的调查研究[J].中国蔬菜，1984（1）：40-43.

[2]杨君丽，董汇泽，杨淑华.辣椒疫病病原菌确诊及其防治依据的探讨[J].青海农林科技，1995（2）：47-50.

[3]司美茹，薛泉宏，余博，等.辣椒疫霉生防菌的双重筛选[J].植物保护学报，2006，33（1）：41-46.

[4]林柏青，张松林.辣椒品种抗疫病鉴定方法的初步研究[J].中国蔬菜，1994（4）：21-24.

[5]李林，齐军山，李长松，等.主要辣椒品种对疫病、根腐病的抗性鉴定[J].山东农业科学，2001（2）：29-30.

[6]毛爱军，胡洽，耿三省.辣椒疫病菌接种鉴定技术研究[J].北京农业科学，199816（2）：21-24.