五种大孔树脂对舒胸片6种成分的静态吸附性能的考察

颜 红， 夏新华， 罗 堃， 雷志丹

（湖南中医药大学药学院，湖南长沙 410208）

舒胸片系《中国药典》2005版一部收载的复方中药制剂［1］，由三七、川芎、红花三味中药制备而成。三七含皂苷类成分（人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1），川芎含生物碱类成分（川芎嗪）与有机酸类成分（阿魏酸），红花含黄酮类成分（羟基红花黄色素A）。为便于应用大孔树脂对该制剂混合提取液进行精制，本文对舒胸片混合提取液中上述6 种有效成分在 LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100 五种大孔树脂上的静态吸附性能进行了研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器 岛津高效液相色谱仪;SPD－10A vp型紫外检测器;LC－10AT vp色谱泵;N3000色谱工作站;岛津AY120型托盘电子分析天平;98－1－B型电热恒温套（天津市泰斯特仪器有限公司）。

1.2 试药 人参皂苷 Rg1（批号110703－200322，供含量测定用）、人参皂苷Rb1（批号110704－200318，供含量测定用）、三七皂苷 R1（批号 110745－200312）、川芎嗪（批号 110817－200305，供含量测定用）、阿魏酸（批号 07733－9910，供含量测定用）、羟基红花黄色素A对照品（批号111637－200502，供含量测定用），均由中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯（Caledon Laboratories LTD.），水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。三七、川芎、红花药材由湖南三湘中药饮片有限公司提供。

LSA－7、LSA－10、LSA－30 型大孔吸附树脂，由西安蓝深交换吸附材料有限责任公司提供;D101A大孔吸附树脂由天津市骨胶厂提供;HPD－100型大孔吸附树脂由沧州宝恩化工有限公司提供。

2 方法与结果

2.1 舒胸片提取液的制备 按《药典》舒胸片处方各药味比例，取三七细粉，加50%乙醇浸泡2.5 h，回流提取2次，加醇量分别为药材的8倍、6倍量，提取时间分别为2.5 h、2.0 h，收集醇提液，回收乙醇，备用;取川芎，加10倍量水煎煮2 h，滤过，滤液另存，药渣与红花加8倍量水煎煮2次，每次1 h，合并煎液，60℃减压浓缩至每1 mL含1 g生药，在搅拌下缓缓加入乙醇使含醇量达70%，静置24 h，滤过，滤液回收乙醇，与上述醇提浓缩液合并，60℃减压浓缩至适当浓度（0.3 g生药/mL），滤过，即得。

2.2 不同树脂的静态吸附实验 称取LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五种预处理好的大孔吸附树脂各2 g（湿重），置于具塞三角锥形瓶中，分别加入浓度为0.3 g生药/mL的舒胸片提取液（pH为4.0）50 mL，密封置于25℃恒温水浴中并定时振摇，24 h后精密吸取上清液各2 mL，分别用HPLC法测定三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷Rb1、川芎嗪、阿魏酸及羟基红花黄色素A的含量，同时测定原液（未经吸附的舒胸片提取液）中上述各有效成分的含量，并按下式计算各有效成分在大孔树脂上的比吸附量（A）与相对比吸附量（RA）。结果见表1、表2。

式中:A为比吸附量（absorbtion ratio，mg/g），即单位质量干树脂吸附某成分的量;M1为起始浓度（mg/mL）;M2为剩余浓度（mg/mL）;V为溶液体积（mL）;W为干树脂重量（g），可根据树脂的含水量由湿树脂重量折算得到。

采用Excel中的数据分析工具对表2中的数据进行双因素无重复的方差分析（ANOVA），结果见表3。

采用Tukey法［2］对6种有效成分的RA进行多重比较检验（即两两比较），若显著性水平（α）定为5%，对于6种有效成分，误差自由度为20（见表3），查Q界值表［2］可知Q值为4.45，则:

表1 6种有效成分在5种树脂上的比吸附量

表2 6种有效成分在5种树脂上的相对比吸附量

表3 双因素无重复的方差分析

式中:s2为上述方差分析中误差的均方（MS），n为样本容量。任意二种有效成分RA平均值之差若大于0.15，则两者之间存在显著性。结果见表4。

表4 6种有效成分RA的两两比较结果（Tukey法）

3 小结与讨论

3.1 根据表1可知，复方提取液中不同组分在大孔树脂上的比吸附量存在较大的差异，它与各组分在药液中的初始浓度关系密切，如人参皂苷Rg与人参皂苷Rb在药液中的初始浓度比三七皂苷R1大得多，其比吸附量也高得多。而同一组分在不同类型大孔树脂上的比吸附量，亦有不同程度的差异，可能与成分、树脂的性质有关，如水溶性强的羟基红花黄色素A在极性树脂LSA－7上具有相对高的比吸附量，而极性较低的川芎嗪在非极性树脂（LSA－30、HPD－100、D101A）上有相对高的比吸附量。

3.2 对于复方提取液，由于不同组分在大孔树脂上的比吸附量受初始浓度影响较大，故根据比吸附量难以直观地评价大孔树脂对不同性质组分的吸附性能。为此，本文提出了相对比吸附量（RA，relative absorbtion ratio，g－1）的概念，即某组分的比吸附量相对于初始药液中该成分总量的比率，它可在一定程度上消除复方提取液中各组分由于初始浓度不同而引起的比吸附量差异，从而对不同组分在树脂上吸附能力的大小作出较为合理的评价。一般地对于一定浓度的复方提取液，若在同一树脂上各组分的RA值相近，则可认为它们彼此在该树脂上的吸附性能接近，并有可能在相同的吸附工艺条件下使各成分同时达到较好吸附分离。反之，对于RA值相差太大的各组分，则难以在相同的条件下同时使它们获得较满意的吸附分离。由表2中不同组分的RA值可知，本实验所考察的舒胸片6种有效成分在LSA－7、LSA－10、LSA－30、D101A、HPD－100五种树脂上的吸附能力的大小依次为:人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、川芎嗪、阿魏酸＞羟基红花黄色素A。对表2进行双因素无重复的方差分析（见表3）表明，5种树脂的RA之间未见显著性差异（P＞0.05），而6种有效成分的RA之间存在显著性差异（P＜0.05）。进一步采用Tukey法对6种有效成分的RA进行多重比较检验，表明人参皂苷Rb1、羟基红花黄色素A的RA与其它各成分均有显著性，而三七皂苷R1、人参皂苷 Rg1、川芎嗪、阿魏酸4种成分RA之间差异不显著（见表4）。

3.3 上述实验研究表明，舒胸片提取液中不同组分在大孔树脂上的吸附能力，有些相近，有些则差异很大。因此，在采用大孔树脂精制中药复方提取液时，要注意复方中不同有效成分在树脂上吸附性能的差异。若差异大，则应特别注意相对比吸附量（RA）小的组分在上柱吸附过程中是否容易产生泄漏而损失。

［1］中国药典［S］.一部.2005:636.

［2］徐秉玖编.药物统计学［M］.北京:北京医科大学出版社，1999:128－129.