阿托伐他汀钙对兔动脉粥样硬化的影响

张丽霞

血脂升高是动脉粥样硬化的重要致病因素。降脂治疗可显著降低心血管疾病所致死亡和相关事件，逆转动脉粥样硬化病变的发生。他汀类药物是临床常用的降脂药物，研究发现其物除降脂作用外，还具有抗炎、保护内皮、稳定斑块、抗动脉粥样硬化的作用［1，2］。本实验通过观察阿托伐他汀钙对兔动脉粥样硬化血管内皮的保护作用，探讨其防治动脉粥样硬化的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康日本大耳白兔30只，SPF级，雄性，体重(2.01±0.15)kg，兔龄4个月，由辽宁医学院实验动物中心提供［许可证编号:AYXK(辽2003－0011］。

1.2 试剂与仪器 内皮素-1(ET-1)试剂盒(天津千叶生物制品有限公司)、NO试剂盒(南京建成生物工程研究所)、阿托伐他汀钙(每片10mg，辉瑞公司生产，批号:85837012)、胆固醇(TC，北京邦定生物制药有限公司)、日立7170A全自动生化分析仪、上海751型分光光度计。

1.3 方法

1.3.1 动物分组与模型制备:将30只健康日本大耳白兔，按随机数字表法分为3组，每组10只。空白对照组:给予普通饲料喂养;模型组:给予高脂饲料喂养(高脂饲料配方:1%TC+10%猪油+7.5%蛋黄粉+81.5%普通饲料);治疗组:在给予高脂饲料喂养的同时加用阿托伐他汀钙5mg·kg－1·d－1。每天每只兔给予饲料限制在200 g以内，饮水不限。实验共进行12周。

1.3.2 血脂测定:在日立7170A全自动生化分析仪上测定TC、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。

1.3.3 血清NO和ET-1的测定:实验结束时，空腹12 h经兔耳中央动脉采血5ml，3000 r/min离心后取血清测定NO和ET-1。血清NO采用硝酸还原酶法测定，血清ET-1采用放射免疫法测定。

1.3.4 病理形态学检查:实验结束时，处死动物，取主动脉全长，常规脱水、石蜡包埋后连续切片，切成4 μm的薄片，HE染色，观察病理形态学改变。

1.4 统计学分析应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以表示，多组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA)，2组间比较采用LSD检验，理形态学资料采用对比描述分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组血脂水平比较 与空白对照组比较，模型组、治疗组兔的血清TC、TG、LDL-C水平显著升高(P ＜0.01)，而 HDL-C浓度显著降低(P＜0.01);与模型组比较，治疗组兔血清TC、TG、LDL-C水平显著降低(P ＜0.01)，而HDL-C水平显著升高(P ＜0.01)。见表1。

表1 3组血脂水平比较n=10，mmol/L，

表1 3组血脂水平比较n=10，mmol/L，

注:与空白对照组比较，*P ＜0.01;与模型组比较，#P ＜0.01

2.2 3组血清NO、ET-1水平比较 与空白对照组比较，模型组、治疗组血清NO水平显著降低(P＜0.01)，而ET-1水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较，治疗组血清NO显著升高(P ＜0.01)，而ET-1水平显著降低(P ＜0.01)。见表2。

表2 3组血清NO和ET-1水平比较n=10，

表2 3组血清NO和ET-1水平比较n=10，

注:与空白组比较，*P ＜0.01;与模型组比较，#P ＜0.01

组别 NO(μmol/L) ET-1(pg/ml)空白对照组116.6 ±5.8 312.53 ±6模型组 80.8 ±3.5*463.53 ±24*治疗组 95.8 ±0.8*#351.25 ±8*#

2.3 病理形态学观察结果 HE染色后于光镜下观察，可见空白对照组兔血管内膜光滑完整，中膜平滑肌细胞排列整齐，内皮下无泡沫细胞沉积(图1);模型组兔血管内膜明显增厚并向管腔突起，形成动脉粥样硬化斑块，内含大量泡沫细胞，中膜平滑肌细胞增生、排列紊乱，具有典型的动脉粥样硬化表现(图2);治疗组兔血管内膜轻度增厚，有较少量泡沫细胞，中膜平滑肌细胞增生及排列紊乱不明显(图3)。

图1 空白对照组血管内膜(HE×100)

图2 模型组血管内膜(HE×100)

