三七三醇皂苷对胆红素中毒性脑病新生豚鼠MDA和SOD的影响

钟 琳 江西兴国县妇幼保健院（342400）

脑红素中毒性脑病的病死率高，至少有50%～75%的患儿死于急性期，即使幸存，也常留下手足徐动症、眼球运动障碍、听觉障碍、牙釉质发育不全（即“核黄疸四联症”）和智力低下等神经系统后遗症[1-2]。

氧化应激损伤被认为是胆红素中毒性脑病的关键机制之一，活性氧族物质（ROS）的升高已经被证明与胆红素中毒性脑病的发生和并发症的产生密切相关[3-5]。三七三醇皂苷是从我国传统中药三七中提取出的有效成分，具有改善微循环、抗氧化及抗炎等作用。本文主要研究三七三醇皂苷对胆红素中毒性脑病新生豚鼠MDA和SOD的影响。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 生后5～7天的豚鼠30只，重量为40～50g，雌雄各半。

1.1.2 试剂与药品 超氧化物歧化酶（SOD）测定试剂盒、丙二醛（MDA）测定试剂盒及考马斯亮兰蛋白试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，晶体胆红素购自Sigma公司。

1.1.3 仪器 7200 型紫外分光光度计（上海精工）；冷冻离心（Eppendorf）；恒温培养箱（HPX29272MBE，常州诺基仪器有限公司）；玻璃匀浆器（上海仪器二厂）。

1.2 方法

1.2.1 分组与治疗 随机分为3组，分别为对照组、模型组、三七三醇皂苷治疗组，每组各15只豚鼠，三七三醇皂苷治疗组在造模注射胆红素的同时给予三七三醇皂苷20mg治疗。对照组和模型组不做治疗，建立模型8小时后处死新生豚鼠取脑。

1.2.2 胆红素中毒性脑病新生豚鼠模型的制作 避光称取晶体胆红素20mg溶解于1ml 0.5M NaOH中，加入双蒸水9ml，用0.5M HCl调节PH至8.5。给予新生豚鼠胆红素200 μg/g腹腔注射，8小时后模型建立。

1.2.3 脑组织SOD活性及MDA含量的测定 豚鼠术后8小时予以20%乌拉坦（0.15ml/100g）麻醉，快速断头取脑。去除低位脑干及嗅束，用生理盐水冲洗脑表面血液，滤纸吸干表面水分，剥除软脑膜，取双侧大脑半球。以重量（g）/体积（ml）比1∶9加入冰生理盐水后用超声波细胞粉碎机制成组织匀浆，冷冻离心机离心15min，速度3000r/min。取上清液，分别采用黄嘌呤氧化法、硫代巴比妥显色（TBA）法和考马斯亮蓝蛋白测定法测定SOD、MDA和匀浆蛋白量。严格按说明书操作。

2 结果

SOD、MDA含量的改变：如表1所示。

表1 SOD、MDA含量的改变

3 讨论

寻找脑红素中毒性脑病治疗的方法具备重大的意义。中药有望从整体上有效治疗胆红素中毒性脑病，具有其独特的魅力[3-5]。

本研究以新生一周以内的豚鼠为脑红素中毒性脑病模型动物，豚鼠中枢神经发育相对成熟，检测胆红素神经毒性较可靠。证明三七三醇皂苷可以有效治疗脑红素中毒性脑病。

大脑的正常功能活动和神经细胞结构完整主要取决于神经细胞膜的稳定性。脑部因为具有较高的氧化代谢率，含有高密度的膜不饱和脂肪酸以及依赖完整的神经元突触传导，所以特别易于遭受自由基的攻击[2]。因此可以通过测定脑组织MDA、SOD的变化，间接反应脑组织中自由基含量及脑组织损伤程度[1-5]。

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