牛病毒性腹泻病毒感染对猪瘟免疫的影响

张慧英

（上海市松江区食用农产品安全监督检测中心，上海 松江 201611）

牛病毒性腹泻病毒（BVDV）和猪瘟病毒（CSFV）同属黄病毒科瘟病毒属成员。BVDV除侵害牛引起牛病毒性腹泻、急性或慢性黏膜病、免疫耐受和持续性感染、免疫抑制和母畜流产、早产、死胎外，还可感染猪、绵羊、山羊以及其他反刍动物。猪感染BVDV不表现牛病毒性腹泻的临床症状而呈亚临床感染，其症状和病理变化类似温和型猪瘟，并可产生猪瘟病毒的交叉中和抗体，这给常规的血清学诊断带来一定困难，同时猪感染BVDV产生的抗BVDV抗体对猪瘟病毒有一定的抑制作用，因此猪感染BVDV后对猪瘟疫苗的免疫有干扰作用，会降低猪瘟疫苗的免疫效果。为了解本地区猪源牛病毒性腹泻病毒的感染状况及其对猪瘟免疫猪体内抗体水平的影响，我们进行了本次调查。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 被检血清 来自本区域13个镇（街道）9个规模化猪场、60户散户的368份猪瘟免疫猪血清样本。

1.1.2 检测试剂 美国IDEXX牛病毒性腹泻病病毒抗原检测试剂盒和猪瘟病毒抗体检测试剂盒均购于北京爱德士元亨生物科技有限公司，批号分别为43810-Q381、43220-R941。猪瘟正向间接血凝诊断液、标准阳性血清、标准阴性血清及稀释液均为中国农科院兰州兽医研究所生产，批号：081201。

1.2 方法 牛病毒性腹泻病病毒抗原检测及猪瘟病毒抗体检测参照试剂盒操作说明书进行；猪瘟免疫抗体检测采用正向间接血凝试验的方法。

2 结果

2.1 368份被检猪血清样品中，牛病毒性腹泻病病毒抗原检测结果呈阳性的有7份，阴性有361份，总检出率1.90%，详见表1、表2。

表1 牛病毒性腹泻病病毒抗原检测结果

表2 牛病毒性腹泻感染分类汇总表

2.2 牛病毒性腹泻病病毒抗原检测呈阳性的7份猪血清经美国IDEXX猪瘟病毒抗体检测，结果有3份呈阳性，4份呈阴性。经猪瘟IHA检测（根据上海市猪瘟免疫抗体效价≥1∶64为判定合格标准）其中4份合格，3份不合格，结果详见表3。两种方法的检测结果符合率为71%。

表3 猪瘟抗体检测结果

3 分析与讨论

3.1 对于畜群BVDV感染可通过单克隆抗体ELISA技术、RT-PCR法等进行诊断，但目前国内对畜群中BVDV感染方面的研究相对较少。王新平等对内蒙古、吉林、宁夏等不同地区的牛、羊、鹿进行了病原学调查,结果发现感染率分别为16.5%～89.0%、14.6%～83.3%、19.6%～44.4%。吴文辉等对2007年1月～2008年12月期间上海市各区县送检的184份猪场样品进行BVDV ELISA法检测，其检出率高达50%。本次调查区域的368份猪血清样品中，牛病毒性腹泻病毒感染率为1.90%，相对而言感染率较低，其中规模场的感染率2.47%，散养猪感染率1.46%。通过已有的报道可知，在我国畜群中BVDV感染情况已比较普遍，应引起兽医工作者的重视。

3.2 由于CSFV和BVDV同属黄病毒科瘟病毒属，两者在病毒粒子结构、基因组结构和抗原特性等方面均很接近，在免疫学上存在广泛的交叉性。CSFV和BVDV能在猪体和牛体之间交互感染。Fernelius等（1973）首次从自然感染发病的猪体内分离到BVDV，从而在病原学上证明BVDV可以自然感染猪。猪感染BVDV后可能不表现出临床症状，呈持续性感染，以温和型、母猪繁殖障碍及新生仔猪死亡的猪瘟为多见，且常发生于“免疫”猪群。目前出现的这种非典型或温和型猪瘟与猪BVDV感染，单凭临床症状、病理变化及常规的血清学方法是难以鉴别的，这给猪病的诊断和防治带来新的难题。

3.3 对猪瘟免疫抗体效价的测定有多种方法，常见的有ELISA法和IHA法。ELISA法是针对猪瘟结构蛋白E2（不含BVDV基因片段）建立的血清学抗体检测方法，能区分出BVDV、CSFV抗体，特异性强，但成本高；IHA法成本低，但无法区分两种抗体。本次试验对7份BVDV阳性猪血清分别采用ELISA法和IHA法来检测猪瘟免疫抗体，结果符合率为71%,说明常用的两种方法在猪瘟免疫抗体检测中可能存在误判的问题，采用何种更合理的抗体检测方法有待进一步探讨。

3.4 对猪瘟免疫失败原因的探讨，除了从免疫程序、疫苗质量、免疫剂量、病毒变异等方面去分析外，BVDV的感染问题也应引起人们的重视。持续感染的猪在接种猪瘟疫苗后往往表现出免疫无应答状态，导致免疫失败，免疫率低下。目前认为牛是猪感染BVDV的主要传播来源，尤其是BVDV感染耐过牛已形成免疫耐受，可终生向外界排出大量感染性病毒。如给猪喂乳清和牛奶，猪与牛病毒性腹泻病毒牛接触，人员和工具流动往来于猪场和牛场之间等，均可造成猪群感染牛病毒性腹泻病毒。另外，使用污染的牛组织制造的生物制品或直接被BVDV污染的疫苗，都存在着BVDV感染的可能。Wensvoort等（1988）曾报道，荷兰使用有BVDV污染的疫苗而引起仔猪BVDV的先天性感染，并出现了类似猪瘟的症状。因此,在疫苗生产过程中应加强血清及其相关制品、所用细胞系BVDV的检测，以防止疫苗污染造成损失；同时猪场应该禁止用牛奶或牛废弃物等作为猪的饲料添加剂。通过检测淘汰带毒猪,严禁猪与牛接触或混养,选择无BVDV污染风险的猪瘟疫苗免疫等措施可以预防和控制猪群的BVDV感染。

[1]王新平，涂长春，李红卫，等.从猪瘟病料中检出牛病毒性腹泻病毒[J].中国兽医学报，1996，（4）：341-345.

[2]吴文辉，余红梅，刘婧怡.对生猪感染BVDV的实验检测[J].上海畜牧兽医通讯，2009，（4）：25.

[3]Fernelius A L，AmtowerW C，Malmquist W A，et al.Bovine viral diarrhea virus in swine:chracteristics of virus recovered from naturally and experimentally infected swine[J].Can J Comp Med.，1973，37：96-102.

[4]Wensvoort G，Terpstra C.Bovine viral diarrhea virus infection in piglets born to sow vaccinated against swine fever with a contaminated vaccine[J].Res Vet Sci.，1988，45：143-148.