图3 治疗组血管内膜(HE×100)

3 讨论

Austin等［3］研究证实应用他汀类药物强化降脂可逆转动脉粥样硬化进展。阿托伐他汀钙属于3羟基-3甲基龙二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，通过抑制TC合成的限速酶-HMG-CoA还原酶，抑制肝细胞内TC的合成，上调肝细胞表面LDL-C受体的密度和活性，从而显著降低血LDL-C水平。Nissen等［4］研究显示，应用阿托伐他汀强化降脂治疗可阻断冠心病患者冠状动脉粥样硬化病变的进展。本研究显示:模型组兔的血清TC、TG、LDL-C水平均显著升高(P ＜0.01)，而HDL-C水平显著降低(P＜0.01);兔血管内膜明显增厚，形成动脉粥样硬化斑块，内含大量泡沫细胞，具有典型的动脉粥样硬化表现;而治疗组兔血清TC、TG、LDL-C水平显著降低(P ＜0.01)，HDL-C水平显著升高;兔血管内膜轻度增厚，动脉粥样硬化病变程度较模型组明显减轻。表明:阿托伐他汀钙具有强大的降脂作用，并能升高HDL-C水平，逆转动脉粥样硬化进展。

在多种致病因素(血脂异常、糖尿病、高血压等)作用下，内皮细胞形态结构受损和功能改变，导致血管屏障功能的损害，使血液中的脂质和单核细胞等更易沉积在内皮下间隙，进一步形成泡沫细胞，并促使血管平滑肌细胞增殖，导致动脉粥样硬化病变的形成。因此，改善血管内皮功能已成为防治动脉粥样硬化的重要措施。NO是内皮细胞合成的一种重要的血管活性物质，具有舒张血管，抑制血小板聚集、白细胞黏附及平滑肌增殖，减弱氧自由基产生、低密度脂蛋白氧化等抗动脉粥样硬化的作用。ET也是由血管内皮细胞产生，是目前已知的最强的血管收缩剂。内皮功能障碍导致NO降低、ET增加，在动脉粥样硬化病理进程中起重要作用［5］。研究发现他汀类药物通过多种途径激活NOS，促进NO合成［6］，改善血管内皮功能本研究显示:模型组兔的血清NO浓度显著降低，而ET-1水平显著升高;兔血管内膜明显增厚，形成动脉粥样硬化斑块，具有典型的动脉粥样硬化表现;表明伴随血脂升高血管内皮功能受损促进了动脉粥样硬化的形成;而治疗组兔血清NO浓度显著升高，ET-1浓度显著降低，兔血管内膜轻度增厚，动脉粥样硬化病变程度较模型组明显减轻。

综上所述，阿托伐他汀钙除具有强大的降脂作用外，还通过升高NO浓度降低ET-1浓度，改善血管内皮功能发挥抗动脉粥样硬化作用［7］。

1 龚志刚，苏东东，丁世芳，等.辛伐他汀对柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌早期的保护作用.心脏杂志，2006，18:149-151，158.

2 张晓捷，孙宗全，杜心灵.洛伐他汀预处理的延迟性心肌保护作用及其机制.心脏杂志，2006，18:50-53.

3 Austin PC，Mamdani MM.Impact of the pravastatin or atorvastatin evaluation and infection therapy－thrombolysis in myocardial infarction 22/Reversal of Atherosclerosis with Aggressive Lipid Lowering trials on trends in intensive versus moderate statin therapy in Ontario.Canada Circulation，2005，112:1296-1300.

4 Nissen SE，Tuzcu EM，Schoenhagen P，et al.Effect of intensive compared with moderate lipid－lowering therapy on progression of coronary atherosclerosis:a randomized controlled trial.JAMA，2004，291:1071-1080.

5 Desjardins F，Balligand JL.Nitric oxide－ dependent endothelial function and cardiovascular disease.Acta Clin Belg，2006，61:326-334.

6 Yamanouchi D，Banno H，Nakayama M，et al.Hydrophilic statin suppresses vein graft intimal hyperplasia via endothelial cell－tropic Rho－kinase inhibition.J Vasc Surg，2005，42:757-764.

7 王顺光，赵红宁.阿托伐他汀钙对短暂性脑缺血发作患者颈动脉粥样硬化斑块和血脂的影响.中国全科医学，2008，11:2175-2176.