超声造影剂制备的初步实验研究

张久云 劳凤云 艾凌艳 袁 强 门秀丽 张连元 刘 红

(华北煤炭医学院基础部物理教研室，①药学系药物分析教研室，②附属医院检验科，③基础部病理生理教研室 河北唐山 063000)

与CT、MRI造影相类似，超声造影剂(ultrasound contrast agent，UCA)是用于医学超声造影检查的增强剂，它不仅可用于诊断，还可用于超声介入治疗。近些年，随着UCA与造影技术迅速发展，超声造影的基础和临床应用的研究日渐深入。目前，超声造影在我国虽尚未广泛开展，但国内一些医院对超声造影的基础及临床应用的研究已达国际水平，UCA与超声造影设备的迅速发展，使得超声造影成为了当前超声医学的热门研究课题[1]。我国UCA的研制起步较晚，目前国产 UCA尚无商品化[2]，临床只能依赖进口。进口UCA价格十分昂贵，这严重影响了我国超声造影技术的普及和发展。所以研制价格低廉、性能稳定的超声造影剂具有重要意义。

本研究采用价格低廉、对人体无毒副作用的药用非离子型表面活性剂司班80(SP80)和吐温80(TW80)为微泡包膜材料，利用超声空化法，在前人[3～6]研究的基础上，初次试制了非离子型表面活性剂超声造影剂，考察了造影剂的基本物理特征。

1 材料与方法

1.1 材料 司班80(失水山梨醇脂肪酸酯)，吐温80(聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯)，媒介液。

1.2 仪器 KQ－500VDB超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)，BX40－Olympus细胞计数器，Olimpus数码显微摄像机。

1.3 微泡造影剂的制备 SP80和TW80按5:1的质量比充分混合，加入适量的媒介液稀释，溶液pH值7.0。取该液20mL于25mL烧杯中，将烧杯置于超声波清洗器中进行声处理。超声功率400W，振荡频率28kHz，声处理时间10min。同时向液体中注入10mL空气，注气速度1mL/min。经超声处理后的微泡悬浮液置于分液漏斗中静置数小时。液体分为3层，表层为浓度高、粒径较大、均匀性较差的微泡层。下层为微泡浓度低、粒径小的液体。中间部分为粒径大小最为合适且粒径均匀的微泡层。弃表层液和下层液，取中间层，加入媒介液洗涤3次，倒入青霉素小药瓶中，密封后低温保存。

1.4 造影剂微泡性能测定 光学显微镜下观察微泡外观形态，并用细胞计数板在用媒介液稀释1 000倍后测量微气泡粒径大小及计数微泡浓度，由Olimpus 显微数码相机摄取造影剂微泡图像，并对稀释后的微泡混悬液进行数据分析，与细胞计数器测得的数据相比对。

2 结果

超声空化法制备的非离子表面活性剂微泡造影剂原液(图1)，外观为乳白色的混悬液，不透明。图2是静止提取的微泡造影剂光镜下观察效果。光镜下微球形态圆整，大小均匀，分散性好，浓度在109/mL数量级，粒径均值3.74μm。图3是经过3次洗涤之后提取液的微泡图片。结果显示，由于离心作用，致使微泡融合，产生一些较大气泡。所有样品在4℃冰箱内存放1周均能保持稳定状态，期间未见微球融合现象。

图1 造影剂实物图

图2 静置提取的微泡显微照片(×400)

图3 洗涤后的微泡显微照片(×400)

3 讨论

声学造影剂是内含气体的微气泡悬浮液，其直径通常＜7μm，经静脉注射后能顺利通过肺循环，增强组织的灰阶显像，增强彩色多普勒血流信号，提高病灶及多普勒血流信号检出率，目前已被广泛用于疾病的超声诊断与鉴别诊断[7]。本实验选用了药用标准的非离子型表面活性物质司班80和吐温80作为气泡的成膜材料制得的超声造影剂，普通光学显微镜观察，经静置提取的造影剂微球，形态规则，微球粒径圆整，大小均匀，分散度好，平均粒径3.74μm，浓度在109/mL数量级。完全满足微泡声学造影剂的条件要求，为下一步的研究奠定了一个很好的基础。

实验发现，经洗涤获取的造影剂出现了融合现象，有较大气泡产生，微球粒径均匀性下降，致使造影剂质量降低。在今后的研究工作中需考虑进一步改进分离条件。另外，目前制备造影剂注入的气体普遍采用的是氟碳类大分子惰性气体，如全氟丙烷气体、六氟化硫等。充有氟碳类气体的微泡性能稳定，成像效果好。而本实验因是初次试制，考虑到节约经费故用的气体是空气。

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